上海多米瑞生物技术有限公司
- 作品数：63 被引量：26H指数：3
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- 相关领域：医药卫生生物学理学化学工程更多>>
- 一种血小板生成素拟肽-Fc融合蛋白的制备方法
- 本发明涉及一种血小板生成素拟肽‑Fc融合蛋白的制备方法。具体地，本发明提供一种血小板生成素拟肽‑Fc融合蛋白的制备方法，所述的方法包括步骤：(6)将血小板生成素拟肽‑Fc融合蛋白提取液依次经过第一阳离子交换树脂柱层析、疏...
- 路建光王强许俊黄宗庆李晓婉鲍玲娜
- 棘白菌素B新型衍生物的设计合成及体外抗真菌活性被引量：1
- 2020年
- 本研究以棘白菌素B母核(ECBN)为基础,在侧链中引入了多肽结构,并探索出了棘白菌素B新型衍生物的固相及液相联合合成的路线。以不同芳香性氨基酸、极性带正电荷氨基酸以及脂肪酸为原料合成了14个新的棘白菌素B衍生物,分别对其进行了抗真菌活性、溶血毒性、水溶性评估,筛选得到了ECBN-[3-(2-萘基)-D-丙氨酸]-(2,4-二氨基丁酸)-月桂酸(ECBN-D-2-Nal-Dab-C12,13)。相比于阿尼芬净,13在保留抗真菌活性的同时,溶血毒性大大降低,并且水溶性得到极大改善,时间-杀菌曲线也证实二者对白念珠菌和克柔念珠菌有相似的杀菌效果。因此,13可作为候选化合物进一步研究和开发。
- 朱冰东圆珍张喜全马洁
- 关键词：抗真菌药抗真菌活性水溶性
- 重组牛肠激酶轻链的制备工艺考察
- 2022年
- 在重组多肽及蛋白质药物的制备过程中,牛肠激酶轻链是应用最广泛的工具酶之一。然而,较低的表达量导致其生产成本居高不下。本研究在已筛选得到的表达量较高的重组菌基础上,利用高密度发酵技术,获得胞外分泌表达的牛肠激酶轻链。并对工程菌的高密度发酵工艺进行了优化,目的蛋白的表达产量达到(478.47±1.70)mg/L。发酵液经过离心、微滤、超滤、离子交换柱色谱等分离提取步骤,使目的蛋白纯度达到(97.94±0.42)%。最后考察了重组牛肠激酶轻链的酶学性质。本研究打通了重组牛肠激酶轻链的小试制备工艺路线,为其作为工具酶在多肽药物生产领域的应用打下了良好的基础。
- 魏笑王丹丹路建光吴勇化浩举冯军
- 关键词：高密度发酵分离纯化
- 人生长激素突变体B2036在大肠杆菌中的分泌表达及分离纯化被引量：2
- 2016年
- 本研究构建了人生长激素突变体B2036(1)分泌表达载体p TAC-stb2036,并在大肠杆菌W3110菌株中表达。通过单因素分析和正交试验优化发酵培养基组成和培养条件,接种量1%,于菌体生长初期(37℃发酵培养3 h)添加终浓度为0.3 mmol/L的IPTG,之后调整温度为25℃,继续发酵培养18 h,1发酵产量较优化前提高了8倍,达到2.8 mg/L。发酵产物经阴离子交换色谱和反相色谱纯化,得到纯度大于97%的目的蛋白,总收率33.2%。
- 许俊黄宗庆张喜全赵伟冯军
- 关键词：发酵纯化
- 高效价的多黏菌素E<Sub>2</Sub>甲磺酸钠
- 提供一种高效价的多黏菌素E <Sub>2</Sub>甲磺酸钠，其制备方法以及在制备治疗革兰氏阴性菌感染的药物中的用途。
- 冯军张喜全吴勇郭猛薛春佳胡明通朱裕辉周杰王猛力
- 文献传递
- 重组胰岛素样生长因子-1的制备被引量：2
- 2019年
- 本文建立大肠埃希菌高效表达重组人胰岛素样生长因子-1(recombinant human insulin-like growth factor-1,rhIGF-1)的制备工艺。应用本实验室构建的基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET28a-Sp1-IGF-1,对其进行高密度发酵和IPTG 诱导表达,发酵液经双水相萃取获得包涵体,产量为3 g/L;对包涵体进行变性和复性,建立反相HPLC 法监测复性过程,复性正确率可达60%;复性液经过柱色谱纯化和冷冻干燥,样品纯度大于98%,总收率为35%。本工艺得到的rhIGF-1,分子质量与理论值一致,其HPLC 保留时间、肽图和生物活性均与参比制剂一致。
- 王照林冯军黄宗庆马洁赵文杰
- 关键词：胰岛素样生长因子-1包涵体复性
- Setmelanotide的制备工艺改进
- 2022年
- 采用固相合成法,以Rink Amide MBHA树脂为载体、Fmoc保护的氨基酸为原料、1-羟基苯并三唑(HOBt)/N,N'-二异丙基碳二亚胺(DIC)为缩合试剂、三氟乙酸(TFA)体系为裂解液,按照减肥药setmelanotide(1)的氨基酸序列制得还原型1粗肽,后采用双氧水氧化法环化还原型1,用RP-HPLC技术进行分离纯化,得到纯度98%以上的1精制品,总收率约47%;并对其制备过程中的相关工艺参数进行了探讨和优化,明确了关键工艺参数,为工业化生产奠定基础,也为其他多肽药物研究提供了技术参考。
- 郭晨冯军蔡正艳东圆珍杨桂英
- 关键词：固相合成减肥药
- 嗜热S-腺苷甲硫氨酸合成酶的固定化及S-腺苷甲硫氨酸的制备
- 2019年
- 本研究以固定化酶比活力、酶活力回收率和反应稳定性为指标,比较了氨基树脂和环氧树脂固定S-腺苷甲硫氨酸合成酶的差别。结果显示氨基树脂固定化效果好,固定化酶比活力为(27.91±1.33)U/g,固定化酶活力回收率为(25.78±1.23)%,连续反应稳定性好。优化后固定化酶的反应条件如下:上样体积为20 BV,流速为3 BV/h,盐类型为硫酸钾与硫酸镁,产物S-腺苷甲硫氨酸的摩尔转化率达(61.78±1.91)%。固定化酶反应液经DK-1阳离子交换色谱柱纯化后得到纯度大于98%的S-腺苷甲硫氨酸(SAM),收率为(71.50±1.61)%。
- 化浩举吴勇黄宗庆张喜全冯军
- 关键词：S-腺苷甲硫氨酸合成酶S-腺苷甲硫氨酸固定化纯化
- 猪-狒狒嵌合体尿酸氧化酶的表达、纯化及酶学性质研究
- 2022年
- 报道了猪-狒狒嵌合体尿酸氧化酶(1)的发酵表达、分离纯化、活性测定及酶学性质分析。采用重组大肠埃希菌高密度发酵技术,以包涵体形式表达1,发酵产量为6.88 g/L。包涵体经碱溶液提取、阴离子交换柱色谱纯化后得到纯度为99.61%的目的蛋白,总酶活收率为78.95%。样品经质谱鉴定和酶活性分析,单亚基相对分子质量正确,比活达到6.25 u/mg,证明自制重组1在大肠埃希菌中成功表达,且具有降解尿酸的能力。本研究为1类药物的高效率制备提供了方法学借鉴。
- 汪柯欣王亚鹏路建光杨桂英化浩举冯军
- 关键词：尿酸氧化酶纯化酶学性质
- 高效表达抗体Fab片段的方法
- 本发明公开了一种高效表达抗体Fab片段的方法。具体方法是将保存的重组基因工程大肠杆菌种子，经过活化，摇瓶培养，扩大转接至5L发酵罐中通气搅拌培养，当发酵罐中菌体OD<Sub>600</Sub>达到约40时，补加一定量的M...
- 冯军黄宗庆李乐乐吴勇路建光张庆彬张友
- 文献传递
