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国家自然科学基金(30970410)

作品数:6 被引量:43H指数:4
相关作者:张建珍马恩波刘晓健李大琪张建琴更多>>
相关机构:山西大学山西省农业科学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金国家公益性行业科研专项山西省回国留学人员科研经费资助项目更多>>
相关领域:农业科学生物学理学更多>>

文献类型

  • 6篇中文期刊文章

领域

  • 4篇农业科学
  • 2篇生物学
  • 1篇理学

主题

  • 4篇飞蝗
  • 3篇稻蝗
  • 2篇东亚飞蝗
  • 2篇中华稻蝗
  • 2篇基因
  • 2篇几丁质
  • 2篇RNA干扰
  • 1篇稻蝗属
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光定量
  • 1篇原核表达
  • 1篇生物学
  • 1篇生物学功能
  • 1篇实时荧光
  • 1篇实时荧光定量
  • 1篇实时荧光定量...
  • 1篇特异
  • 1篇特异性
  • 1篇葡萄糖胺
  • 1篇磷酸

机构

  • 5篇山西大学
  • 1篇山西省农业科...

作者

  • 5篇马恩波
  • 5篇张建珍
  • 4篇刘晓健
  • 3篇李大琪
  • 2篇张建琴
  • 2篇张欢欢
  • 1篇崔淼
  • 1篇张学尧
  • 1篇孙毅
  • 1篇王亦学
  • 1篇李涛
  • 1篇郝耀山
  • 1篇杜建中
  • 1篇郭亚平
  • 1篇杨美玲

传媒

  • 3篇中国农业科学
  • 2篇昆虫学报
  • 1篇Agricu...

年份

  • 2篇2012
  • 2篇2011
  • 2篇2010
6 条 记 录,以下是 1-6
排序方式:
A Photosensitivity Insecticide, 5-Aminolevulinic Acid, Exerts EffectiveToxicity to Oxya chinensis (Orthoptera: Acridoidea)被引量:1
2011年
5-Aminolevulinic acid (ALA), a major photosensitivity insecticide, has attracted increasing attention as a new type of highly efficient, environmental friendly pesticide to be used to control the pest. To examine whether or not ALA acts effectively to grasshopper, Oxya chinensis and elucidate the detoxification mechanism of ALA, the susceptibility to ALA was assessed in O. chinensis and two major metabolic detoxification enzymes including glutathione S-transferases (GSTs) and general esterases (ESTs)-specific activities were compared in different development stages and different body sections of O. chinensis treated by ALA and the control. The results showed that the ALA exhibited obvious toxicity to the grasshopper in different development stages. In the low-dose treatment (0.0597 mmol L-1), the mortalities of O. chinensis reached a significant level (55.5% in the 1st instar nymphs, 61.4% in the 2nd instar nymphs, 71.4% in the 3rd instar nymphs, and 64.4% in the 4th instar nymphs. But, there was no dose-dependent toxic effect. Thereby, we proposed that ALA has the potential for acting as photosensitivity insecticide for controlling O. chinensis. GSTs activity assays using CDNB and DCNB as substrates indicated that the thorax and abdomen of the different instar nymphs treated by ALA showed 1.52-5.56 fold significantly increased GSTs activities compared with the control. However, for the ESTs-specific activity assay, there was no significant difference between O. chinensis treated by ALA and the control within different instar nymphs, when a-NA, a-NB and b-NA were used as substrates. Therefore, GSTs-mediated metabolic detoxification as evidenced by significantly increased GSTs activities might contribute to protect against oxidative damage and oxidative stress by ALA in O. chinensis.
YANG Mei-lingYIN KunGUO Ya-pingMA En-boZHANG Jian-zhen
关键词:中华稻蝗GSTS
稻蝗属特异性SCAR分子标记的鉴定被引量:2
2010年
【目的】研究稻蝗属特异性DNA分子标记,为稻蝗属物种的分类鉴定提供快速有效的分子检测方法。【方法】基于稻蝗属物种及其近缘属种的大量RAPD-PCR结果,筛选出稻蝗属物种特异性的RAPD条带,对该特异RAPD条带进行克隆、测序。基于所测序列设计特异引物,以稻蝗属不同物种和蝗总科其它物种基因组DNA为模板进行PCR扩增。【结果】随机引物S823可在稻蝗属不同物种扩增出约650bp的RAPD条带,经对该条带的克隆、测序,发现在3个受试的稻蝗属物种中序列同源度达92.3%—96.6%,序列G+C含量大于15%,并富含大量的A、T重复区;基于已知序列设计的特异引物对稻蝗属7个物种可以扩增出目的条带(550bp),而对赤胫伪稻蝗及蝗总科其它物种均无扩增条带。【结论】鉴定了稻蝗属特异的RAPD条带,基于该条带序列设计的特异引物可用于稻蝗属物种的快速分子鉴定。
张建珍李大琪李涛马恩波郭亚平
关键词:稻蝗属RAPD-PCRSCAR分子标记
飞蝗葡萄糖胺-6-磷酸-N-乙酰转移酶的特性及生物学功能被引量:5
2012年
【目的】研究飞蝗葡萄糖胺-6-磷酸-N-乙酰转移酶(glucosamine-6-phosphate-N-acetyltransferase,GNA)的特性及生物学功能,为探讨飞蝗表皮几丁质的合成机制及研发新型绿色环保杀虫剂提供实验依据。【方法】采用生物信息学方法,在飞蝗EST数据库中搜索GNA的cDNA序列,并与其它物种GNA序列进行同源比较;设计飞蝗GNA特异性表达引物,分析5龄第2天不同组织样品间的表达差异及5龄第1天至第7天表皮中GNA表达量的变化;构建pET-28a(+)蛋白表达载体,在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)菌株中表达GNA重组蛋白,Ni柱亲和纯化重组蛋白并分析重组蛋白的酶学活性;通过RNA干扰研究GNA的生物学功能。【结果】飞蝗GNA与其它物种GNA的氨基酸序列一致性很高,结合底物GlcN6P的氨基酸残基完全一致,说明不同物种间GNA非常保守;飞蝗GNA组织特异性分析显示其在表皮、脂肪体及肌肉中表达量较高;飞蝗5龄表皮的发育变化表明,GNA在刚蜕皮后的表达量最高,之后逐步降低;飞蝗GNA重组蛋白在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)菌株中成功表达,经过Ni-NTA柱纯化得到单一目的条带,酶学特性研究表明飞蝗GNA重组蛋白的最适反应温度为37—50℃,最适pH为8.0—9.5;测定了飞蝗重组GNA的Km值,当D-GlcN6P的浓度为200μmol.L-1时,Acetyl-CoA的Km=133.60μmol.L-1;当Acetyl-CoA的浓度为200μmol.L-1时,D-GlcN6P的Km=42.43μmol.L-1;飞蝗GNA的RNA干扰结果显示,GNA的表达能够被有效沉默,但蜕皮及发育未受影响。【结论】飞蝗GNA与其它物种的GNA氨基酸序列一致性很高;用该序列原核表达的重组蛋白具有葡萄糖胺-6-磷酸-N-乙酰转移酶的活性;飞蝗GNA被干扰后未观察到对飞蝗蜕皮及发育产生影响,推测存在N-乙酰葡萄糖胺激酶(GlcNAc kinase)补救途径催化产生GNA的底物N-乙酰葡萄糖胺-6-磷酸(GlcNAc6P),用于几丁质的合成。
张欢欢张学尧刘晓健马恩波张建珍
关键词:飞蝗原核表达RNA干扰
氟虫脲对东亚飞蝗和中华稻蝗几丁质合成酶基因表达的影响被引量:7
2010年
为了探讨氟虫脲可能的作用靶标及毒性机制,本研究以重要农业害虫东亚飞蝗Locusta migratoria manilensis(Meyen)和中华稻蝗Oxya chinensis(Thunberg)为材料,采用简并引物扩增中华稻蝗几丁质合成酶1基因(OcCHS1)的部分cDNA序列;以氟虫脲浸渍法处理2龄中期中华稻蝗及1,2和3龄东亚飞蝗若虫为处理组,丙酮处理为对照组,使用RT-PCR和实时荧光定量PCR方法分析氟虫脲对蝗虫几丁质合成酶基因mRNA表达的影响。结果获得的OcCHS1部分cDNA序列,其长度为312bp,编码104个氨基酸,GenBank登录号为HM214491,与东亚飞蝗几丁质合成酶1基因(LmCHS1)在氨基酸水平上相似度达95%。RT-PCR结果显示,处理组几丁质合成酶1扩增带均强于对照组。实时荧光定量PCR结果表明:与对照组相比,处理组中华稻蝗2龄中期若虫OcCHS1mRNA表达提高了1.02倍,东亚飞蝗1,2,3龄若虫LmCHS1mRNA表达分别提高了34%,82%和89%,差异显著(P<0.05)。分析基因表达提高的原因是几丁质合成受阻后基因表达水平的一种代偿性增加,由此推测几丁质合成酶可能是氟虫脲作用的靶标之一。
刘晓健杨美玲张建琴马恩波张建珍
关键词:东亚飞蝗中华稻蝗几丁质合成酶氟虫脲基因表达
东亚飞蝗几丁质酶家族基因的表达特性与功能研究被引量:23
2011年
【目的】研究东亚飞蝗几丁质酶家族基因的时空表达特性及其在蜕皮发育中的生物学功能,筛选在飞蝗发育过程中致死性的几丁质酶基因,为实现基于RNAi的飞蝗有效控制提供重要的基础数据。【方法】在东亚飞蝗EST数据库搜索几丁质酶基因片段,用生物信息学方法分析所获得的基因片段序列;以飞蝗不同龄期第4天若虫和5龄东亚飞蝗不同组织部位为材料提取RNA并反转录为cDNA,应用RT-PCR方法研究时空表达特性;选取在表皮高表达的几丁质酶基因LmCht6,采用RNA干扰方法研究其生物学功能。【结果】基于东亚飞蝗EST库搜索和进一步的序列分析,共获得7条几丁质酶基因片段;不同组织部位与不同龄期RT-PCR结果表明这7条几丁质酶基因的时空表达特性存在明显差异,其中LmCht6主要在表皮表达;LmCht6的RNA干扰试验表明:2龄飞蝗注射dsLmCht6后,其几丁质酶基因LmCht6表达量明显降低;飞蝗从2龄到3龄的龄期转化过程中,表现为发育延迟,新表皮与旧表皮无法完全分离,导致死亡率达到72.2%。【结论】东亚飞蝗拥有多个几丁质酶基因,它们的时空表达特性存在差异;LmCht6在飞蝗蜕皮过程中具有十分重要的生物学功能,该基因被沉默后飞蝗无法完成蜕皮而导致死亡。
李大琪杜建中张建琴郝耀山刘晓健王亦学马恩波张建珍孙毅
关键词:东亚飞蝗几丁质酶基因RT-PCRRNA干扰
飞蝗可溶型海藻糖酶基因的序列分析及mRNA表达特性被引量:12
2012年
海藻糖酶是海藻糖代谢过程中的一个关键酶,在昆虫发育和能量调节中具有重要作用,为进一步探讨海藻糖酶基因的功能,本文分析了飞蝗Locusta migratoria一可溶型海藻糖酶基因的氨基酸序列并对其mRNA表达特性进行了研究。结果表明:该海藻糖酶(TRE,GenBank登录号:FJ795020)不含有跨膜结构。系统进化树分析结果显示,该酶与大豆蚜Aphis glycines、豌豆蚜Acyrthosiphon pisum、褐飞虱Nilaparvata lugens和灰飞虱Laodelphax striatella可溶型海藻糖酶具有较近的亲缘关系,因此我们将该酶的基因命名为LmTre-1。对该基因在不同组织和发育时期表达量的荧光定量PCR分析表明:LmTre-1在卵发育前期、中期的表达量都很低,卵发育后期表达量显著提高;LmTre-1在5龄若虫和成虫被检测的组织部位中均有表达,在体壁中的表达量最高,其次是在脂肪体、肌肉、气管、精巢及卵巢中;5龄飞蝗刚蜕皮后LmTre-1在体壁中的表达量较高,随着生长发育其表达量逐渐降低;LmTre-1在成虫发育期体壁中稳定高表达。LmTre-1的mRNA表达特性与几丁质合成酶1基因非常相似,据此推测该基因可能与体壁几丁质的合成相关。本研究为深入探讨该基因的生理功能提供了重要的基础数据,并为以海藻糖酶为杀虫靶标的农药筛选奠定实验基础。
刘晓健张欢欢李大琪崔淼马恩波张建珍
关键词:飞蝗海藻糖酶实时荧光定量PCRMRNA表达
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