汕头大学医学院分析细胞学实验室
- 作品数：59 被引量：82H指数：6
- 相关作者：黄晋荣郑桂娜杨辉廖伟棠王远萍更多>>
- 相关机构：包头医学院生物医学研究中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程理学生物学更多>>
- 弱精症患者低活力精子中HES1的表达及调控
- 2010年
- 目的分析HES1在弱精症患者低活力精子中的表达及调控。方法收集30份弱精症患者精液标本和20份成年健康有生育能力男性的精液标本,提取精子RNA,制备生物素标记的cDNA探针,与含有30 968个探针的Phal-anx OneArrayTM芯片杂交,分析男性精子中HES1基因的表达情况;再用RT-PCR,分析hsa-miR-487a和hsa-miR-193b在精子中的表达,从精子mRNA表达谱中搜索hsa-miR-487a和hsa-miR-193b靶基因的表达。结果HES1在低活力精子中的表达上调,高于在高活力精子中的表达。hsa-miR-487a和hsa-miR-193b在低活力精子中的表达量分别是高活力精子的0.43倍和2.19倍。结论HES1在低活力精子中的表达上调,可能通过hsa-miR-487a和hsa-miR-193b的调节来影响精子的活力。
- 李燕闻柳陈德宇
- 关键词：弱精症精子HES1
- 人DNMT3B1原核表达载体的构建和表达被引量：1
- 2011年
- 目的构建人DNMT3B1原核表达载体,并进行初步表达。方法据Genebank中人DNMT 3B1 cDNA序列设计并合成特异性引物,提取HCT116细胞总RNA,利用PCR技术扩增出DNMT 3B1,并将扩增产物克隆到原核表达载体PGEX-4T.3中,并对重组质粒进行鉴定。转化E.coli BL21,IPTG诱导表达目的蛋白。结果 PCR扩增得到人DNMT 3B1的cDNA片段大小为2.6 kb,重组子利用限制性内切酶进行酶切、PCR鉴定和DNA序列分析得到原核表达载体PGEX-DNMT3B1I,PTG诱导表达后,SDS-PAGE分析表明目的蛋白在E.coli BL21(DE3)中高效表达,相对分子质量约为100 kd。结论成功构建了人DNMT3B1原核表达载体并完成其在E.coli BL21(DE3)中的诱导表达,为进一步在体外研究DNMT3B异构体提供了条件。
- 姜树原张颜波邹绮罗天娇张胜周立社邵国
- 无序电子垃圾拆解污染对人群健康的影响
- 电子垃圾(e-waste)也称电子废物，已成为增长最快、对环境污染最严重的垃圾。电子垃圾在不科学的回收处理过程中会产生严重的污染。广东汕头贵屿镇被称为“世界电子垃圾终点站”、“全球最毒之地”、“电子废物切尔诺贝利”。环境...
- 霍霞徐锡金李燕吴库生
- 文献传递
- 低氧预适应对小鼠海马组织细胞红蛋白表达的影响
- 2010年
- 目的探讨细胞红蛋白在低氧预适应小鼠海马中的作用。方法复制急性重复低氧模型,利用Real-time PCR法检测小鼠海马组织细胞红蛋白的变化。结果低实验组小鼠海马组织细胞红蛋白mRNA的表达虽然高于未经低氧的对照组但未达到统计学意义,低氧预适应组小鼠海马组织细胞红蛋白mRNA的表达显著高于对照组。结论小鼠急性重复缺氧后脑海马神经元细胞红蛋白mRNA表达增强,推测细胞红蛋白可能参与低氧预适应形成和脑保护。
- 黄丽华姜树原张胜邵国
- 关键词：低氧预适应海马
- 气相色谱-质谱联用法测定人体血清中的全氟辛酸被引量：1
- 2010年
- 目的建立血清中全氟辛酸（PFOA）的气相色谱-负离子化学源-质谱联用分析方法。方法采用固相萃取法萃取人体血清中的PFOA,以全氟癸酸（PFDA）为内标物,萃取液及内标物与乙酰化试剂酯化反应后,采用气相色谱-负化学离子源-质谱法测定血清中全氟辛酸的含量,用内标法进行定量。应用建立的方法对来自电子垃圾拆解区汕头贵屿镇84例及作为对照的汕头潮南区57例的产妇血清样品进行了实际检测。结果方法的线性范围为1.0~1.0×105μg/L,线性相关系数r=0.998 267。平均回收率为91.9%~98.1%,相对标准偏差（RSD）为1.57%~5.17%,血清中全氟辛酸的检出限为0.2μg/L。应用此方法对来自电子垃圾拆解区的母体血清进行了PFOA检测,结果显示其中位浓度为1.70μg/L,高于对照组（0.87μg/L）（P〈0.01）。结论用气相色谱-质谱联用内标法结合衍生化技术定量分析血清中PFOA的浓度灵敏度高,分析速度快,适于血清PFOA含量的测定。
- 吴库生徐锡金刘俊晓郭勇勇李燕黄晋荣郑桂娜霍霞
- 关键词：碎片质谱法全氟辛酸血清
- BLU基因慢病毒表达载体的构建被引量：1
- 2008年
- 目的:构建BLU基因慢病毒表达载体。方法:采用PCR技术从人脐带来源的间充质干细胞中扩增出BLU基因,将其接入慢病毒载体(pSL6-IRES-EGFP)中,经菌落PCR、酶切和测序鉴定,然后转染293T细胞观察表达情况。结果:PCR、酶切和测序鉴定克隆了重组子(pSL6-BLU-IRES-EGFP),并在293T细胞中成功表达BLU基因。结论:成功地克隆了含有BLU基因的慢病毒表达载体。
- 陈刚建张宝李燕朴仲贤陈松建刘俊晓黄晋荣郑桂娜郭勇勇霍霞
- 关键词：慢病毒载体
- 周围神经损伤后脊髓神经元退变与组织型纤溶酶原激活物及其抑制物表达的关系研究
- 2011年
- 目的：探讨周围神经损伤后脊髓神经元退变与组织型纤溶酶原激活物（tPA）及其抑制物1（PAI-1）、神经丝氨酸蛋白酶抑制剂（NSP）表达的关系。方法：雄性SD大鼠（56只）随机分为实验组（50只）和对照组（6只。无手术）。实验组行坐骨神经离断术（SCNT）,于术后1、4、7、14和21 d取伤侧脊髓L4~6节段,观察前角神经元形态学改变及tPA、PAI-1和NSP表达。结果：与对照组比,实验组L4~6tPA、NSP表达增加,NSP在1 d内达峰值后逐渐下调,tPA水平则在7 d升达最高峰,此时前角外侧核神经元存活率开始减少（P〈0.01）。术后21 d,tPA仍未恢复正常水平（P〈0.05）,脊髓前角运动神经元存活率61.6%。两组脊髓均未测到PAI-1表达。结论：SCNT后L4~6前角神经元退变,可能与损伤刺激脊髓灰质内神经元和小胶质细胞合成、释放tPA增加有关,同时,损伤也促使tPA抑制物NSP表达上调,后者可能发挥神经保护作用。
- 彭琳黄裔腾庄珊珊方裕森霍霞徐锡金
- 关键词：周围神经坐骨神经脊髓神经元退变组织型纤溶酶原激活物
- 气相色谱-质谱联用法检测新生儿脐带血多环芳烃被引量：3
- 2010年
- 目的:建立新生儿脐带血中16种多环芳烃(PAHs)的分析方法。方法:脐带血经NaOH-乙醇水溶液皂化后,用正己烷萃取;萃取的有机相经SPE柱净化后,用气相色谱-电子电离源-质谱联用仪,选用离子检测法和外标法进行定性和定量。结果:加标回收率73.0%～112.0%;样品回收率81.6%;方法检出限0.03～0.11ng。结论:该方法检测电子垃圾拆解区新生儿脐带血中16种PAHs,灵敏度高、重现性好、回收率良好。
- 郭勇勇霍霞吴库生陈爱明彭琳班皓刘俊晓徐锡金
- 关键词：多环芳烃气相色谱-质谱
- 电子垃圾拆解区重金属铅、镉暴露儿童DNA氧化损伤修复基因hOGG1表达水平的研究
- 背景:重金属铅、镉是常见的环境污染物,长期接触铅、镉可诱发人体肝、肾、神经及骨骼等多器官损伤,甚至具有致癌、致突变的作用。许多研究表明,DNA氧化损伤在重金属毒性机制中发挥着重要作用。广东贵屿镇是世界电子垃圾拆解区之一,...
- 廖伟棠刘伟纪旻辉徐锡金霍霞
- 文献传递
- 电子垃圾拆解区铅暴露对学龄前儿童外周血CD4^+T细胞的影响
- 2013年
- 目的:探讨环境中铅暴露对学龄前儿童CD4+T细胞的影响。方法:石墨炉原子吸收分光光度计检测贵屿镇学龄前儿童(63名,暴露组)以及濠江区学龄前儿童(48名,对照组)外周血中铅浓度;CD4+T分离纯化;CD4+T中mRNA的提取;mRNA逆转录成cDNA;RT-PCR分析两组CD3-DELTA基因(A亚型)相对表达量的差异;以及相关影响因素的问卷调查。结果:暴露组血铅(中位数6.0μg/dL),CD4+T CD3-DELTA基因相对表达量(中位数2.7492)均高于对照组(5.2μg/dL,1.1305,P<0.05);多因素逐步回归分析显示,同一居住环境是否有父亲或其他家庭成员吸烟及母亲从事的工作是否与电子垃圾回收相关是暴露组血铅的主要影响因素;偏相关分析显示,对照组中血铅水平与CD4+T中CD3-DELTA基因相对表达量负相关(rs=-0.288,P<0.05);结论:高血铅暴露可能引起CD4+T中CD3-DELTA基因相对表达量变化,从而影响学龄前儿童CD4+T TCR表达量的变化。
- 王旭徐锡金熊映美霍霞
- 关键词：铅暴露学龄前儿童外周血
