苏州市科技发展计划(SYSD2012085)
- 作品数：6 被引量：19H指数：3
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- 七氟醚后处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞胀亡的影响：与线粒体通透性转换孔的关系被引量：3
- 2013年
- 目的评价七氟醚后处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞胀亡的影响及线粒体通透性转换孔（MPTP）在其中的作用。方法雄性SD大鼠60只，3月龄，体重280～360g，采用随机数字表法，将其分为5组（n=12）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I／R组）、七氟醚后处理组（SP组）、七氟醚后处理＋苍术苷组（SP＋ATR组）和苍术苷组（ATR组）。采用结扎左冠状动脉前降支30min后再灌注的方法制备心肌缺血再灌注模型。SP组和SP＋ATR组于缺血27min到再灌注开始后2rain吸入2．5％七氟醚，共5min，其余组吸入氧浓度33％的空气。SP＋ATR组和ATR组于缺血前15min经颈静脉注射MPTP开放剂苍术苷5mg／kg。记录心率和收缩压，计算二者乘积（RPP）；于再灌注2h时取心肌组织，测定心肌梗死范围；电镜下观察心肌超微结构；采用WeSternblot法测定诱导膜损伤的前胀亡受体（Porimin）表达水平；采用分光光度法测定心肌烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD＋）含量。结果与S组比较，其余4组心肌梗死范围扩大，Porimin表达上调，NAD＋含量和RPP降低（P〈0．05）；与I／R组和SP＋ATR组比较，SP组心肌梗死范围缩小，Porimin表达下调，NAD＋含量升高（P〈0．05），ATR组上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论七氟醚后处理可通过抑制MPTP开放，减少心肌细胞胀亡，对大鼠缺血再灌注心肌起到保护作用。
- 殷明王琛张静朱江曹建方陈培敏
- 关键词：心肌再灌注损伤细胞死亡
- 七氟醚后处理对大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌细胞p70S6K表达的影响被引量：3
- 2014年
- 目的 评价七氟醚后处理对大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌细胞核糖体40S小亚基蛋白S6激酶（p70S6K）表达的影响.方法 取Langendorff心脏模型制备成功的大鼠心脏90个,采用随机数字表法分为3组（n=30）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）和七氟醚后处理组（SP组）.离体心脏缺血30 min,再灌注2h.SP组于缺血末至再灌注15 min灌注经3.0％七氟醚饱和的K-H液,随后更换为正常K-H液再灌注105 min.于再灌注2h时测定心肌梗死体积,计算心肌梗死体积百分比,采用Western blot法检测心肌细胞p-p70S6K/t-p70S6K、细胞质和线粒体细胞色素c和caspase-8的表达水平.结果 与S组比较,I/R组心肌梗死体积百分比升高,心肌细胞p-p70S6K/t-p70S6K、细胞质细胞色素c和caspase-8表达上调,线粒体细胞色素c表达下调（P＜0.05）;与I/R组比较,SP组心肌梗死体积百分比降低,心肌细胞p-p70S6K/t-p70S6K和线粒体细胞色素c表达上调,细胞质细胞色素c和caspase-8表达下调（P＜0.05）.结论 七氟醚后处理可减轻离体大鼠离体心脏缺血再灌注损伤,其机制与上调心肌细胞p-p70S6K表达,抑制线粒体细胞色素c转移至细胞质,从而减少细胞凋亡有关.
- 张静乔世刚胡素梅殷明曹建方王琛
- 关键词：心肌再灌注损伤细胞凋亡
- NOS-NO-NHE1通路在七氟醚后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用：离体实验被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨一氧化氮合酶-一氧化氮-钠氢交换蛋白l（NOS-NO-NHE1）通路在七氟醚后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤中的作用.方法 取Langendorff灌流模型制备成功的雄性SD大鼠离体心脏72个,采用随机数字表法,将其分为6组（n=12）,假手术组（S组）：连续用K-H液灌注180 min;七氟醚组（Sev组）：K-H液灌注60 min后,用含2.5％七氟醚的K-H液灌注15 min,再用K-H液灌注105 min;缺血再灌注组（I/R组）：K-H液灌注30 min后,停灌30 min,再灌注120 min,制备心肌缺血再灌注损伤模型;七氟醚后处理组（SP组）：于再灌注开始即刻用含2.5％七氟醚的K-H液灌注15min,随后再用K-H液灌注105 min;七氟醚后处理＋NOS抑制剂左旋-硝基精氨酸甲基酯（L-NAME）组（SPL组）：再灌注开始用含浓度为100 μmol/L L-NAME的K-H液灌注60 min,同时在K-H液中通入2.5％七氟醚维持15 min,随后再K-H液灌注60 min; L-NAME组（L组）：再灌注开始即刻用含浓度为100μmol/L L-NAME的K-H液灌注60 min,再换用上述单纯K-H液灌注60 min.于再灌注2h时取心肌组织,采用分光光度法检测NO、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD＋）含量和NOS活性,Western blot法测定总NHE1 （t-NHE1）和磷酸化NHE1（p-NHE1）的表达,RT-PCR法测定NHE1 mRNA的表达水平,并测定心肌梗死体积,观察心肌超微结构.结果 与S组比较,I/R组、SP组、SPL组和L组心肌梗死体积增大,心肌NO、NOS和NAD＋水平降低,p-NHE1及NHE1 mRNA表达上调（P＜0.05）,Sev组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）;与I/R组比较,SP组心肌梗死体积减小,心肌NO、NOS和NAD＋水平升高,p-NHE1及NHE1 mRNA表达下调（P＜0.05）,SPL组和L组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）;与SP组比较,SPL组和L组心肌梗死体积增大,心肌NO、NOS和NAD＋水平降低,p-NHE1及NHE1 mRNA表达上调（P＜0.05）.SP组心肌病理学损伤较I/R组和SPL组减轻.结论 七氟醚后处理可能通过增强心肌NOS活�
- 曹建方殷明谢红孙莹乔世刚吴浩荣王琛覃琴朱江
- 关键词：心肌再灌注损伤
- 七氟醚后处理对大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌细胞胀亡和凋亡的影响：与ERK1/2信号转导通路的关系被引量：10
- 2014年
- 目的 评价七氟醚后处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞胀亡和凋亡的影响及细胞外信号调节激酶（ERK） 1/2信号转导通路在其中的作用.方法 取Langendorff离体灌注模型成功的大鼠心脏72个,采用随机数字表法分为6组（n=12）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）、七氟醚后处理组（SP组）、ERK1/2抑制剂PD98059组（PD组）、PD98059溶剂二甲基亚砜组（DMSO组）和七氟醚后处理＋ PD98059组（SP＋ PD组）.除S组,其余各组心脏缺血30 min,再灌注2h.SP组、DMSO组和PD组分别于缺血末至再灌注15 min灌注经3.0％七氟醚、DMSO（＜ 0.2％）和PD98059（20 μmol/L）饱和的K-H液,随后更换为正常K-H液再灌注105 min.SP＋ PD组于缺血末至再灌注15 min灌注经3.0％七氟醚和PD98059（20 μmol/L）饱和的K-H液.再灌注末测定心肌梗死体积,采用Western blot法检测porimin和caspase-8蛋白表达水平.结果 与S组比较,其余各组心肌梗死体积增加,porimin和caspase-8表达上调（P＜0.05）；与I/R组比较,SP组梗死体积减少,porimin和caspase-8表达下调（P＜0.05）,其余各组各指标差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 七氟醚后处理可激活ERK1/2信号转导通路,抑制心肌细胞胀亡和凋亡,从而减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤.
- 张静王琛胡素梅曹建方谢红朱江孙亦晖
- 关键词：心肌再灌注损伤细胞外信号调节MAP激酶类
- 线粒体ATP敏感性钾通道在七氟醚预处理对大鼠离体缺血再灌注心脏延迟性保护中的作用被引量：1
- 2012年
- 目的评价线粒体ATP敏感性钾通道（mito—KATP通道）在七氟醚预处理对大鼠离体缺血再灌注心脏延迟性保护中的作用。方法健康成年雄性SD大鼠72只，体重270～350g，采用随机数字表法，将其随机分为6组（n=12）：对照组（CON组）、缺血再灌注组（I／R组）各吸入33％氧气1h；七氟醚对照组（SEVO组）、七氟醚预处理组（SWOP组）各吸入2．5％七氟醚1h；5-羟葵酸＋七氟醚预处理组（5-HD＋SWOP组）于七氟醚预处理前30min腹腔注射mito-KATP阻断剂5-羟葵酸10mg／kg；5-羟葵酸对照组（5-HD组）腹腔注射5-羟葵酸10mg／kg，24h后除CON组和SEVO组，其余组建立大鼠Langendorff离体心脏灌注模型，停止灌注30min，再灌注120min。于缺血前即刻（T0）和再灌注120min（T1）时采用Western blot法检测心肌组织磷酸化的ε型蛋白激酶C（p-PKC-ε）、caspase-8蛋白的表达水平；于再灌注120min时采用TFC法测定心肌梗死范围，计算心肌梗死体积百分比。结果与CON组比较，I／R组、SWOP组、5-HD＋SWOP组和5-HD组T1时心肌梗死体积百分比升高，SEVO组和SWOP组T0时，I／R组、SWOP组、5-HD＋SWOP组和5-HD组T1时心肌p-PKC-ε蛋白表达上调，SEVO组L时caspase-8蛋白表达下调（P〈0．05）；与I／R组比较，SWOP组和5-HD＋SWOP组T1时心肌梗死体积百分比降低，SEVO组和SWOP组T0时p-PKC-ε蛋白表达上调，SWOP组T1时caspase-8蛋白表达下调（P〈0．05）；与SWOP组比较，5-HD＋SWOP组心肌梗死体积百分比升高，T0时p-PKC-ε蛋白表达下调，T1时caspase-8蛋白表达上调（P〈0．05）。结论mito-KATP通道参与了七氟醚预处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损伤的过程，可能与上调缺血前p-PKC-ε蛋白表达水平，从而抑制再灌注时细胞凋亡有关。
- 胡素梅乔世刚谢红陈培敏殷明覃琴刘霞曹建方王琛
- 关键词：KATP通道蛋白激酶CΕ
- 七氟醚预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的影响及自噬在其中的作用被引量：4
- 2013年
- 目的评价七氟醚预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的影响及自噬在其中的作用。方法成年雄性sD大鼠45只，体重420～450g，采用随机数字表法分为5组（n=9）：对照组（Con组）、脊髓缺血再灌注组（I／R组）、七氟醚预处理组（Sevo组）、特异性自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤组（3-MA组）和3-MA＋七氟醚预处理组（3-MA＋Sevo组）。I／R组胸主动脉球囊阻断＋体循环低血压制备大鼠脊髓缺血再灌注模型，Sevo组于缺血前24h时吸入3．4％七氟醚2h，3-MA组和3-MA＋Sevo组分别于再灌注即刻和吸入七氟醚前15min时鞘内注射20μl3-MA（10mmol／L）。于再灌注24h时采用神经功能缺陷评分（NDS评分）法评价大鼠神经功能，随后处死取脊髓，Westernblot法检测LC3B、Beclin1、Bcl-2蛋白的表达水平。结果与Con组比较，I／R组脊髓LC3B、Beclin1蛋白表达上调，Bcl-2蛋白表达下调，NDS评分升高（P〈0．05）；与I／R组比较，Sevo组、3-MA组和3-MA＋Sevo组脊髓LC3B、Beclin1蛋白表达下调，Bcl-2蛋白表达上调，NDS评分降低（P〈0．05）；Sevo组、3-MA组和3-MA＋Sevo组各指标比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论七氟醚预处理可减轻大鼠脊髓缺血再灌注损伤，其机制可能与上调Bcl-2，抑制自噬溶酶体途径，减轻自噬有关。
- 曹宁魏兴陈培敏王琛殷明刘霞覃琴曹建方谢红
- 关键词：缺血预处理脊髓再灌注损伤自噬
