南方医科大学检验与生物技术学院
- 作品数：189 被引量：554H指数：11
- 相关作者：徐伟文惠宏襄王小平李纪良陈慧芹更多>>
- 相关机构：中山大学中山医学院华南农业大学兽医学院韶关学院医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学农业科学更多>>
- 神经前体细胞表达发育调控样蛋白4基因多态性与广州市居民原发性高血压及其危险因素关联研究被引量：5
- 2017年
- 目的分析神经前体细胞表达发育调控样蛋白4(neural precursor cell expressed developmentally down-regulated 4-like,NEDD4L)基因多态性与广州市居民原发性高血压(essential hypertension,EH)发病风险及其危险因素的相关性。方法选取广州市919名EH患者及同期年龄、性别相匹配的934名血压正常居民为研究对象,对其进行人口学资料收集、体格测量及血液生化指标检测,通过MassARRAY~ IPLEX SNP平台对NEDD4L基因rs2288774和rs3865418两个位点进行基因分型,并进行统计学分析。结果超重、肥胖、中心性肥胖、高甘油三酯、高血糖为广州市居民EH的危险因素;病例-对照分析发现,rs3865418位点基因型TT及等位基因T可降低EH发病风险;rs2288774位点基因型TC为EH患者血糖升高的保护因素,而rs3865418位点CT基因型为EH患者超重的危险因素。结论 NEDD4L基因多态性与广州市居民EH发病风险及EH危险因素相关。
- 孙敏英利耀辉刘览吴雪霁潘冰莹周颖刘华章
- 关键词：原发性高血压多态性
- CBL通过泛素化降解NCK2抑制乳腺癌细胞的增殖和侵袭
- 2022年
- 目的阐明Casitas B系淋巴瘤(CBL)蛋白对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响并探讨其作用机制。方法乳腺癌细胞系MDA-MB-231、MCF7常规培养,实验分为NC组、过表达CBL组和siNC组、siCBL组,采用克隆形成法和细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、伤口愈合实验、Transwell实验检测过表达(沉默)CBL对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响;流式细胞术和Western blot验证CBL对乳腺癌细胞周期进程、细胞周期标志物和上皮-间充质转化(EMT)的影响;罗丹明标记的鬼笔环肽染色细胞骨架观察CBL对细胞丝状伪足数量的影响。采用IP-质谱法筛选CBL的相互作用蛋白并确定NCK2为研究对象。实验分为CBL组、NCK2组、CBL+NCK2组,通过免疫共沉淀(IP)和免疫荧光共定位实验验证CBL与NCK2蛋白互作情况。通过环己酰亚胺追踪实验和泛素化实验检测CBL对NCK2蛋白稳定性和泛素化的影响。采用CCK-8和Transwell实验检测NCK2对CBL介导的乳腺癌细胞增殖及迁移能力的影响。结果过表达CBL组的细胞增殖、迁移、侵袭能力显著降低(P<0.05);沉默CBL组的细胞增殖、迁移、侵袭能力显著增加(P<0.01)。沉默CBL促进MCF7细胞周期G1/S转换(P<0.05)。过表达CBL下调乳腺癌细胞周期相关蛋白CDK2/4(P<0.01)、Cyclin A2/B1/D1/D3/E2(P<0.05)、EMT相关蛋白Snail、N-Cadherin、Claudin-1(P<0.05),同时上调E-Cadherin(P<0.05);沉默CBL上调乳腺癌细胞周期相关蛋白CDK2/4/6(P<0.05)、Cyclin A2/B1/D1/D3/E2(P<0.05),EMT相关蛋白Snail、Vimentin、Claudin-1(P<0.05),同时下调E-Cadherin(P<0.05)。过表达CBL使乳腺癌细胞系MDA-MB-231中丝状伪足数量减少;沉默CBL使乳腺癌细胞系MCF7中丝状伪足数量增加。NCK2与CBL相互作用。过表达CBL抑制NCK2蛋白稳定性(P<0.05),并促进其泛素降解(P<0.01)。过表达NCK2能够逆转CBL介导的乳腺癌细胞增殖和迁移的抑制作用(P<0.01)。结论CBL可通过泛素化降解NCK2抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵
- 宋筱羽肖斌陆景润张文武李锦潮竹昕孙朝晖李林海
- 关键词：CBLE3连接酶泛素化细胞侵袭
- 布鲁菌外膜蛋白16对成骨细胞的毒力作用被引量：1
- 2021年
- 目的观察布鲁菌外膜蛋白(OMP)16脂化型(L16)和非脂化型(U16)对成骨细胞的毒力效应。方法利用大肠埃希菌BL21(DE3)原核表达系统制备L16和U16重组蛋白,并使用镍柱纯化。采用成组设计,利用小鼠成骨细胞系(MC3T3细胞)分别与L16和U16重组蛋白共孵育(L16、U16刺激组),以布鲁菌脂多糖(LPS)刺激物为阳性对照(LPS对照组),未加任何刺激的细胞作为阴性对照,孵育时间为24 h。CCK-8法检测MC3T3细胞的活力;离心收集培养细胞上清,生物发光法测定上清中乳酸脱氢酶(LDH)的释放率,评价L16和U16对MC3T3细胞的毒力作用;进一步使用AnnexinⅤ-PE/7-AAD双染流式细胞术检测MC3T3细胞的凋亡率,以及通过免疫印迹法(WB)检测凋亡执行蛋白Caspase-3的活化水平。结果L16刺激组细胞活力[(56.16±1.63)%]显著低于U16刺激组和LPS对照组[(97.02±1.44)%、(98.64±0.90)%,P均<0.01],LDH释放率[(84.64±0.96)%]显著高于U16刺激组和LPS对照组[(34.82±3.41)%、(26.75±1.95)%,P均<0.01]。AnnexinⅤ-PE/7-AAD染色结果显示,L16刺激组细胞凋亡率为(46.45±2.19)%,而其余组均<1%。WB结果显示,L16刺激组细胞内存在活化的Caspase-3,而U16刺激组和LPS对照组未检测到此活化片段。结论L16能诱导成骨细胞的凋亡,使成骨细胞的增殖受到抑制,而U16的作用不明显,具备完整脂化结构的布鲁菌L16是毒力效应所必需的。
- 任慧杨恒胡飞环易嘉敏黎诚耀王文敬
- 关键词：外膜蛋白成骨细胞系细胞活力乳酸脱氢酶
- 节律基因与肿瘤相关性研究进展被引量：3
- 2019年
- 昼夜节律是机体长期适应外界环境变化所产生的内在机制,许多生命活动例如细胞增殖、细胞代谢、激素分泌等均与昼夜节律相关。机体通过节律基因调节生命活动,使其保持有序性和协同性。近年来,节律基因研究不断深入,发现其异常表达与肿瘤进程有着密切联系。该文将主要从节律基因的调控通路,节律基因在肿瘤中的表达,节律基因与细胞周期、细胞代谢、癌基因的关联,以及节律基因在肿瘤治疗中的应用现状这六个方面揭示节律基因与肿瘤发展与治疗的关联,并从肿瘤休眠的视角进行展望,为肿瘤与昼夜节律的相关研究提供思路。
- 应佳栩丘文林慧娴王萍简焕璋贾敏李金龙
- 关键词：节律基因肿瘤细胞周期细胞代谢癌基因
- 乙醇喂养小鼠诱导肝损伤模型的制作
- 2022年
- 目的:通过慢性酒精喂养加急性酒精灌胃来制作肝损伤的小鼠模型。方法:将雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组和模型组。前十天每天给予对照组不含酒精液体饲料喂养,给予模型组酒精液体饲料喂养,第十一天给对照组灌胃麦芽糊精溶液(20 μL/Kg),模型组灌胃酒精(20 μL/Kg)。实验结束后检测血清肝功能指标、脂质代谢相关指标,并观察肝脏组织病理变化。结果:与对照组小鼠比较,模型组小鼠血清中胆固醇(P 0.05, n = 14~15)在实验组中均高于对照组,且胆固醇(P < 0.01, n = 14~15)在两组间有显著差异。苏木精–伊红结果显示,与对照组相比,造模组的肝组织破坏程度较重。结论:模型组小鼠出现了肝细胞损伤,脂肪累积,运用慢性喂养加上急性灌胃的方法成功模拟酒精肝损伤,这对于之后的临床治疗和新机制的研究具有实践意义。
- 黄世豪林丽珍李永龙夏加伟赵文淘韩留鑫李迎春李迎春何丹华丛金格沈含章贾俊双贾俊双林晓琳肖东
- 关键词：酒精性肝损伤小鼠模型
- CRISPR/Cas9系统在人类疾病中的研究应用进展被引量：6
- 2018年
- 规律成簇的短回文重复序列(clustered regularly intespaced short palindromic repeats,CRISPR)/(CRISPR associated 9,Cas9)基因编辑技术是由细菌中的获得性免疫系统发展而来的,作为目前最有效最受欢迎的基因编辑工具,Cas9蛋白可在向导RNA的引导下对DNA进行定点切割,与转录激活因子效应物核酸酶(transcription activator-like effector nucleases,TALEN)和锌指核酸酶(Zinc finger nuclease,ZFN)相比效率更高且成本更低。CRISPR/Cas9编辑系统应用于人类疾病研究,有望解决生命科学研究领域多种复杂的分子生物学难题,例如癌症。本文主要从人类疾病的基因治疗出发,重点介绍了该技术在各系统中疾病模型的建立以及在遗传疾病的治疗、病毒感染性疾病治疗、癌症研究等方面的应用,并讨论了这种先进分子技术的未来前景和尚存在的不足。
- 张庆颜董小玉臧乃亮徐伟文
- 关键词：人类疾病
- 不同HBV感染自然史状态及肝硬化患者抗-HBc水平及其临床意义被引量：5
- 2017年
- 目的研究慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染不同自然史状态及肝硬化患者血清乙型肝炎病毒核心抗体(抗-HBc)水平及其用于自然史状态区别诊断的临床价值。方法纳入2015年3月至2016年6月就诊的慢性HBV感染患者160例,根据自然史状态分为免疫耐受组(n=43)、乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)阳性慢性乙型肝炎(CHB)组(n=37)、非活动携带组(n=39)及HBeAg阴性CHB组(n=41),同时纳入HBeAg阳性(n=44)及阴性肝硬化患者(n=46)。收集患者一般情况,检测血清乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)、HBeAg、抗-HBc、HBV DNA载量及HBV基因型。分析抗-HBc与临床指标的相关性及其用于自然史状态区别诊断的价值。结果不同自然史状态抗-HBc由高至低为:HBeAg阳性CHB组(4.22±0.68)log_(10)IU/mL、HBeAg阴性CHB组(3.89±0.88)log_(10)IU/mL、非活动携带组(3.07±0.68)log_(10)IU/mL及免疫耐受组(2.88±0.82)log_(10)IU/mL。HBeAg阳性及阴性肝硬化患者抗-HBc分别为(3.04±0.82)、(3.15±0.86)log_(10)IU/mL。HBeAg阳性CHB组抗-HBc与ALT(r=0.353,P=0.032)及AST(r=0.421,P=0.009)呈正相关;HBeAg阴性CHB组抗-HBc与HBV DNA(r=0.343,P=0.028)、ALT(r=0.458,P=0.003)及AST(r=0.495,P=0.001)呈正相关。抗-HBc区别诊断免疫耐受状态及HBeAg阳性CHB的AUC为0.903,区别非活动携带状态及HBeAg阴性CHB的AUC为0.833。结论不同慢性HBV感染自然史状态下血清抗-HBc水平存在明显差异,且抗-HBc可用于慢性HBV感染自然史状态的区别诊断,诊断价值高于HBsAg水平。
- 曹鸿挺姚尚彦罗海波刘运周李建业吴英松
- 关键词：乙型肝炎核心抗体
- 染色体非整倍体无创产前检测技术质控要点及临床应用进展被引量：3
- 2017年
- 基于下一代测序(next generation sequencing,NGS)技术的染色体非整倍体无创产前检测技术是产前诊断领域的重要突破,其检测原理简单、技术灵敏度和准确性很高,已成为目前非整倍体产前筛查发展及推广的主要方向。但由于NGS技术检测流程复杂,影响因素较多,需要在样本采集、运输、核酸提取、文库构建、上机测序、数据分析各个关键节点进行质控。同时,由于其试剂成分复杂、技术难度大、社会关注度高,也需对注册产品指标进行明确。鉴于此,本文对染色体非整倍体无创产前检测技术质控要点、产品规范要求及临床应用状况进行简要评述。
- 曲守方于婷孙楠李丽莉陈芳吴英松黄杰
- 关键词：下一代测序
- 基于三引物荧光PCR-毛细管电泳法的FMR1基因突变检测技术建立及其在自闭症辅助诊断中的应用被引量：1
- 2017年
- 目的对自闭症患者FMR1基因5′非编码区CGG重复序列及重复数进行检测,探索检测脆性X综合征的新方法。方法应用三引物荧光PCR-毛细管电泳法(Qseq100TM全自动核酸分析系统检测)对111例自闭症患者进行筛查,检测其FMR1基因5′非编码区CGG序列,计算CGG重复数,并与ABI 3500Dx基因分析仪毛细管电泳测序法进行结果比较验证。结果 111例临床检测为自闭症的样本中,有2例为FMR1前突变携带者,一例为中间型。与3500Dx毛细管电泳测序结果一致。结论三引物荧光PCR-毛细管电泳法能够用来检测FMR1基因5′非编码区CGG重复序列,在脆性X综合征发病机制及大规模携带者筛查方面都具有一定的应用价值。
- 孙莉杨琳艳叶倩平杨旭杨学习
- 关键词：自闭症FMR1基因脆性X综合征
- 人血管紧张素Ⅱ2型受体AT2R重组细胞系的构建与鉴定
- 2019年
- 目的:构建人血管紧张素Ⅱ2型受体(hAT2R)过表达稳定细胞系,探讨AT2R激动剂Compound 21等对前列腺癌细胞的作用及机制.方法:构建含hAT2R基因的慢病毒表达载体pLV-CMV-hAT2R-IRES-eGFP并包装成慢病毒.将重组慢病毒载体pLV-CMV-IRES-eGFP-hAT2R感染前列腺癌细胞,并利用流式细胞术筛选出单克隆细胞株,RT-PCR及Western blot方法检测重组细胞系中hAT2R表达水平,使用AT2R激动剂CGP42112检测受体功能.结果:重组慢病毒载体感染PC-3、DU145前列腺癌细胞24 h后均能观察到eGFP表达,用流式细胞术分别筛选出单克隆细胞株,RT-PCR及Western blot检测结果显示目的基因hAT2R在两株重组细胞系中表达显著升高,CGP42112处理24 h后,重组细胞系细胞活力较正常PC-3、DU145细胞显著降低.结论:成功构建hAT2R过表达稳定细胞系.
- 陈惠莹毛莹莹裴娜娜颜仁和万鹏飞李红卫
- 关键词：慢病毒稳定细胞系前列腺癌
