深圳海关动植物检验检疫技术中心
- 作品数:209 被引量:159H指数:7
- 相关机构:学研究院华南农业大学大连海洋大学更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目深圳市科技计划项目转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生自动化与计算机技术经济管理更多>>
- 非洲猪瘟病毒免提取核酸荧光定量PCR检测方法的建立被引量:13
- 2019年
- 根据非洲猪瘟病毒(ASFV)保守的VP72基因序列,设计特异性引物和探针,经过优化反应体系中各组分及反应条件,建立了直接检测样品中ASFV的荧光定量PCR方法,并分析该方法的特异性和敏感性。结果显示,该直扩荧光定量PCR方法只对ASFV有特异性扩增,对其他几种相似疾病病原的灭活抗原,如猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒、猪圆环病毒、口蹄疫病毒、印第安纳型水泡性口炎病毒、新泽西型水泡性口炎病毒、猪流行性腹泻病毒等检测均呈阴性。敏感性试验结果显示,对10倍梯度稀释的非洲猪瘟病毒灭活抗原的检测敏感性可达1×10^-6,与OIE推荐的传统的荧光PCR的检测敏感性相当。3个ASFV稀释度样品的组内和组间重复的变异系数均小于5%。该方法无须提取核酸,可在60 min内完成对样品的检测,检测快速、灵敏,结果准确,结合便携式荧光PCR仪,为野外或现场的非洲猪瘟病毒快速检测提供了一种切实可行的方法。
- 张彩虹杨俊兴林彦星刘建利曹琛福史卫军花群义
- 关键词:非洲猪瘟病毒荧光定量PCR
- 一种控释二氧化氯的消毒组合物及其制备方法和应用
- 一种控释二氧化氯的消毒组合物及其制备方法和应用,涉及化学消毒制品技术领域;包括芯层和包覆芯层的囊壁层,所述囊壁层包括亲水高分子聚合物,所述芯层包括质量比为20‑35:15‑25:0.1‑2的羟基甲亚磺酸单钠盐二水合物、亚...
- 兰文升郝维军冼嘉恒余道坚刘宵宵李萍慕容灏鼎谢晋雄
- 一种对虾养殖池尾水中病原消毒处理装置
- 本实用新型公开了一种对虾养殖池尾水中病原消毒处理装置,涉及养殖池消毒技术领域,其技术方案要点是:包括支撑台和储水箱体,所述储水箱体的顶部设有旋转电机;所述储水箱体内设有搅拌机构;所述支撑台的底部设有动力机构;所述搅拌机构...
- 吴江廖立珊王津津郑晓聪刘莹朱崧琪刘荭
- 罗非鱼湖病毒病监测技术规范
- 本文件规定了罗非鱼湖病毒病监测工作的通用要求,描述了对应的试验方法,给出了监测对象、监测点的设置、采样、样品包装和送样、实验室检测、检测结果报告和阳性场处置等内容。本文件适用于参与水生动物疫病监测计划的渔业主管部门、水生...
- 一种免疫层析试纸浓度智能检测方法
- 本发明涉及一种免疫层析试纸浓度智能检测方法,属于计算机图像处理和识别检测技术领域。首先对原始的免疫层析试纸进行拍照,构建图片数据集,用于训练轻量级深度学习检测算法模型。然后,利用手机等对滴有被测溶液的待检测免疫层析试纸进...
- 李建武秦智锋颜子夜周天飞宋歌孙田怡
- 文献传递
- 一种用于预防或治疗鱼类感染CyHV-2的试剂及应用
- 本申请公开了一种用于预防或治疗鱼类感染CyHV‑2的试剂及应用。本申请用于预防或治疗鱼类感染CyHV‑2的试剂包括第一多肽至第八多肽中的至少一种;第一多肽至第八多肽依序为Seq ID No.1至8所示序列。本申请用于预防...
- 温智清刘莹贾鹏刘荭黄志坚简廷涵王寒
- 文献传递
- 一种鲑科鱼发眼卵的活性检测试剂、方法及应用
- 本申请公开了一种鲑科鱼发眼卵的活性检测试剂、方法及应用。本申请的活性检测试剂包括第一引物探针组和/或第二引物探针组中的至少一组;第一引物探针组的上下游引物和探针分别为Seq ID No.1、2和3所示序列;第二引物探针组...
- 史秀杰于力王津津
- 文献传递
- 基于CRISPR/Cas12a技术的非洲马瘟病毒可视化检测方法的建立
- 2023年
- 根据AHSVS7基因的保守序列,设计、合成和筛选出反转录重组聚合酶介导的恒温扩增(RT-RAA)特异性引物和CRISPR/Cas12a特异性crRNA,结合侧向流试纸建立了一种AHSV RT-RAA-CRISPR/Cas12a可视化快速检测方法,并对其性能进行了评估。结果显示,该方法与蓝舌病毒(BTV)、鹿流行性出血热病毒(EHDV)、伪狂犬病病毒(PRV)、马传染性贫血病毒(EIAV)、马动脉炎病毒(EAV)、马流感病毒(EIV)的核酸均无交叉反应;敏感性试验结果显示,本方法最低可检出2.16×101 copies/μL的AHSV核酸;应用该方法及WOAH推荐的RT-qPCR方法对50份模拟样品进行平行检测,结果显示,Kappa值为0.956,表明两者具有高度一致性。综上表明,本研究建立的非洲马瘟病毒RT-RAA-CRISPR/Cas12a可视化快速检测方法特异性好、敏感性高,且操作简单、无需特殊仪器,可应用于野外或口岸现场的AHSV快速筛查检测工作。
- 黄超华周华亮吴江曹琛福史卫军阮周曦林彦星花群义
- 关键词:非洲马瘟病毒
- 蓝舌病病毒血清8型NS3蛋白在昆虫杆状病毒系统中的表达与鉴定
- 2020年
- 为表达蓝舌病病毒NS3蛋白,将蓝舌病病毒血清8型NS 3序列克隆至pFastBac-HTA载体上,经转座、转染后获得重组杆状病毒rBac-NS3;用间接免疫荧光(IFA)检测NS3蛋白的表达情况,并采用亲和层析进行纯化;以Western Blot和间接ELISA方法鉴定NS3蛋白的反应原性。IFA结果显示,重组杆状病毒rBac-NS3感染的Sf9细胞可以大量表达NS3蛋白。Western Blot结果显示,纯化后的NS3蛋白与抗His单抗和绵羊蓝舌病阳性血清能够发生特异性反应;以纯化的NS3蛋白为包被抗原建立的间接ELISA方法可以区分蓝舌病阳性血清和阴性血清,进一步验证本试验利用杆状病毒表达系统成功表达并纯化出蓝舌病病毒NS3蛋白,表明纯化后的NS3蛋白具有良好的反应原性,可作为开发鉴别诊断试剂盒的备选蛋白及NS3蛋白的结构和生物学功能研究。
- 黄超华曹琛福阮周曦史卫军林彦星曾少灵刘建利王潇陈金顶花群义
- 关键词:蓝舌病病毒昆虫杆状病毒NS3蛋白间接ELISA
- 一种蓝舌病病毒核心样颗粒的制备方法
- 本申请公开了一种同时表达蓝舌病病毒vp3和vp7蛋白的大肠杆菌以及蓝舌病病毒核心样颗粒的制备方法。本申请将蓝舌病病毒vp3基因和vp7基因插入到双表达载体pETDuet‑1,构建原核双表达质粒pETDuet‑VP3‑VP...
- 黄超华曹琛福花群义史卫军杨俊兴林彦星阮周曦曾少灵王潇
- 文献传递