云南省应用基础研究基金(2007C134M) 作品数:2 被引量:13 H指数:2 相关作者: 向莉 段勇 郑亚婷 李娅 刘华 更多>> 相关机构: 昆明医学院第一附属医院 更多>> 发文基金: 云南省应用基础研究基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
铜绿假单胞菌外膜蛋白OprM原核表达及抗体制备 被引量:2 2011年 目的制备铜绿假单胞菌(PA)主动外排系统外膜蛋白OprM及抗OprM多克隆抗体,为深入研究主动外排系统奠定基础。方法从PA基因组中克隆oprM基因,构建pET28 a-c-OprM表达载体,在大肠埃希菌中经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并用免疫转印试验(W estern b lot)验证,建立重组OprM纯化方案,免疫动物制备多克隆抗体。结果扩增出带有EcoRⅠ和NotⅠ酶切位点及保护碱基的oprM基因序列,构建了pET28 a-c-OprM表达载体,诱导表达的重组OprM蛋白为带有H is标签的不可溶包涵体,建立并优化了重组OprM的纯化方法,免疫小鼠获得抗OprM蛋白的多克隆抗体。结论成功制备了OprM蛋白和抗OprM多克隆抗体,为深入研究该蛋白及相关的主动外排系统提供了有效手段。 向莉 郑亚婷 刘华 李娅 王玉明 段勇关键词:铜绿假单胞菌 铜绿假单胞菌主动外排系统MexAB-OprM的研究进展 被引量:11 2009年 医院感染在感染性疾病中占有相当比例。院内感染的病原菌中,铜绿假单胞菌的感染高居榜首,且耐药状况十分严重。主动外排系统是细菌存在耐药性并发生获得性多重耐药的主要原因。M exAB-OprM型外排系统因具有广谱的外排活性成为铜绿假单胞菌最具临床意义的药物外排系统。本文对细菌主动外排系统的分类,PA M exAB-OprM外排系统的组成、结构、重要作用及表达调控予以综述,并对其治疗研究作出展望。 向莉 段勇关键词:铜绿假单胞菌 主动外排系统 MEXAB-OPRM