目的:探讨橄榄苦苷抗衰老作用及其机制。方法:采用小鼠皮下注射D-半乳糖复制衰老模型,将30只昆明种小鼠随机分3组:正常组、模型组和橄榄苦苷组,每组10只,分别给予生理盐水、D-半乳糖、橄榄苦苷+D-半乳糖;42 d后测定胸腺、脾脏指数,取血、肝、脑、肾、脾测定丙二醛(MDA)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)以及晚期糖基化终末产物(advanced glycosylation end products,AGEs)的含量。结果:与模型组比较,橄榄苦苷能显著提高衰老模型小鼠胸腺指数(P<0.05)和脾脏指数(P<0.01);显著降低MDA含量(P<0.01)和AGEs水平(P<0.05)并提高T-SOD(P<0.05)、GSH-Px(P<0.05)和CAT活力(P<0.01)。结论:橄榄苦苷可通过增强机体免疫功能、提高抗氧化能力等发挥其延缓衰老的作用。
目的制备豚鼠抗α-毒素血清、纯化抗重组金黄色葡萄球菌α-毒素的IgG并应用十二烷基硫酸钠(SDS)-聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳检测,检测酵母表达α-毒素情况.方法免疫豚鼠,给豚鼠静脉注射重组α-毒素,制备抗α-毒素血清,利用HiTrap protein A HP纯化抗重组金黄色葡萄球菌α-毒素IgG,SDS-PAGE非还原性电泳检测纯化的IgG.酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫荧光共聚焦检测酵母表达α-毒素情况.结果成功获得了豚鼠抗α-毒素血清及所需的抗α-毒素抗体.非还原性电泳观察到未纯化的血清中抗α-毒素抗体浓度较低,穿透峰中抗α-毒素抗体含量较少,洗脱峰中抗α-毒素抗体的纯度约为85%.ELISA法检测发现,转化子1、2号与阴性对照组相比较,基本可以判断转化子经过诱导表面展示了α-毒素;免疫荧光共聚焦检测发现,经过抗α-毒素抗体染色,1号酵母转化子表面发出绿色荧光而未诱导培养基的细胞表面没有荧光.结论金黄色葡萄球菌α-毒素在酵母表面展示成功,可以进一步应用于生物医学临床或学术研究领域,同时可为研发酵母展示疫苗提供可靠的鉴定方法.
