您的位置： 专家智库 > >

深圳大学生命科学学院深圳市微生物基因工程重点实验室

作品数：111 被引量：448H指数：11
相关作者：刘刚李冉辉何曼文余玉雯黎科更多>>
相关机构：中国科学院长春应用化学研究所武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室南京大学化学化工学院现代配位化学国家重点实验室更多>>
发文基金：国家自然科学基金深圳市科技计划项目广东省自然科学基金更多>>
相关领域：生物学医药卫生农业科学理学更多>>

合作机构

文献类型

  • 92篇期刊文章
  • 16篇会议论文

领域

  • 58篇生物学
  • 21篇医药卫生
  • 15篇农业科学
  • 14篇理学
  • 7篇轻工技术与工...
  • 5篇化学工程

主题

  • 16篇蛋白
  • 14篇基因
  • 13篇大豆
  • 12篇胁迫
  • 11篇里氏木霉
  • 11篇酵母
  • 10篇植物
  • 10篇纤维素
  • 9篇纤维素酶
  • 9篇耐盐
  • 8篇细胞
  • 8篇基质
  • 7篇电离
  • 7篇质谱
  • 7篇杆菌
  • 7篇毕赤酵母
  • 6篇多头绒泡菌
  • 6篇烟草
  • 6篇大肠杆菌
  • 5篇蛋白质

机构

  • 108篇深圳大学
  • 3篇中国科学院
  • 2篇华南农业大学
  • 2篇深圳市疾病预...
  • 2篇中国科学院广...
  • 2篇中国科学院华...
  • 2篇广东神州木兰...
  • 1篇合肥师范学院
  • 1篇东北师范大学
  • 1篇南京大学
  • 1篇吉林大学
  • 1篇武汉大学
  • 1篇南方医科大学
  • 1篇仲恺农业工程...
  • 1篇深圳市南山区...
  • 1篇深圳市药品检...
  • 1篇加州大学
  • 1篇清华大学研究...
  • 1篇中国人民解放...
  • 1篇广州天适集团...

作者

  • 24篇郑易之
  • 22篇刘刚
  • 21篇邢苗
  • 15篇田生礼
  • 15篇王勇
  • 12篇李水明
  • 12篇刘昀
  • 11篇余少文
  • 8篇刘士德
  • 8篇王娟
  • 8篇何曼文
  • 7篇张小云
  • 7篇张建华
  • 6篇张宇
  • 6篇唐玉林
  • 6篇李冉辉
  • 6篇胡章立
  • 5篇张永夏
  • 5篇刘国宝
  • 4篇兰英

传媒

  • 11篇深圳大学学报...
  • 6篇分析化学
  • 5篇生物技术
  • 4篇中草药
  • 4篇生物工程学报
  • 4篇质谱学报
  • 3篇生命科学
  • 3篇微生物学通报
  • 3篇中国药理学与...
  • 2篇生物技术通讯
  • 2篇生命科学研究
  • 2篇中华物理医学...
  • 2篇食品与发酵工...
  • 2篇Journa...
  • 2篇中国生物化学...
  • 2篇光谱学与光谱...
  • 2篇食品研究与开...
  • 2篇菌物学报
  • 2篇分子细胞生物...
  • 2篇中国植物生理...

年份

  • 3篇2018
  • 1篇2017
  • 2篇2016
  • 10篇2015
  • 19篇2014
  • 11篇2013
  • 1篇2012
  • 4篇2011
  • 5篇2010
  • 5篇2009
  • 5篇2008
  • 6篇2007
  • 13篇2006
  • 13篇2005
  • 10篇2004
共 111 条 记 录，以下是 1-10
全选 清除 导出
排序方式：
siRNA介导多药耐药相关蛋白(MRP的表达沉默(英文)
2008年
利用pSIREN-RetroQ载体构建了3个沉默多药耐药相关蛋白(MRP1)基因表达质粒pSIREN-siRNAs.并通过限制性内切酶酶切鉴定和DNA测序鉴定,将截断的MRP1和全长MRP1cDNA分别克隆到真核表达载体pEGFP-N2和pcDNA3.1中,产生了pEGFP-MRP1T和pcDNA-MRP1表达质粒.质粒pEGFP-MRP1T分别与3个pSIREN-siRNAs共转染HEK293细胞沉默MRP1T-GFP靶基因,pSIREN-siRNA1作为阴性对照.荧光显微镜下显示结果表明,与pSIREN-siRNA1相比,pSIREN-siRNA2和pSIREN-siRNA3产生的siRNA能够有效沉默MRP1T-GFP融合蛋白的表达.为了沉默全长MRP1基因的表达,pcDNA-MRP1分别与3个pSIREN-siRNAs共转染HEK293细胞.Western印迹和MTT分析表明,pSIREN-siRNA2和pSIREN-siRNA3能有效抑制190kDMRP1在HEK293细胞中的表达,而pSIREN-siRNA1则不能.pSIREN-siRNA2和pSIREN-siRNA3能逆转MRP1转染HEK293细胞产生的多药耐药性.RNA二级结构预测结果分析表明,siRNA1靶序列mRNA局部自由能热动力参数ΔG低于siRNA2和siRNA3靶序列mRNA局部自由能热动力参数,siRNA1的GC含量和Tm值高于siRNA2和siRNA3.这些数据提示,siRNA和局部靶结构可能影响siRNA对MRP1 mRNA表达的沉默作用.
田生礼刘桂云郑硕梁惠卿刘士德张建华
关键词：RNA干涉多药耐药相关蛋白1RNA二级结构
高温逆境胁迫对月季3个品种光合特性的影响研究
使用Li-6400光合测定系统,对深圳市人民公园3种月季('黑夫人'、'香欢喜'、'美斯泰')的光合特性进行了比较,探究月季光合作用与相关生理生态因子的关系,以期为不同月季的合理栽培提供理论依据.
李庭海何亨辉黄俊颖刘晓黎科张永夏
多头绒泡菌微原质团瞬时表达系统的构建
2009年
真核生物多头绒泡菌的原质团是研究细胞周期的好材料。但尚无合适的表达体系可供选择。本研究用多头绒泡菌ardC actin基因启动子和终止子分别替换哺乳动物细胞表达质粒pDsRed1-N1的CMVIE和SV40 polyA片段,构建了多头绒泡菌红色荧光蛋白(RFP)表达质粒pXM1;用PardC-MCS-DsRed1-TardC替换pTB38表达盒PardC-hph-TardC,构建了多头绒泡菌RFP表达质粒pXM2。将多头绒泡菌转录延伸因子类似蛋白(PELF1)基因与质粒pXM2重组,构建了PELF1红色荧光融合蛋白(PELF1-RFP)表达质粒pXM2-pelf1。通过荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜观察RFP表达发现,电转参数为4kV/cm(电场)、1A(电流)、70μs(电击时间)时,质粒pXM1和pXM2电转多头绒泡菌微原质团(≤500μm)后24～48h内,RFP荧光最显著;而PELF1-RFP则主要聚集在多头绒泡菌细胞核,说明本试验建立的表达系统可以用于研究特定蛋白在多头绒泡菌内的瞬时表达。
刘士德程彩霞林子扬张建华李明华周卓龙田生礼邢苗
关键词：多头绒泡菌
雌激素样化合物对人细胞色素氧化酶2A6基因的转录调控
2014年
目的建立尼古丁代谢酶CYP2A6报告基因高容量筛选系统,分析环境和天然雌激素样化合物对CYP2A6基因转录的影响。方法构建3种CYP2A6基因转录上游-2460^+1全长、增强子-启动子串联和3倍增强子-启动子串联的荧光素酶报告基因重组体pGL3-2A6 3UP,GL3-2A6 EP和pGL3-2A63EP,分别与雌激素受体α(ERα)及海肾荧光蛋白表达载体三重共转染人肝HepG2细胞。用双荧光素酶报告基因分析技术,选择确认对雌二醇诱导应答最强的CYP2A6报告基因系统;分别用氰戊菊酯、2,2',4,4'-四溴联苯醚、4-二羟基二苯基丙烷、全氟辛酸铵、淫羊藿苷、大豆苷元和槲皮素等7种拟雌激素化合物处理转染报告基因的HepG2细胞,同时设置雌二醇10 nmo·lL-1阳性和0.1%DMSO阴性对照,48 h后测定各组细胞相对荧光强度,分析评估拟雌激素物质对CYP2A6基因转录的诱导作用。结果 3种CYP2A6报告基因重组体中pGL3-2A6 3EP对雌二醇诱导应答最强,且呈显著量效依赖关系。7种拟雌激素化合物对CYP2A6报告基因均具显著诱导作用,其中,2,2',4,4'-四溴联苯醚1.0~100.0 nmol·L-1诱导倍变值为1.45±0.13~3.30±0.13(P<0.01),诱导效应最强。表现出相似的量效诱导关系,淫羊藿苷、大豆苷元和槲皮素10μmo·lL-1时的诱导倍变值为2.41~2.83(P<0.01)。结论建立灵敏可靠、重复性强的CYP2A6报告基因高容量筛选系统,证实多种拟雌激素物质通过激活ERα诱导CYP2A6报告基因转录。提示环境拟雌激素污染物和药材食材雌激素样活性物质可诱导个体尼古丁代谢酶基因表达,从而干扰个体尼古丁代谢清除活性及其对环境化合物致癌代谢活化水平。
黄春玲邓寒柯雪娥韩霜雪何晓阳
关键词：细胞色素P450CYP2A6
一种大豆lea1基因在原核细胞中的表达及其在抗渗透胁迫保护中的作用
干旱、盐、低温是影响农作物产量的主要非生物因素。随着植物分子生物学技术的发展,克隆抗旱基因,研究抗旱相关基因的功能成为人们不断探索的热点问题之一。胚胎发育晚期丰富蛋白(late embryogenesis abundan...
兰英蔡丹彭素杯郑易之
关键词：渗透胁迫原核细胞延迟期GENBANK对数期高等植物
大豆耐盐相关基因的分离及其功能鉴定被引量：13
2004年
利用大肠杆菌功能表达体系,从大豆开花40d未成熟种子的cDNA表达文库中筛选获得了11个耐盐相关cDNA克隆.对其中3个克隆的插入片段进行测序.结果显示,其中的Gm1013为一尚未报道的新基因片段;GmRPS25 2编码的蛋白质序列与西红柿40S核糖体蛋白S25有91%的同源性;GmAIP 2编码的蛋白质序列与大豆根铝诱导蛋白SALI3 2有97%的同源性.其中GmAIP 2可表达分子量为30 8kD的多肽.pET GmAIP 2转化后的大肠杆菌在含800mmol/LNaCl和700mmol/LKCl的液体培养基中生长状况明显好于对照菌,即前者表现出较短的生长迟滞期和较高的生长量.
余玉雯孙海丹郑易之兰英胥顺唐玉林麻晓亮
关键词：大肠杆菌耐盐基因大豆
双启动子对重组溶源性枯草杆菌中外源蛋白表达的增强作用被引量：9
2006年
探讨了双启动子对基于溶源性噬菌体构建的重组枯草杆菌中外源蛋白表达的影响。分别将不含或含有本身启动子的α-淀粉酶基因(来源于Bacillus amyloliquefaciens)和青霉素酰化酶基因(来源于Bacillus megaterium)克隆到溶源性枯草杆菌中,得到重组菌B.subtilisAMY1,B.subtilisAMY2,B.subtilisPA1以及B.subtilisPA2。由于同源重组,所克隆的片段整合到溶源性枯草杆菌中的噬菌体基因组上,并处于噬菌体强启动子的下游。在重组菌AMY1和PA1中,在热诱导的情况下外源基因的转录只受到噬菌体启动子的作用,而在重组菌AMY2和PA2中,在热诱导下外源基因的转录同时受到噬菌体启动子和基因本身所带启动子的作用。双启动子的应用使重组α-淀粉酶的表达量提高了133%,使重组青霉素酰化酶的表达量提高了113%。
刘刚张燕邢苗
关键词：Α-淀粉酶巨大芽孢杆菌双启动子青霉素酰化酶
血红蛋白基因在产CBHⅡ毕赤酵母工程菌中的表达被引量：2
2007年
目的:提高毕赤酵母工程菌P.pastoris-CBHⅡ液体发酵产纤维二糖水解酶(CBHⅡ)的能力。方法:分别构建了用于胞外及胞内表达透明颤菌血红蛋白(VHb)基因的毕赤酵母重组表达质粒pPICZαA-vhb与pPICZαA(-s)-vhb。通过电转化将两种质粒转化巴氏毕赤酵母重组菌体P.pastoris-CBHⅡ菌株,经过筛选分别获得可正确表达具有生物活性的VHb蛋白的重组菌株P.pastoris-CBHⅡ-vhb(胞内表达VHb)及P.pastoris-CBHⅡ-vhb(-s)(胞外表达VHb)。结果:摇瓶发酵实验表明,血红蛋白在贫氧条件下可促进CBHⅡ的分泌表达,培养液上清的CMC酶活分别从出发菌株P.pastoris-CBHⅡ的1.81U/ml提高到2.04U/ml(胞内表达VHb)与1.93U/ml(胞外表达VHb)。VHb蛋白胞内表达菌株比胞外表达菌株效果更明显。
余河斌余少文汤新张煜邢苗
关键词：纤维二糖水解酶透明颤菌血红蛋白胞内表达分泌表达毕赤酵母
过表达白鳍鲨硒结合蛋白1对HL-7702细胞镉胁迫的解毒作用被引量：1
2014年
硒结合蛋白1(Selenium-binding protein 1,SBP1)与肿瘤相关,并可以与重金属镉直接结合。该研究构建了白鳍鲨SBP1重组质粒Myc-SBP1并转染人HL-7702细胞,利用CCK-8和CFDA SE检测Cd胁迫下的细胞增殖情况,利用流式细胞仪检测细胞内ROS的水平。结果显示,过表达白鳍鲨SBP1可拮抗Cd对HL-7702细胞的毒害作用。在100μmol/L的CdCl2应激下,表达SBP1组存活率为76.4%,约为对照组存活率的2倍,实验组的细胞增殖指数和分裂能力也略高于对照组。一级结构分析表明,白鳍鲨SBP1具有两个CXXC区域,为抗氧化位点,具有2个H×D和3个HXXH保守区域,它们为推测的Cd结合位点,为在HL-7702细胞中表达白鳍鲨SBP1蛋白能拮抗Cd的结构基础。此外,ROS检测实验表明白鳍鲨SBP1蛋白能显著降低胞内ROS水平,提示硒结合蛋白除通过直接与Cd结合降低毒性外,降低重金属引起的氧化胁迫也可能发挥一定解毒作用。
王勇何曼文孙艳梅刘琼
关键词：CD胁迫
串联飞行时间质谱中亚胺离子的断裂特征及其在肽段鉴定中的作用被引量：2
2014年
基质辅助激光解吸电离-串联飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF)产生的亚胺离子可以提供丰富的肽段组成信息,该方法通常用于基于数据库搜索的蛋白质鉴定,或者结合化学衍生法用于从头测序,因而在一定程度上限制了对亚胺离子的认识及应用。本研究利用239个串联质谱探索MALDI-TOF/TOF中亚胺离子的断裂特征以及它们在肽段鉴定中的应用,发现在高能碰撞诱导解离条件下组氨酸等14种氨基酸可产生较强的亚胺离子信号(>50%阳性率),氨基酸的化学结构、位置效应和氨基酸残基个数是影响碎片离子强度的主要因素。此外,探讨了亚胺离子应用过程中的假阳性问题,提出亚胺离子相对强度的比较可以降低假阳性和提高肽段鉴定确定度,有助于完善目前的数据库搜索算法和辅助从头测序分析。
王勇李水明何曼文
关键词：蛋白质鉴定
全选 清除 导出
共11页<12345678910>
聚类工具0