国家自然科学基金(30570876)
- 作品数：3 被引量：13H指数：2
- 相关作者：李启富李卫平青华马仕坤程庆丰更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组穿梭质粒pAdTrack-CMV-PGC1α的构建及鉴定被引量：1
- 2006年
- 目的构建编码小鼠PGC1α基因的质粒,为进一步研究定向诱导PGC1α在白色脂肪组织特异性表达做准备。方法提取小鼠肾脏总RNA,利用RT-PCR扩增目的基因,引物设计时在两端分别引入EcoRV和SalⅠ的酶切位点,双酶切后与经过同样处理的穿梭质粒载体pAdTrack-CMV相连,经酶切和PCR鉴定。结果通过RT-PCR获取了目的基因并成功克隆入载体,目的基因序列与GENEBANK报道序列一致。结论构建出编码小鼠PGC1α基因的重组质粒pAdTrack-CMV-PGC1α。
- 马仕坤程庆丰青华冯正平李卫平周波张素华李启富
- 关键词：脂肪组织穿梭质粒
- 编码小鼠PGC1α基因的重组腺病毒载体构建及鉴定被引量：2
- 2009年
- 目的:构建编码小鼠PGC1α基因的重组腺病毒载体,为进一步研究其蛋白功能提供工具。方法:穿梭质粒pAdTrack-CMV-PGC1α线性化后与骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183菌中完成同源重组,筛选并提取重组正确的腺病毒质粒,PacⅠ线性化,脂质体转染293细胞包装出成熟的具有感染活力的腺病毒颗粒,TCID50法测定病毒滴度,Western bloting检测PGC1α蛋白在293细胞的表达。结果:测序及酶切鉴定表明目的基因正确插入穿梭质粒,读码框未发生移位。重组腺病毒扩增后滴度约3×1010TCID50/ml,能在293细胞中表达PGC1α蛋白。结论:利用细菌内同源重组的方法成功构建了编码小鼠PGC1α基因的重组腺病毒载体,并观察到其蛋白表达。
- 马仕坤钟立程庆丰李卫平青华李启富
- 关键词：腺病毒载体同源重组
- PGC-1α与肥胖被引量：10
- 2006年
- 李卫平李启富
- 关键词：PGC-1Α肥胖棕色脂肪白色脂肪
