武汉大学基础医学院医学结构生物学研究中心
- 作品数：31 被引量：67H指数：4
- 相关作者：方萍刘春新陈利达李莉更多>>
- 相关机构：武汉理工大学化学工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖北省自然科学基金天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学生物学更多>>
- Jα33基因工程蛋白与多克隆抗体的制备及初步应用被引量：1
- 2012年
- 为了获得同时识别人类和小鼠MAIT细胞的特异性抗体,我们制备了MAIT细胞TCRα链Jα33融合蛋白及其抗体,为MAIT细胞在炎症性肠道疾病(IBD)中作用的研究提供有利的工具。用Jα33的全长序列为引物经PCR扩增Jα33串联体,扩增的串联体片段连接进入T载体,阳性克隆转入pGEX-4T-1表达载体中原核表达GST-Jα33融合蛋白,纯化后的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备anti-Jα33多克隆抗体。并分别用Western blot和RT-PCR检测IBD模型小鼠MAIT细胞Jα33的表达。成功获得分子量约为38 kD的融合蛋白,免疫大白兔后得到抗Jα33的多克隆抗体,Western blot结果显示Jα33多克隆抗体能检测到人外周血单个核淋巴细胞表面Jα33的表达,而HeLa中则无Jα33的表达;MAIT细胞Jα33在IBD小鼠肠组织中表达量明显低于正常对照。成功制备了能同时识别人类和小鼠MAIT细胞Jα33的多克隆抗体,为研究MAIT细胞的定位和功能开启了方便之门。
- 肖睿璟吴孟君王梅彭妹郑颖城郑小玲何玉玲谭锦泉
- 关键词：抗体制备
- 纤维素-大豆蛋白混合膜与内皮细胞生物相容性的实验研究
- 2008年
- 目的:研究和评价纤维素-大豆蛋白混合膜与内皮细胞的生物相容性,为其作为人工生物支架材料应用于组织工程提供实验依据。方法:将内皮细胞株ECV304与不同组分、碱处理前后的纤维素-大豆蛋白混合膜共培养,分别以四氮甲唑蓝(MTT)法检测细胞活力,以扫描电镜(SEM)观察细胞形态和生长状态。结果:与阴性对照组和单纯纤维素组相比,ECV304在纤维素-大豆蛋白混合膜上生长良好,大豆蛋白加入到纤维素膜中显著提高了ECV304的细胞活力;在碱处理后的混合膜表面,细胞长出许多足突伸入膜孔隙,明显促进细胞在膜表面粘附。结论:初步表明纤维素-大豆蛋白混合膜与内皮细胞ECV304生物相容性良好,在血管组织工程领域具有应用潜能。
- 刘义华王念区家乐文静陈云刘永明
- 关键词：细胞生物相容性大豆蛋白纤维素内皮器官移植组织器官
- 纤维素/大豆蛋白质复合膜贮存过程中表面形貌变化的扫描电镜分析
- 本文利用扫描电子显微镜观察分析了纤维素/大豆蛋白质复合膜在蒸馏水里贮存过程中的表面微观结构的变化。结果显示,膜材料在水中贮存5天就有一定程度降解, 表面出现孔结构和丝状结构,到第30天时丝状结构更加明显。这种降解作用来自...
- 罗丽花王小梅崔冶建梁惠陈云
- 关键词：纤维素大豆蛋白质复合膜扫描电镜贮存过程
- 文献传递
- 混合式实验教学在大型仪器共享服务平台的应用被引量：2
- 2021年
- 为探讨混合式教学在大型仪器共享服务平台实验课程的实践效果,针对平台开设的医学八年制本科生和研究生的生物医学前沿技术课程,从教学过程、方法构建、教学效果等方面着手改革,设计了混合式教学。结果表明,多数学生认为混合式教学效果明显,对今后的研究工作思路提升有很大帮助。对于少数学生反馈教学中互动不频繁、气氛不够活跃等问题,文中也探讨了混合式教学优化的方向。
- 周颖田卫群柳卫凰何远王适群童攒陈云
- 关键词：混合式教学实验教学
- PI法和Annexin V/PI法检测蓝舌病毒HbC_3诱导人肝癌细胞的凋亡被引量：3
- 2006年
- 利用流式细胞仪比较PI法和AnnexinV/PI法检测不同时间人肝癌细胞感染蓝舌病毒HbC3的凋亡率分析。结果:PI法在24h、36h、48h的凋亡率分别为10.8±3.05、21.7±6.28、28.3±10.6;AnnexinV/PI法的凋亡率分别为20.42±3.70、49.3±8.11、79.6±11.5。二种方法及不同时间感染病毒细胞的凋亡率之间有显著差异(P<0.01)。证明了AnnexinV/PI法能特异地、准确地检出早期凋亡的细胞、继发性坏死的细胞,BTV-HbC3诱导Hep-3B细胞凋亡是致肿瘤细胞病变、死亡的重要表现形式之一。
- 汪艳刘春新易有荣崔冶建朱珺董长垣
- 关键词：PROPIDIUMANNEXIN凋亡
- 动情周期中大鼠输卵管与植物凝集素BS-1结合的糖蛋白的表达被引量：2
- 2004年
- 目的 初步鉴定大鼠输卵管中存在与植物凝集素BS 1结合的糖蛋白 ,并研究其在输卵管中的定位和不同动情周期中糖蛋白的表达变化。方法 根据阴道涂片检查将大鼠分为 :间情期 (DE)组、动情前期 (PE)组、动情期 (E)组和动情后期 (ME)组。用冰冻切片法、荧光组化技术和共聚焦显微镜技术观察大鼠输卵管中与BS 1结合糖蛋白的分布及表达变化。结果 大鼠输卵管中存在与BS 1结合的糖蛋白 ,并呈节段性分布 ,即峡部 >壶腹部。动情周期中大鼠输卵管糖蛋白的表达 :动情期 >动情前期 >动情后期 >间情期。结论 大鼠输卵管与植物凝集素BS 1结合的糖蛋白在动情期 (E)峡部上皮表达最明显 ,具有雌激素依赖性。
- 黄静孟运莲汪琳张玲黎莉潘伯群汪艳
- 关键词：动情周期输卵管植物凝集素糖蛋白
- 弹性K锉清理和成形弯曲根管的能力被引量：3
- 2004年
- 目的 :通过离体牙研究 ,比较不锈钢普通K锉 (K file)和弹性K锉 (K flexofile)清理和成形弯曲根管的能力。方法 :选取新近拔除的带有弯曲根管 (1 0～ 2 5°)的磨牙 30颗 ,根据被选根管的弯曲度、弯曲半径将 30颗牙随机分为 2组 ,分别行不同器械的预备。预备完成后将各样本去冠后沿牙根长轴纵剖 ,在扫描电子显微镜 (scanningelectronmicroscope ,SEM)下对碎屑和玷污层评分并行Wilcoxon,s检验评价两种K锉的清理能力 ;通过双曝光技术和四格表确切概率法分析根管偏移发生率 ,评价器械的成形能力。结果 :两组根管中部的清洁度相当 (P >0 .0 5 ) ,根管尖部的清洁度K flexofile组强于K file组 (P <0 .0 5 ) ;K flexofile组根管偏移发生率低于K file组 (P <0 .0 5 )。结论 :弹性K锉联合改良双敞技术清理和成形弯曲根管的能力显著优于普通K锉 ,在临床值得推广。
- 刘生波边专范兵樊明文梁慧
- 关键词：弯曲根管根管预备扫描电镜不锈钢K锉
- 叔丁基对苯二酚对苯诱导的大鼠骨髓细胞毒性的保护作用被引量：6
- 2006年
- 目的探讨叔丁基对苯二酚(tBHQ)对苯诱导的骨髓细胞毒性的保护作用。方法体外培养的大鼠骨髓细胞随机分为对照组和tBHQ预处理组,对照组:以不同浓度(0、5、10、15、20mmolL)苯分别染毒骨髓细胞2、4、6h;tBHQ预处理组:骨髓细胞染苯前先行tBHQ(100μmolL)预处理12h。单细胞凝胶电泳法检测骨髓细胞DNA损伤,流式细胞仪检测骨髓细胞凋亡率,2,6二氯靛酚还原法测定苯染毒前两组骨髓细胞内依赖还原型辅酶ⅠⅡ醌氧化还原酶(NQO1)的活力。结果对照组中随苯染毒浓度的增加、染毒时间的延长,骨髓细胞DNA损伤增强,细胞凋亡率增加。tBHQ预处理组中5、10、15、20mmolL苯染毒骨髓细胞的DNA迁移率和迁移度低于同浓度、同时间点的对照组,差异有统计学意义(P<0.05);15、20mmolL苯染毒2h及10、15、20mmolL苯染毒4h和5、10、15、20mmolL苯染毒6h骨髓细胞的凋亡率较同浓度、同时间点的对照组降低,差异有统计学意义(P<0.05);tBHQ预处理组骨髓细胞内NQO1活力(1.62±0.16mgpro-1·min-1)高于对照组(0.95±0.08mgpro-1·min-1),差异有统计学意义(P<0.01)。结论苯可诱导体外培养的大鼠骨髓细胞DNA损伤和细胞凋亡,并呈现一定的时间、剂量依赖性;tBHQ可诱导骨髓细胞NQO1活力增强,对苯诱导的骨髓细胞毒性有保护作用。
- 赵职卫毕勇毅潘伯群张玲陈小慧欧阳静萍马强
- 关键词：叔丁基对苯二酚苯细胞毒性骨髓细胞
- 外源性胰岛素样生长因子1基因在大鼠骨髓基质细胞中的表达及对其生物学行为的影响被引量：1
- 2006年
- 目的:观察人胰岛素样生长因子1(hIGF-1)基因转染大鼠骨髓基质细胞(BMSC)后产物的表达及对BM-SC特征的影响。方法:构建hIGF-1逆转录病毒载体并转染BMSC,嘌呤霉素筛选,RT-PCR和ELISA法检测hIGF-1表达,MTT及美蓝、碱性磷酸酶钙钴、苏丹Ⅲ染色观察转染后BMSC增殖、集落形成及分化,并分析药物筛选对其增殖的影响。结果:转染BMSC经筛选后,IGF-1表达的增幅高于未经筛选者(10.7倍∶6.7倍)。与空质粒转染组比较,未经筛选的BMSC增殖加快,而经筛选者增殖和集落形成能力降低,向脂肪及成骨细胞分化增强。结论:基因修饰可成功构建高表达IGF-1的BMSC,并促进其增殖和自然分化,但嘌呤霉素筛选对其自我更新能力有负面作用。
- 吴艳宋健万瑜胡成俊刘维新王乔
- 关键词：胰岛素样生长因子1转染骨髓基质细胞
- 17β-雌二醇对豚鼠胆囊平滑肌收缩的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察17β-雌二醇对豚鼠胆囊平滑肌的基因组和非基因组效应，初步探究其机制。方法构建去卵巢豚鼠动物模型，皮下注射17β-雌二醇，检测各组豚鼠血清雌二醇和八肽胆囊收缩素（CCK-8）含量；采用张力换能器观察17β-雌二醇对胆囊离体肌条收缩的影响。观察17β-雌二醇对豚鼠胆囊平滑肌肌条的急性效应及可能机制。结果与假手术组相比，去卵巢组豚鼠血清雌二醇和CCK-8含量降低（P〈0．05），离体胆囊肌条对CCK-8以及乙酰胆碱的敏感性升高（P〈0．05）。随着皮下注射17β-雌二醇时间（1、3和7d）的延长，二者含量升高（P〈0．05），离体胆囊肌条对CCK-8和乙酰胆碱的敏感性下降（P〈0．05）。10^-9～10^-7mol／L的17β-雌二醇对正常豚鼠离体胆囊肌条收缩无明显影响（P〉0．05），10^-6～10^-5mol／L的17β-雌二醇可以抑制胆囊肌条收缩（P〈0．05），这种抑制效应可以被尼莫地平、阿托品、地伐西匹、ICI182，780和Y-27632等阻断剂阻断。结论17β-雌二醇与胆囊动力相关，可以通过基因组和非基因组机制影响胆囊平滑肌的收缩。
- 肖勇余保平张永顺赵梦胡柳丹
- 关键词：17Β-雌二醇平滑肌胆囊
