暨南大学生命科学技术学院抗体工程研究中心
- 作品数：35 被引量：162H指数：10
- 相关作者：朱小兵王五洲刘李登赵鑫贺文妃更多>>
- 相关机构：华南农业大学动物医学系广州中医药大学热带医学研究所更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家高技术研究发展计划广州市科技攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学轻工技术与工程更多>>
- 赤潮藻毒素GTX_(2,3)免疫吸附生物条码检测方法的建立
- 2009年
- 目的为了提高赤潮藻毒素GTX2,3检测方法的灵敏度,以抗GTX2,3单抗-纳米金-DNA为基础,建立检测GTX2,3高灵敏度的免疫吸附生物条码方法。方法制备腹水型GTX2,3单克隆抗体,饱和硫酸铵、辛酸硫酸铵和ProteinA亲和层析法进行纯化。确定单抗与纳米金标记偶联物的最佳pH和最小蛋白浓度,制备单抗-纳米金-DNA,应用于竞争ELISA建立免疫吸附生物条码检测技术。结果在pH8.5、0.096mg/mL抗体浓度下成功偶联GTX2,3单抗和纳米金,并制备出GTX2,3单抗-纳米金-条码DNA复合物,建立的检测GTX2,3的免疫吸附生物条码检测法灵敏度为0.74μg/mL。结论本研究建立了GTX高灵敏的免疫吸附生物条码法。
- 唐勇向军俭陈耀强贺文妃王宏邓宁杨红宇
- 关键词：纳米金
- 一种抑制肿瘤血管新生的VBP3复合多肽疫苗研究
- VEGF和b FGF是最重要的肿瘤血管生成因子,他们对促进血管内皮细胞的定向分化,促进肿瘤微血管网络的形成,促进肿瘤血管新生,促进肿瘤的生长和转移等都具有非常重要的作用。而且,在肿瘤的发生过程中,VEGF和b FGF还会...
- 邓宁王宏潘磊王新月刘宇骜杨欣悦张巍巍
- 苏丹红Ⅰ、Ⅲ和对位红竞争ELISA检测方法的初步建立被引量：12
- 2008年
- 以4-氨基苯甲酸重氮化后与2-萘酚反应,合成苏丹红Ⅰ号的衍生物(CSD Ⅰ),以活性脂法将CSD Ⅰ与蛋白载体偶联,制备CSD Ⅰ-BSA免疫抗原与CSD Ⅰ-OVA检测抗原。以CSD Ⅰ-BSA免疫Balb/c小鼠,适当免疫后取脾细胞与SP2/0融合,筛得抗CSD Ⅰ的单克隆抗体细胞株5H3。以该细胞株生产抗体与CSD Ⅰ-OVA建立CSD Ⅰ的间接竞争ELISA检测方法,该方法对苏丹红Ⅰ、Ⅲ和对位红的灵敏度约为0.1ng/ml,IC50分别为1.03、1.13、0.89ng/ml,与其他染料交叉反应率低。该ELISA检测方法灵敏、特异,可用于苏丹红Ⅰ、Ⅲ和对位红的快速检测。
- 唐勇琚春梅魏钟杰向军俭
- 关键词：苏丹红抗体
- 抗体技术研究和应用
- 一.抗体应用的发展血清学方法的建立在抗毒素发现以后的10年中,相继在免疫血清中发现有溶菌素、凝集素、沉淀素等特异性组分,并能与其相应细胞或细菌发生反应。1896年,MvonGruber,HEDurham凝集反应
- 向军俭
- 文献传递
- 单增李斯特菌溶血素(LLO)的原核表达及其生物学活性鉴定被引量：10
- 2011年
- 利用生物软件设计单增李斯特菌溶血素蛋白的基因hly的引物,通过PCR扩增hly基因,并将其克隆至PET28a(+)原核表达载体,转化大肠杆菌BL21进行优化表达。用镍柱纯化表达产物LLO,通过免疫印记鉴定其免疫原性,并通过溶血实验鉴定其溶血活性。琼脂糖凝胶电泳结果表明PCR扩增出1 590 bp的片段,经测序鉴定其序列同源性可达99%。SDS-PAGE结果表明诱导表达的产物大小约为58 kD,其最优化的表达条件是28°C下用0.1 mmol/L IPTG诱导6 h。Western blotting结果表明重组表达的LLO具有免疫原性;溶血实验表明重组表达的LLO具有较强的溶血活性,其溶血效价可达1:1 024。这为制备针对单增李斯特菌的单克隆抗体及其检测方法的建立奠定了基础。
- 林婷婷杨晶李志清王彩霞向军俭
- 关键词：溶血素单增李斯特菌
- 抗体技术及其在传染病研究中的应用
- 一.抗体技术的发展二.抗体应用的发展三.现代抗体研究一.抗体技术的发展20世纪有关抗体的10项诺贝尔奖
- 向军俭
- 文献传递
- BFGF单克隆抗体抑制黑色素瘤B16细胞信号通路AKT和PRO—CASPASE3的研究
- 目的：研宄BFGF单克隆抗体抑制黑色素瘤B16细胞凋亡的作用机制。方法:实验室自制BFGF单克隆抗体，经PROTEIN G纯化后干预黑色素瘤B16细胞，CCK-8法检测其对B16细胞的增殖抑制，DAPI染色检测细胞凋亡形...
- 关键词：黑色素瘤AKT
- 文献传递网络资源链接
- 猪肉中1-氨基乙内酰脲的胶体金免疫层析法快速检测被引量：8
- 2010年
- 基于免疫竞争胶体金免疫层析原理,研制了检测食用肉中呋喃妥因代谢物1-氨基乙内酰脲(AHD)的免疫试纸条。用柠檬酸钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗1-氨基乙内酰脲的衍生物(CPAHD)的单克隆抗体并喷于玻璃纤维上,CPAHD-BSA(Bovine serum albumin)抗原和羊抗鼠IgG分别结合于硝酸纤维膜上,依次将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜和吸水纸组装切割成AHD胶体金免疫层析快速检测试纸条。在5 min内肉眼观察结果,该试纸条对AHD的最低检测限为2.33μg/L,除与呋喃妥因有弱交叉反应外,与其他同类物均无交叉反应,用该试纸条和ELISA(Enzyme linked immunosorbent assay)检测猪肉中添加的AHD,结果呈现很好的相关性。该方法灵敏度高,简便快速,无需特殊仪器设备,可作为呋喃妥因残留批量检测的筛选方法。
- 徐霞玲向军俭唐勇陈耀强王五洲杨红宇
- 关键词：呋喃妥因猪肉
- 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)抗体研究进展被引量：11
- 2009年
- 刘李登向军俭
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体肿瘤抗体药物
- 抗重组人bFGF单克隆抗体可变区基因克隆及单链抗体的构建和表达被引量：4
- 2007年
- 目的:从分泌抗重组人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)单克隆抗体(mAb)杂交瘤细胞株B2F3中克隆抗体可变区(V)基因,构建bFGF单链抗体(scFv),并进行可溶性表达。方法:从分泌bFGF mAb杂交瘤细胞株B2F3提取总RNA,用RT-PCR方法扩增抗体重链可变区基因(VH)和轻链的可变区基因(VL);再通过重叠延伸拼接(SOE)PCR方法,在VH和VL基因之间引入linker(Gly4Ser)3,构建bFGFscFv。将测序正确的scFv基因克隆到表达载体pCANTAB5E中,选择非抑制型菌株E.coli HB2151进行可溶性表达;经SDS-PAGE检测抗体表达水平,ELISA鉴定其抗原结合活性。结果:测序分析结果显示,VH基因序列全长375碱基对,编码125个氨基酸,VL基因序列全长399碱基对,编码133个氨基酸,二者均符合小鼠免疫球蛋白可变区基因特征,含有4个框架区(FR)、3个抗原互补决定区(CDR)及抗体特征性的2个半胱氨酸残基;构建的scFv全长789碱基对,编码263个氨基酸,连接结构为VH-linker-VL。SDS-PAGE分析表明scFv基因在大肠杆菌为可溶性表达,表达产物主要位于周质腔中,表达产物的Mr为27000,与理论预期值相符;间接ELISA检测结果显示原核表达的scFv具有与bFGF特异性结合的活性。结论:成功地克隆bFGF mAb可变区基因,并构建表达bFGF scFv,为下一步研究bFGF抗体人源化改造奠定实验基础。
- 王宏陈丹邓宁向军俭靳英杰黄红亮唐勇杨红宇
- 关键词：BFGF单克隆抗体可变区基因单链抗体
