国家自然科学基金(30570711)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 小鼠胚胎干细胞分化心肌细胞血管紧张素Ⅱ 1型和2型受体的表达特征被引量：1
- 2010年
- 胚胎干细胞(ESC)具有无限增殖和分化为体内3个胚层来源的各种类型组织细胞的潜能,经过体外诱导能够分化为心肌细胞,亦称为胚胎干细胞分化心肌细胞(ESCM).本研究探讨了ESC诱导分化心肌细胞过程中血管紧张素Ⅱ受体(ATR)的亚型AT1R和AT2R的表达特征.10-4mol/L维生素C体外诱导小鼠R1胚胎干细胞分化为自发搏动的心肌细胞,用免疫荧光法检测分化后的细胞表达心肌细胞特异性标志物α辅肌动蛋白.小鼠胚胎干细胞在诱导分化为心肌细胞以后,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时定量RT-PCR(Real-timeRT-PCR)方法检测到ESCM表达AT1R,并且呈时间依赖性逐渐增加的特点,在第14d达到高峰.Western印记法检测AT1R表达特征与RT-PCR结果相符.Western印记法的结果显示,血管紧张素Ⅱ(10-6mol/L)可作为AT1R激动剂激活AT1R,并使其下游的细胞外信号调节激酶(ERK1/2)磷酸化水平上调,预孵育AT1R抑制剂Losartan(10-6mol/L),此作用被抑制.RT-PCR方法显示,与新生小鼠心室肌细胞相比,ESCM的AT2R表达水平较低.
- 崔京京杨洪涛贾竹青阎丽辉张晨光杨黄恬周春燕张永珍
- 关键词：胚胎干细胞心肌细胞细胞外信号调节激酶
- 血管紧张素Ⅱ对胚胎干细胞向心肌细胞分化的作用
- 2013年
- 为检测血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AⅡ)对小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)向心肌细胞方向分化的作用,采用10-4mol/L维生素C诱导小鼠R1胚胎干细胞分化为心肌细胞.Western印记检测胚胎干细胞诱导分化的心肌细胞中表达血管紧张素Ⅱ1型受体(angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R).诱导分化期间用1μmol/L AⅡ刺激胚胎干细胞,计数搏动拟胚体的比例;诱导分化第14 d用real-time RT-PCR和Western印记检测心肌标志物的表达确定其作用.结果显示,与对照组相比,1μmol/L AⅡ处理组可显著增加搏动拟胚体的比例,上调心肌标志物mRNA的表达.预先用1μmol/L洛沙坦处理1 h后可显著阻碍这种上调作用.本实验结果表明,AⅡ通过AT1R可促进小鼠R1胚胎干细胞向心肌细胞分化.
- 吴丽媛闫丽辉贾竹青王家骥周春燕张永珍
- 关键词：胚胎干细胞心肌细胞
- 小鼠胚胎干细胞分化心肌细胞毒蕈碱受体的表达特征被引量：1
- 2008年
- 为了探讨胚胎干细胞分化心肌细胞(ESCM)毒蕈碱受体的表达规律及β肾上腺素能系统对M2受体表达的影响,采用10-4mol/L维生素C体外诱导小鼠M13胚胎干细胞分化为心肌细胞,用RT-PCR检测到分化后的细胞表达心肌细胞特异性基因Nkx2.5和β肌球蛋白重链;用免疫荧光法检测到分化后的细胞表达心肌细胞特异性标志物α辅肌动蛋白.小鼠胚胎干细胞分化前表达M1和M2毒蕈碱受体,在分化过程中,M1受体表达逐渐下降,M2受体表达在第3d显著下降,此后表达逐渐增加,在第14d达到高峰;Western印迹结果显示,异丙肾上腺素明显抑制M2受体的表达,选择性β1肾上腺素受体拮抗剂CGP20712A明显上调其表达,而选择性β2肾上腺素受体拮抗剂ICI118551对其表达无影响.本实验表明,小鼠胚胎干细胞分化心肌细胞表达毒蕈碱受体,β肾上腺素能系统对M2受体表达有调控作用.
- 杨洪涛刘志强陈苹马康涛周春燕张永珍
- 关键词：胚胎干细胞心肌细胞毒蕈碱受体
