天津市卫生局科技基金(09KZ112)
- 作品数：5 被引量：24H指数：3
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- 脑胶质瘤PI3K信号通路的研究进展被引量：3
- 2010年
- 脑胶质瘤是最常见的颅内原发性肿瘤,因多数呈浸润性生长,治疗效果不佳,寻找有效的治疗手段势在必行。目前研究表明,胶质瘤的恶性进展涉及信号转导通路的异常,这为开辟新的治疗手段提供了新思路。现已初步证实,磷酸磷脂酰肌醇-3-羟基激酶信号转导通路异常与胶质瘤的发生、发展关系最为密切,故本文着重对该通路的相关内容作简要介绍。
- 韩磊浦佩玉康春生
- 关键词：胶质瘤信号转导通路
- RNA干扰敲低Dicer对胶质瘤细胞恶性表型的影响被引量：4
- 2011年
- 目的 观察应用RNA干扰（RNAi）技术敲低Dicer酶后,在体外对U251人胶质瘤细胞生物学特征的影响.方法 构建针对Dicer基因的小分子干扰RNA重组腺病毒表达载体（rAd-Dicer）转染至U251细胞.应用RT-PCR检测Dicer mRNA水平的变化,应用免疫荧光和Western blot方法检测Dicer基因在蛋白水平的变化,并对肿瘤细胞中相关功能蛋白的表达进行分析比较.应用MTT法、流式细胞术和Transwell方法评价肿瘤细胞转染前后生物学行为的变化.结果 rAd-Dicer可显著抑制U251细胞Dicer基因的表达;与正常对照组（control）和阴性对照组（rAd-HK）比较,Western blot分析结果显示p-AKT,MMP2/9,PCNA,Cyclin a,VEGF,CD34功能蛋白在rAd-Dicer转染组细胞中表达明显上调;细胞周期结果表明rAd-Dicer转染组进入S期的细胞数增加了 14.1%～15.3%,MTT和Transwell实验结果显示rAd-Dicer转染组细胞增殖速率和体外侵袭能力显著增强.结论 敲低Dicer酶表达后,U251细胞表型具有更为恶性转化的倾向,由此初步推测全面抑制细胞microRNAs表达有可能促进肿瘤生成.
- 韩磊张安玲岳晓许鹏杨旸王广秀贾志凡浦佩玉康春生
- 关键词：神经胶质瘤DICERRNA干扰生物学表型
- microRNA-451对人脑胶质瘤细胞株A172增殖和凋亡的影响被引量：12
- 2010年
- 目的 观察microRNA-451（miR-451）对胶质瘤细胞株A172增殖和凋亡的影响.方法 合成寡核苷酸miR-451拟似物（miR-451 mimics）转染A172细胞,实时聚合酶链反应（Real-time PCR）检测转染后miR-451的表达,Western blot法检测蛋白表达,应用流式细胞术、噻唑蓝（MTT）比色法和Annexin Ⅴ法评价miR-451对A172细胞生长、增殖和凋亡的影响.结果 与对照组比较,miR-451 mimics转染组细胞miR-451表达升高＞6倍 Western blot法显示癌基因AKT1表达下降到（43.81±5.20）%、Cyclin D1（56.09±3.40）%和bcl-2（63.49±3.70）%,抑癌基因p27表达升高到（145.51±6.70）% 细胞周期G0/G1期细胞增多达17.4%,出现G0/G1期阻滞 MTT法分析显示细胞生长受抑＞35% Annexin Ⅴ法检测显示细胞凋亡明显升高＞15%.结论 miR-451可抑制人脑胶质瘤细胞生长和增殖,诱导细胞凋亡,具有抑瘤作用.
- 南阳钟跃康春生韩磊张安玲浦佩玉
- 关键词：胶质瘤增殖
- RNA干扰技术联合抑制AKT1和COX-2表达对U251胶质瘤细胞增殖的影响
- 2010年
- 目的 探讨应用RNA干扰（RNAi）技术抑制U251恶性胶质瘤细胞株AKT1和COX-2表达后,在体外对U251细胞增殖的抑制作用.方法 构建靶向AKT1和COX-2的RNAi重组腺病毒表达载体（rAd-A＋C）转染至U251细胞.应用Realtime PCR检测AKT1和COX-2 mRNA水平的变化;应用Western blot检测AKT1和COX-2蛋白水平的变化,并对肿瘤细胞中相关功能蛋白的表达进行分析;应用MTr法和流式细胞术评价肿瘤细胞的增殖活性.结果 rAd-A＋C可显著抑制U251细胞AKT1和COX-2的表达;与对照组和无义序列处理组（rAd-HK）比较,Western blot分析结果显示下游相关因子PCNA、Cyclin D1表达下降,而p53表达上调;细胞周期分析结果表明rAd-A＋C处理组进入S期的细胞数较对照组减少了7.0%～7.8%,出现G0/G1期阻滞;MTT法分析显示rAd-A＋C处理组细胞生长抑制率＞58%.结论 靶向AKT1和COX-2的RNAi技术可显著抑制U251细胞AKT1和COX-2表达,在体外对U251细胞增殖活性产生明显抑制作用.因此,RNAi重组腺病毒表达载体介导的基因治疗可成为胶质瘤靶向治疗的新策略.
- 韩磊张安玲岳晓杨旸王广秀贾志凡浦佩玉康春生
- 关键词：神经胶质瘤AKT1RNA干扰增殖活性
- miR-451对胶质瘤细胞株A172生物学特征的影响被引量：6
- 2010年
- 目的 研究miR-451对胶质瘤细胞株A172生物学特征的影响.方法 合成寡核苷酸miR-451拟似物（miR-451 mimics）转染胶质瘤细胞以上调miR-451的表达,real-time PCR检测转染后miR-451的表达,Western印迹法检测目标蛋白表达,应用流式细胞术、MTT法评价细胞生长和增殖的生物学特征变化.结果 转染miR-451 mimics后,real-time PCR检测提示miR-451表达升高,Western blot结果显示癌基因C-myc表达下降＞63.6%,细胞周期正向调节因子CDK2、CDK4、Cyclin D1和Cyclin E表达下降;细胞周期分析表明miR-451 mimics组进入G0/G1期的细胞数较对照组增多达17.4%,出现G0/G1期阻滞;MTT法分析显示miR-451 mimics组细胞生长受抑.结论 miR-451可以抑制人脑胶质瘤细胞生长和增殖能力,具有抑瘤作用.
- 南阳韩磊张安玲浦佩玉钟跃康春生
- 关键词：神经胶质瘤细胞增殖细胞周期
