华中科技大学同济医学院基础医学院神经生物学系
- 作品数：42 被引量：169H指数：9
- 相关作者：孟宪芳刘璐胡岳杨志华张静更多>>
- 相关机构：江汉大学医学院湖北中医药大学附属中西医结合医院上海中医药大学研究生院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- Annexin—A1模拟肽Ac2—26抑制小胶质细胞释放炎性介质的作用研究被引量：3
- 2016年
- 目的观察Annexin—A1模拟肽Ac2—26对小胶质细胞炎性介质肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）和一氧化氮（NO）释放的影响及其对Toll样受体2（TLR2）的调控作用。方法根据处理不同将大鼠来源的原代小胶质细胞随机分为Aβ1-42组（给予Aβ1-42刺激组）、Aβ1-42＋对照乱序肽组（在给予Aβ1-42刺激的同时加入氨基酸乱序组处理）、Aβ1-42＋Ac2—26（在给予Aβ1-42刺激的同时加入Ac2—26处理）及空白对照组。经上述处理24h后，收集各组小胶质细胞。用CCK-8法检测细胞存活率，采用倒置相差显微镜观察细胞形态，收集各组细胞上清液采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定TNF-α、IL-1β、IL-6和NO的浓度，采用Western blot法测定TLR2的蛋白水平。结果Aβ1-42和Ac2—26对小胶质细胞存活率没有影响，与空白对照组比较差异无统计学意义。Aβ1-42作用后，小胶质细胞形态发生明显变化，由静息的苎麻状变成激活的阿米巴状巨噬细胞样；Aβ1-42组、Aβ1-42＋对照乱序肽组、Aβ1-42＋Ac2—26及空白对照组上清TNF-α浓度分别为（125．17±7．13）ng／L（118．78±7．28）ng／L、（24．02±2．62）ng／L和（20．89±1．82）ng／L，IL-1β浓度分别为（117．61±8．73）ng／L（108．90±6．53）ng／L、（27．06±3．32）ng／L和（24．58±3．45）ng／L，IL-6浓度分别为（108．67±5．86）ng／L（102．67±4．85）ng／L（25．94±2．83）ng／L和（19．68±2．66）ng／L，Aβ1-42＋Ac2-26组上清液TNF-α、IL-1β和IL-6浓度明显低于Aβ1-42组、Aβ1-42＋对照乱序肽组（P〈0．05），与空白对照组比较差异无统计学意义。Aβ1-42＋Ac2—26组上清液NO浓度为（20．27±2．53）mmol／L，低于Aβ1-42组（75．68±6．14）mmol／L、Aβ1-42＋对照乱序肽组（69．25±4．50）mmol／L，与空白对照组（16．39±2．96）mmol／L比较差异无统计学意义。Western bl
- 罗振钊刘璐马健王静胡绘孔曼王九菊施静卢忠心
- 关键词：小神经胶质细胞TOLL样受体2
- AAV介导的CD151基因促大鼠缺血后肢血管再生和血运重建的实验研究被引量：4
- 2006年
- 目的研究肌肉转染腺相关病毒(AAV)介导的CD151基因在大鼠后肢缺血模型中促血管再生和血运重建的作用。方法分别包装携带有CD151基因和GFP基因的重组腺相关病毒(rAAV-CD151,rAAV-GFP)。将12只Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,每组各6只。实验组大鼠左下肢肌肉注射局部转染rAAV-CD151,对照组注射rAAV-GFP(1×1010pfu/只)。基因转染2周后行股动脉切除术建立大鼠后肢缺血模型。通过后肢皮肤温度测定、后肢血管造影和缺血肌肉组织毛细血管密度检测,观察缺血肢体血管再生和评价血运重建情况。Western blot检测两组大鼠缺血肢体局部CD151的表达。结果股动脉切除术4周(基因转染6周)后,实验组大鼠缺血后肢平均皮肤温度为(32.92±0.63)℃,对照组为(31.22±0.87)℃;后肢血管造影结果显示实验组缺血侧血管评分平均为(2.56±0.37),对照组平均为(1.57±0.39);实验组缺血后肢肌肉组织毛细血管密度为(609.00±83.89)/mm2,对照组为(517.00±70.65)/mm2;两组比较差异均有显著性意义(均P<0.05)。Western blot检测结果显示实验组大鼠缺血侧肌肉组织CD151表达为对照组的2.96倍。结论局部高表达CD151基因能够提高缺血组织的血管再生能力,促进缺血器官的血运重建和功能恢复。CD151将为缺血性疾病的血管再生治疗提供新的靶点。
- 康基顺刘正湘蓝荣芳宋玉娥刘晓春张欣汪道文
- 关键词：重组腺相关病毒后肢缺血血管再生
- 神经元损伤度对小胶质细胞表型的影响被引量：4
- 2015年
- 目的探讨不同的神经元损伤度对小胶质细胞表型的影响。方法将原代培养的神经元进行缺氧处理,不同的时长(0.5、1、2、4h)后,复氧处理24h,收集神经元条件培养液(neuron-conditioned media,NCM),然后将NCM刺激原代培养的小胶质细胞24h(NCM∶小胶质细胞培养液=1∶1,V/V)。采用Western blot法检测小胶质细胞内的M2表型标记物精氨酸酶-1(arginase-1)和激活标记物离子钙结合衔接分子-1(Iba-1)的表达变化规律,采用免疫荧光法检测arginase-1的表达变化规律。同时,采用ELISA法检测小胶质细胞培养液上清中的营养因子,如脑源性神经营养因子(BDNF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和炎性因子,如肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)的分泌变化规律。最后,将不同损伤度的NCM诱导小胶质细胞形成不同表型,将小胶质细胞和缺氧处理2h后的神经元共培养24h,MTT法检测神经元的活力。结果轻微损伤(缺氧0.5、1h)的NCM明显下调M2型标记物arginase-1的表达水平,中度(缺氧2h)和重度(缺氧4h)损伤的NCM能够上调arginase-1的表达,各种损伤度的NCM都能上调Iba-1的表达水平,提示其在一定程度上激活小胶质细胞。同时,轻微损伤的NCM明显上调小胶质细胞TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌,而中度和重度损伤的NCM对这些促炎因子的释放没有影响,各种损伤度的NCM都能明显上调营养因子的分泌。MTT法检测表明,轻微和重度损伤处理的NCM刺激的小胶质细胞进一步加重缺氧处理的神经元损伤,而中度损伤的NCM对缺氧处理后的神经元具有保护作用。结论神经元损伤度是决定小胶质细胞表型的重要因素,进而使小胶质细胞进一步发挥神经毒性或保护作用。
- 罗振钊王静孔曼胡绘卢忠心施静
- 关键词：小胶质细胞细胞因子表型
- P物质对大鼠三叉神经节神经元辣椒素激活电流的调制作用
- 2006年
- 目的研究P物质(SP)对急性分离的大鼠三叉神经节神经元辣椒素受体亚型1(VR1)的调制作用,探讨SP对辣椒素在疼痛传导中作用的影响。方法采用全细胞膜片钳技术记录急性分离的三叉神经节神经元膜VR1介导的电流,并观察预加SP对VR1介导的电流的调制作用。结果大多数三叉神经节细胞对辣椒素敏感,细胞外应用辣椒素(1×10-7~3×10-6mol/L)后可引起缓慢激活无明显去敏感的内向电流,且呈浓度依赖性;分别预加1×10-9、3×10-9和1×10-8mol/L SP 1 min后,辣椒素引起的电流幅值分别增加2.4%、20.8%和51.8%,增加的程度与SP的浓度和预加的持续时间有关。应用SP受体特异性阻断剂GR82334(1×10-6mol/L)可以阻断SP对辣椒素激活电流的增强作用。结论SP可增强三叉神经节神经元膜辣椒素受体介导的电流。
- 罗加烈胡旺平樊友珍甘志强李之望
- 关键词：P物质辣椒素受体全细胞膜片钳三叉神经节
- NALP3炎症小体在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用
- 目的 探讨NALP3 炎症小体活化在糖尿病肾病足细胞损伤中的作用及机制.方法 通过共聚焦显微镜观察NALP3 炎症小体TXNIP 与糖尿病肾病小鼠足细胞的共定位;在糖尿病肾病小鼠肾小球裂解液和体外培养足细胞中,通过Wes...
- 高盼孟宪芳苏华何方方刘建社朱忠华张春
- Raf激酶抑制蛋白的研究进展
- 2013年
- Raf激酶抑制蛋白(RKIP)是磷脂酰乙醇胺结合蛋白家族的成员。RKIP通过与Raf-1结合,抑制了Ras/Raf-1/MEK/ERK信号转导通路,并在NF-κB及G蛋白偶联受体(GPCR)信号转导通路中也起重要调节作用。RKIP参与细胞凋亡、肿瘤转移、神经发育以及精子发生等病理生理过程,通过研究RKIP能为治疗相关疾病提供新思路新靶点。本文主要介绍RKIP的生物功能,着重于其在神经系统、肿瘤和生殖系统中的研究进展。
- 陈礼升钱康田波
- 关键词：RAF激酶抑制蛋白信号传导肿瘤转移神经系统疾病精子发生
- 热敏灸及康复训练治疗膝骨关节炎急性痛慢性化的临床研究被引量：23
- 2019年
- 目的:观察热敏灸能否抑制膝关节骨性关节炎(KOA)患者急性痛的慢性化及是否对受损的弥漫性伤害抑制性控制(DNIC)功能具有调制作用,并与康复训练作对比,为临床推广提供理论依据。方法:将60名KOA患者随机分为热敏灸组和康复训练组,每组30例,分别进行热敏灸治疗和康复训练治疗,比较2组治疗前、中、后的视觉模拟疼痛量表(VAS)、弥漫性伤害抑制性控制(DNIC)及临床疗效。结果:2组患者VAS评分在治疗前、治疗10d及20d后均呈持续下降趋势(P<0.05,0.01),且热敏灸组各时间点VAS评分均低于康复训练组(P<0.01)。热敏灸组DNIC功能评分在治疗前、治疗10d及20d后均呈持续上升趋势(P<0.05,0.01),且热敏灸组在治疗后各时间点DNIC功能评分明显高于康复训练组(P<0.01)。康复训练组DNIC功能评分治疗前后各时间点比较差异无统计学意义。治疗20d后,2组患者膝关节Lysholm功能评分均较治疗前明显提高(P<0.01,0.05),且热敏灸组明显高于康复训练组(P<0.01)。结论:热敏灸能修复膝关节骨性关节炎(KOA)患者急性痛慢性化过程中受损的DNIC功能,从而阻止本病急性痛慢性化的发生。
- 沈林林蔡健李熳
- 关键词：热敏灸康复训练膝关节骨性关节炎
- 电针对化学性炎性胃痛时幽门括约肌几种神经递质的调节作用被引量：4
- 2010年
- 目的探讨大鼠幽门括约肌在化学性炎性痛时一氧化氮（nitric oxide,NO）能、胆碱（acetylcholine,ACh）能神经元和血管活性肠肽（vasoactive intestinal polypeptide,VIP）、降钙素基因相关肽（calcitonin gene-related peptide,CGRP）的变化,以及电针抗化学性炎性胃痛的神经化学机制。方法①甲醛灌胃建立胃痛模型。②电针＂足三里＂穴镇痛。③采用还原型辅酶Ⅱ和亚铁氰化铜直接显色的组织化学方法及PAP免疫组织化学方法分别显示括约肌内一氧化氮合酶（NOS）和胆碱酯酶（AChE）阳性神经元及VIP、CGRP免疫反应性（IR）神经元成分。结果①正常括约肌黏膜下神经丛和肌间神经丛有散在NOS或AChE阳性神经元胞体和神经纤维;CGRP-IR、VIP-IR纤维较丰富,2~3个弱阳性神经元胞体形成丛。以上几种神经元胞体在括约肌增厚部位普遍较多,神经纤维形成浓密的丛状结构;邻近括约肌的胃、肠端侧也有丰富的阳性神经元成分。②甲醛致胃痛时括约肌黏膜下神经丛及肌间神经丛NOS、AChE和VIP阳性神经元活性均降低。图像分析显示,肌内NOS、AChE和VIP阳性神经元的平均吸光度值,甲醛组较正常对照组显著降低（P〈0.01）;但甲醛组CGRP较正常对照组升高（P〈0.05）。③电针使NOS、AChE、VIP、CGRP的组织化学特性恢复至接近正常状态。结论电针对正常胃肠功能起调控作用并参与胃肠动力障碍的调节,其机制是通过括约肌内的神经及其递质,特别是肠神经系统（胆碱能、NO能、VIP能、CGRP能神经）的自主调节途径而实现的。
- 许晓利易卉玲鲁雄兵叶章讯赵珊李琴茹立强
- 关键词：一氧化氮合酶胆碱酯酶血管活性肠肽降钙素基因相关肽幽门括约肌
- 针灸对女性肥胖症合并月经后期或闭经患者的疗效观察及机制研究被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨针灸治疗女性肥胖合并月经后期或闭经患者的作用机制。方法:对纳入26例女性患者针灸治疗2个月,用放免法测实验前后血清性激素[雌激素(E2)、孕激素(P)、雄激素(T)、催乳激素(PRL)、促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)]的变化。结果:26例患者实验前后血清性激素水平分别为:E2(127.07±103.28)pg/mL和(146.60±93.39)pg/mL,P(6.08±11.34)ng/mL和(5.12±2.22)ng/mL,T(59.71±39.64)ng/mL和(56.89±13.92)ng/mL,PRL(19.22±8.72)ng/L和(13.32±4.99)ng/L,FSH(8.37±8.23)ng/mL和(8.49±3.50)ng/mL,LH(10.73±12.01)mIU/L和(10.45±6.09)mIU/L。治疗前后PRL指标有显著差异(P<0.05)。结论:针灸疗法对女性肥胖合并月经后期或闭经患者的PRL有一定改善作用,研究其作用机制有一定的临床价值。
- 张安琪黄梅李熳汪斌
- 关键词：经络针灸肥胖
- 沉默Annexin-A1对小胶质细胞BV-2生长和迁移能力的影响及其机制被引量：3
- 2016年
- 目的 探讨沉默Annexin-A1（Anxa1）基因对小胶质细胞系BV-2细胞生长、迁移能力的影响及其可能机制.方法 采用RT-PCR和Western blot法从基因和蛋白水平验证小干扰RNA（siRNA）对小胶质细胞系BV-2细胞内Anxa1的沉默效率,采用MTT法检测Anxa1 siRNA对BV-2细胞增殖的作用,膜联蛋白Ⅴ/碘化丙啶（AnnexinⅤ/PI）双染流式细胞术检测Anxa1 siRNA对BV-2细胞凋亡的影响,应用Transwell小室检测Anxa1 siRNA对BV-2细胞迁移能力的影响,Western blot法检测细胞周期和迁移相关信号通路蛋白的表达.结果 Anxa1 siRNA干扰组在24 h、48 h、72 h细胞生长抑制率分别为（16.9±2.1）%、（23.1±3.6）%和（42.4±1.7）%,与siRNA-NC组[分别为（1.35±0.5）%、（2.06±0.7）%和（8.65±0.9）%]比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,沉默Anxa1对BV-2细胞的增殖发挥抑制作用;转染后48 h Anxa1 siRNA组细胞凋亡率为（18.4±2.1）%,明显高于siRNA-NC组（5.2±0.3）%和空白对照组（4.3±0.2）%;Anxa1 siRNA干扰组细胞迁移能力（28.7±5.2）明显低于siRNA-NC组（173.4±11.4,P〈0.01）,Anxa1 siRNA干扰可显著下调细胞周期蛋白Cyclin D1的表达水平和激活p38与JNK信号通路.结论 siRNA沉默Anxa1基因可抑制小胶质细胞的生长、迁移能力,分别通过下调Cyclin D1和激活p38与JNK信号通路来实现.
- 魏礼清刘璐丁钟欢肖潇施静卢忠心罗振钊
- 关键词：RNA干扰细胞生长
