广东药学院基础学院广东省生物活性药物研究重点实验室
- 作品数：36 被引量：121H指数：6
- 相关作者：鲍冬梅梁璐璐杨梅林密更多>>
- 相关机构：广州医科大学附属肿瘤医院中山大学药学院南方医科大学公共卫生与热带医学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- 过氧化氢对PC12细胞plk1基因表达的影响被引量：2
- 2013年
- 目的观察过氧化氢对体外培养的PC12细胞plk1基因表达的影响。方法采用MTT法观察不同浓度过氧化氢对体外培养的PC12细胞作用6 h后,对PC12细胞存活率的影响;Western-blot检测不同浓度过氧化氢作用后,PC12细胞plk1基因蛋白表达水平的变化。结果与对照组比较,过氧化氢剂量依赖性降低PC12细胞的存活率,增强PC12细胞plk1基因蛋白的表达水平。结论过氧化氢降低PC12细胞的增殖活力,其机制可能是通过增强Plk1蛋白表达水平来实现。
- 薛淑燕吴心兰伍秋婵吴俐玫陈东丽梅寒芳
- 关键词：过氧化氢PC12细胞
- 姜黄素和穿心莲内酯对鼻咽癌细胞CNE-2的作用及机制被引量：2
- 2015年
- 目的研究姜黄素和穿心莲内酯对人鼻咽癌细胞CNE-2体外抗癌的联合作用,并探讨其可能抗癌分子机制。方法 MTS法检测穿心莲内酯(Andro)单独作用以及与姜黄素(Cur)的联合作用(DMSO、Andro 5.0μmol/L、Andro 10.0μmol/L、Cur 10.0μmol/L、Andro 5.0μmol/L+Cur 10.0μmol/L、Andro 10.0μmol/L+Cur 10.0μmol/L)对不同肿瘤细胞增殖的影响;流式细胞术分析姜黄素和穿心莲内酯联合作用对CNE-2和He La细胞周期影响;Wes-tern blot分析姜黄素和穿心莲内酯联合作用对CNE-2细胞的NF-κB家族相关蛋白P50和P65蛋白的表达。结果穿心莲内酯单独作用时在10μmol/L以下浓度对各肿瘤细胞无显著抑制作用,而10μmol/L姜黄素联合穿心莲内酯处理CNE-2和He La细胞48 h能使细胞存活率显著降低以及使细胞发生明显的G2/M期阻滞;Western blot结果显示两者联合作用能够协同抑制NF-κB家族相关蛋白P50和P65以及NF-κB调控蛋白c-Myc的表达。结论姜黄素和穿心莲内酯协同作用于NF-κB信号通路发挥抗肿瘤作用。
- 吴清清陈永恒廖芬芳王伟章
- 关键词：姜黄素穿心莲内酯CNE-2NF-ΚB
- 家蝇抗菌肽Defensin在毕赤酵母中的表达及活性鉴定被引量：4
- 2010年
- 拟通过酵母系统表达家蝇抗菌肽Defensin基因,并初步鉴定其抗菌活性。采用限制性内切酶SacⅠ将分泌型重组表达质粒pPIC9K/Defensin线性化后,运用氯化锂转化法将其转入巴斯德毕赤酵母GS115中,行G418加压筛选和PCR鉴定;所得阳性转化子转至摇瓶,28℃条件下0.5%甲醇诱导表达,连续诱导培养4 d后,上清液进行Tricine-SDS-PAGE检测表达效果,并采用琼脂糖孔穴扩散法检测表达产物对大肠杆菌E.coliK12D31的抑制作用。结果显示,家蝇抗菌肽Defensin在毕赤酵母中得到了成功表达,表达产物对大肠杆菌E.coliK12D31的生长有抑制作用。说明酵母系统适合抗菌肽的表达。
- 金小宝王婷婷朱家勇李小波马艳褚夫江卢雪梅
- 关键词：家蝇抗菌肽DEFENSIN毕赤酵母
- 传统炮制与现代加工方法对罗仙子抑菌及抗炎作用影响的比较被引量：1
- 2013年
- 目的:比较传统炮制与现代加工方法对罗仙子抑菌及抗炎活性的影响。方法:以金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及LPS诱导的巨噬细胞RAW264.7为实验对象,比较传统炮制及现代加工制品的抑菌及抗炎作用。结果:现代加工制品的抑菌抗炎作用优于传统炮制品。结论:现代加工工艺能够有效的保护罗仙子中抑菌及抗炎物质的活性。
- 褚夫江金小宝许银叶吴玉萍刘文彬朱家勇
- 关键词：抑菌抗炎
- β-防御素2真核表达载体的构建及其在肝癌细胞Hepa1-6中的稳定表达被引量：1
- 2010年
- 目的克隆抗菌肽β防御素2(mBD2)基因,构建真核分泌性表达载体,使其在Hepa1-6细胞中稳定表达。方法Trizol试剂提取C57BL/6鼠肾总RNA,RT-PCR扩增mBD2成熟肽基因,Overlap-PCR在成熟肽基因上游加上鼠IgК信号肽基因,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),PCR、酶切和测序鉴定正确后,脂质体法转染Hepa1-6细胞,G418筛选,RT-PCR和Western印迹法从mRNA和蛋白角度鉴定mBD2分子的表达。结果成功克隆含有信号肽的IgК-mBD2序列,并且构建pcDNA3.1(+)/IgК-mBD2真核分泌性表达载体,实现了mBD2分子在Hepa1-6细胞中稳定表达,RT-PCR从细胞总RNA中扩增得到202bp的IgК-mBD2基因,Western印迹法鉴定细胞培养上清中有mBD2蛋白分子表达。结论成功构建了pcDNA3.1(+)/IgК-mBD2真核分泌性表达载体,转染得到稳定表达mBD2的Hepa1-6细胞株,为进一步研究mBD2的生物学特性及抗肝癌机制奠定细胞学基础。
- 梅寒芳金小宝朱家勇
- 关键词：防御素天然免疫肝癌
- 家蝇抗菌肽Cecropin对人肝癌BEL-7402细胞周期的影响及其机制被引量：3
- 2013年
- 目的探讨家蝇抗菌肽Cecropin对人肝癌BEL-7402细胞周期的影响及其机制。方法人肝癌细胞BEL-7402经家蝇抗菌肽Cecropin作用后,光学显微镜观察细胞生长情况,PI单染流式细胞术检测各组细胞周期分布情况,并采用间接免疫荧光标记技术通过流式细胞仪检测细胞周期检测点激酶1(CHK1)和细胞周期依赖性蛋白激酶2(CDK2)。结果光学显微镜下,对照组细胞形态规则,呈梭形贴壁生长,抗菌肽组细胞部分变圆,贴壁不佳,数量减少;细胞增殖周期发生改变,G0/G1与G2/M期细胞比例降低,S期细胞比例增高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),并且细胞周期调控关键蛋白分子CHK1和CDK2的表达增高。结论家蝇抗菌肽Cecropin可通过调节CHK1和CDK2的表达影响BEL-7402细胞增殖周期。
- 金小宝蒲俏虹梅寒芳褚夫江朱家勇
- 关键词：家蝇抗菌肽肝癌细胞细胞周期
- 药用昆虫美洲大蠊内生放线菌的分离和鉴定被引量：10
- 2016年
- 目的探讨药用昆虫美洲大蠊内生放线菌的多样性和生物学特性,挖掘新的微生物资源。方法采用平板稀释法对美洲大蠊内生菌进行分离和纯化;分离菌通过形态学观察和16SrDNA序列分析进行分类鉴定,运用MEGA5.1软件,采用最大似然值法构建系统发育树,对其进行进化分析。结果从15只美洲大蠊肠道分离得到159株内生放线菌,分属于12个属9个科,其中链霉菌107株,戈登氏菌13株,诺卡氏菌2株,小单孢菌5株,栖白蚁菌4株,纤维单孢菌3株,分枝杆菌4株,微杆菌11株,短状杆菌4株,无色杆菌4株,土壤泛球菌1株,壤霉菌1株。结论美洲大蠊的内生放线菌丰富多样,其中蕴藏着的新类型放线菌,可能成为活性天然产物和先导药物的重要来源。
- 方霞沈娟王影姣陈至里朱家勇金小宝
- 关键词：美洲大蠊内生放线菌RDNA序列系统发育树
- 家蝇天蚕素对人肝癌BEL-7402细胞的作用靶点被引量：2
- 2011年
- 将家蝇天蚕素(终浓度50μmol/L)加入对数生长期的人肝癌BEL-7402细胞中作用12h,扫描电镜观察天蚕素对人肝癌细胞细胞膜的影响。在此基础上,采用绿色荧光素异硫氰酸(FITC)标记天蚕素,运用激光共聚焦显微镜观察FITC标记的天蚕素与人肝癌细胞细胞膜的作用。肿瘤细胞经天蚕素作用12h后,扫描电镜显示细胞膜表面微绒毛大部分消失;激光共聚焦显微镜显示大部分天蚕素与细胞膜结合,细胞内也发现部分天蚕素进入。
- 金小宝李小波朱家勇卢雪梅沈娟褚夫江梅寒芳
- 关键词：扫描电镜激光共聚焦显微镜天蚕素细胞膜
- 家蝇抗菌肽diptericin基因的组织表达研究被引量：2
- 2012年
- 目的运用原位杂交方法检测家蝇抗菌肽基因dipericin组织表达模式。方法基于前期实时荧光定量PCR的结果 ,选取病原诱导12 h后的家蝇三龄幼虫,提取其RNA,克隆出dipericin保守序列,应用地高辛标记的diptericin基因反义RNA探针,对经多重耐药的大肠杆菌和耐甲氧西林葡萄球菌混合液刺激前后的家蝇幼虫组织切片进行组织原位杂交。结果 diptericin基因在诱导和未诱导家蝇幼虫的体壁和肌肉均未表达,在诱导后的脂肪体及中肠有高表达,在未诱导的家蝇幼虫部分组织内也有检测到阳性信号,如气管有很弱的表达,而马氏管则诱导与未诱导均有表达。结论家蝇抗菌肽基因diptericin在家蝇抵御外界微生物感染免疫防御中,有着极其重要的作用。
- 杨小蓉金小宝朱家勇
- 关键词：家蝇原位杂交技术
- CBZ-AAN-Dox新前药的计算机辅助设计及合成与活性检测
- 2014年
- 目的探究一种以多柔比星为母药的低毒新型抗肿瘤前药。方法采用Sybyl 8.0的Sketch模块进行前药的计算机辅助设计,通过多种短肽共价偶联多柔比星形成前药库。虚拟筛选后用化学方法合成前药,通过硅胶柱和凝胶柱进行纯化,HPLC法检测与鉴定,体外特异性酶解试验及细胞毒性试验进行活性检测。结果计算机辅助药物设计所得到的新型前药N-苄氧羰基-丙氨酰-丙氨酰-天冬酰胺-多柔比星物理及化学参数较好,其化学合成产物纯度为94%,其天冬酰胺内肽酶酶解Km和Vmax分别为(68±7)μmol/L,(3.9±0.6)μmol/(L·s),对2种体外培养肿瘤细胞株的毒性作用约降低了约90%。结论计算机辅助药物设计在指导多柔比星前药合成过程中具有参考意义;前药合成与分离纯化方法简单可靠,分离效果好;新合成前药细胞毒性降低,可被天冬酰胺内肽酶酶解。
- 陈宏远刘晓邵方元刘忠王一飞芮雯
- 关键词：多柔比星前体药物
