国家自然科学基金(31000048)
- 作品数：7 被引量：36H指数：4
- 相关作者：魏华徐锋王报贵万翠香章昭琳更多>>
- 相关机构：南昌大学武警山东省总队医院山东省千佛山医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划江西省教育厅科学技术研究项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程医药卫生生物学更多>>
- 利用双标记PCR产物的量子点检测副溶血性弧菌被引量：4
- 2015年
- 副溶血弧菌是一种能引起食源性疾病的重要病原菌,为了对该细菌进行检测,研制一种快速、灵敏、简便的量子点免疫层析试纸条。通过磁珠富集DNA后用双标记的特异性引物（上游引物5’用地高辛标记,下游引物5’用生物素标记）扩增不耐热溶血毒素基因（TLH）,进行量子点免疫试纸条的检测。结果表明,荧光定量PCR检测磁珠（Si-MNPs）的捕获率在浓度102~106 CFU/m L均在50%以上,浓度为102 CFU/m L时达到最高捕获率（64%）。在纯培养物及模拟检测中试纸条的检测限均为4×100 CFU/m L,但在模拟检测中T线的显色强度弱于纯培养物的检测,说明鱼肉糜样本的复杂成分对检测灵敏度有一定的影响,但添加高浓度杂菌（阪崎肠杆菌、志贺氏菌）不影响该方法的特异性。方法具有特异性强、灵敏度高,并且操作简便、检测成本低的特点,2 h即可完成,为副溶血弧菌的快速检测提供了有效手段。
- 许海波魏华张勇王报贵
- 关键词：副溶血弧菌量子点
- 牛奶样品中志贺氏菌胶体金免疫试纸条检测方法的建立被引量：6
- 2012年
- 通过用超声波破碎的宋内氏志贺氏菌和福氏志贺氏菌的菌体碎片为免疫原免疫BALB/c小鼠,获得4株能稳定分泌抗志贺氏菌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,选取其中一株制备单抗,并用胶体金标记。同时抗志贺氏菌的兔多抗和驴抗鼠抗体(二抗)分别喷涂于硝酸纤维素膜作为检测线(T线)和质控线(C线),研制了志贺氏菌胶体金快速检测试纸条。结果显示试纸条的灵敏度为105mL-1,并只与两株志贺氏菌有阳性反应外,而与其它23株常见的细菌无交叉反应。同时在检测添加有阪崎肠杆菌和长双歧杆菌的牛奶样品中,结果显示试纸条的灵敏度为106mL-1。志贺氏菌免疫胶体金试纸条的建立,为加强食品中志贺氏菌的检测工作,建立一种快速、简便的筛查方法具有重要的意义。
- 徐锋武晓丽徐迪明星魏华黎鹏
- 关键词：宋内氏志贺氏菌福氏志贺氏菌试纸条
- 发酵驴奶乳酸菌的筛选及其生理作用被引量：10
- 2013年
- 为筛选可用于驴奶发酵的价值菌株,从凝乳能力、酸度、胞外多糖产量等角度评价本实验室现有乳酸菌对驴奶发酵的生产性能及其抗氧化性、致病菌拮抗等益生性能。结果表明:6株乳酸菌均可使驴奶凝乳,其中Lactobacillus reuteri、Lactobacillus plantarum和Lactobacillus rhamnosus凝乳能力和抗氧化活性最佳,而Lactobacillus plantarum对所测试8株致病菌均具有良好的拮抗效果,Lactobacillus rhamnosus可产生高达70mg/L的胞外多糖。本结果揭示乳酸菌发酵驴奶的可行性及其益生和保健效果。
- 彭珊珊李胜杰陈廷涛魏华徐锋
- 关键词：乳酸菌抑菌抗氧化性胞外多糖
- 高频超声与磁共振对急性外伤性髌骨外侧脱位后内侧髌股韧带损伤的对比研究被引量：7
- 2012年
- 目的比较分析高频超声与磁共振（MRI）对急性外伤性髌骨外侧脱位后内侧髌股韧带（MPFL）损伤的诊断价值。方法回顾性分析35例经临床证实急性外伤性髌骨外侧脱位的高频超声和MRI资料，以手术结果为金标准，分析MPFL损伤发生率、损伤部位，计算高频超声、MRI诊断MPFL损伤的敏感性、特异性和准确性，比较两种检查方法的有效性。结果急性外伤性髌骨外侧脱位后，MPFL损伤发生率为100％，其中完全性MPFL撕裂21例，部分性MPFL撕裂14例，股骨侧撕裂19例，髌骨侧撕裂15例，中段体部撕裂1例；与手术结果比较，高频超声诊断MPFL部分撕裂的敏感性、特异性、准确性分别为78．6％、95．2％、88．6％，MRI诊断MPFL部分撕裂的敏感性、特异性、准确性分别为85．7％、90．5％、88．6％；高频超声诊断MPFL完全撕裂的敏感性、特异性、准确性分别为95．2％、78．6％、88．6％，MRI诊断MPFL完全撕裂的敏感性、特异性、准确性分别为90．5％、85．7％、88．6％。高频超声对MPFL部分撕裂、完全撕裂的诊断与MRI比较差异无统计学意义（Y。=0．243、0．267，P=0．622、0．599）。结论急性外伤性髌骨外侧脱位后，MPFL股骨侧最易损伤，其次为髌骨侧，高频超声与MRI检查同样能对MPFL损伤明确诊断和准确分级，是一种简单可靠、快捷可重复的诊断方法，可作为急性外伤性髌骨外侧脱位后MPFL损伤的常规检查方法。
- 张广英郑雷史浩曲素慧李荔丁红宇
- 关键词：超声检查髌骨脱位内侧髌股韧带
- 高黏附力双歧杆菌的筛选与鉴定被引量：4
- 2012年
- 利用体外细胞培养法,从实验室现有的10株双歧杆菌中筛选具有较强粘附能力的菌株。采用革兰氏染色法和平板计数法,评价了这10株双歧杆菌对HT-29细胞的粘附性能,通过测定这10株双歧杆菌的16S rRNA基因序列(16S rDNA)进行分类学鉴定。结果显示,WBBI01,WBBI02,WBIN03,WBBI06具有极强的黏附力,其黏附指数分别达1.97×103,2.17×103,3.57×103,1.88×103。经16S rDNA测序鉴定WBBI01,WBIN03,WBBI06均与两歧双歧杆菌S17有极高的同源性,而WBBI02属于长双歧杆菌。结果表明,双歧杆菌黏附性能具有明显的种属特异性,不同种属双歧杆菌的粘附能力相差极大,以两歧双歧杆菌的黏附性能最强,婴儿长双歧杆菌为最弱。
- 万翠香章昭琳王报贵魏华甘艳云
- 关键词：益生菌RDNA双歧杆菌
- 双歧杆菌原生质体的制备及其转化系统的建立被引量：4
- 2012年
- 考察了长双歧杆菌WBL001菌体生长状态、酶解浓度、时长、温度以及不同渗透压稳定剂等因素,获得长双歧杆菌WBL001原生质体制备及再生的优化条件:长双歧杆菌以3%接种量活化至MRS培养基,培养至对数中期(OD600∶1),5μg/mL变溶菌素,37℃孵育30 min,以原生质体稳定液SMM为反应缓冲液,原生质体生成率达到81%,其再生率达到48%;在此基础上,通过聚乙二醇PEG融合,将穿梭表达载体pBAX转入双歧杆菌原生质体,成功建立双歧杆菌转化体系。
- 万翠香章昭琳王报贵魏华
- 关键词：双歧杆菌原生质体
- Serpin多抗制备和产Serpin的双歧杆菌菌株的初步筛选被引量：1
- 2011年
- 从长双歧杆菌WBL001基因组中克隆了serpin基因,构建重组Serpin蛋白的原核表达体系pBX2-serpin,纯化表达产物作为抗原,免疫小鼠制备Serpin的多克隆抗体。采用偶联Serpin的磁珠纯化多克隆抗体,并探究了不同溶剂对抗体洗脱效率的影响。纯化的多抗用于斑点杂交筛选产Serpin蛋白的菌株。结果表明:磁珠纯化多克隆抗体以1 mol/L NaOH的洗脱率最高,达50%;纯化后的Serpin抗体消除了与部分乳酸菌和致病菌的非特异性反应;采用斑点杂交方法从11株双歧杆菌中筛选到婴儿双歧杆菌WBAN07具有类Serpin蛋白。
- 崔佳万翠香杨友均黎鹏魏华章昭琳徐迪徐锋李波
- 关键词：SERPIN纯化抗血清斑点杂交
