中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所病毒基因工程国家重点实验室 作品数:336 被引量:2,965 H指数:26 相关作者: 郭元吉 王力华 董小岩 马骊 赵蓉 更多>> 相关机构: 军事医学科学院微生物流行病研究所 复旦大学生命科学学院 中国人民解放军第一军医大学分子免疫学研究所 更多>> 发文基金: 国家高技术研究发展计划 国家重点基础研究发展计划 艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
吉林省2009年致手足口病流行的肠道病毒71型分离株基因特征分析 被引量:11 2011年 目的分析引起吉林省2009年手足口病(Hand Food and Mouth Disease,HFMD)流行的肠道病毒71型(Enterovirus Type 71,EV71)分离株的基因特征。方法选择15株2009年分离于吉林省六个设区的市(州)的HFMD病例的EV71分离株,进行VP1编码区基因全长逆转录-聚合酶链反应扩增、序列测定,使用Bioedit软件和MEGA4.0软件进行同源性、基因亲缘关系分析。结果吉林省2009年的15株EV71分离株均属于C4基因亚型,而且分属于四个相对独立的传播链,其中11株病毒(分离于六个市)属于一个较大的传播链,其余4株形成三个小的传播链。29.5%的吉林省分离株间比对同源性高达99.1%~99.8%,吉林省2009年分离株与安徽省阜阳市2008年以及北京市2008年的流行株间,核苷酸最高同源性分别达到了99.8%和99.7%。结论吉林省2009年至少有四个C4基因型的EV71传播链引起了HFMD的流行,并且有一个EV71优势传播链在几个省以及省内六个市持续传播,引起HFMD的流行;三个小的传播链可能为输入病毒所致。尚未发现在引起HFMD死亡、重症以及轻症的EV71分离株VP1编码区的氨基酸序列呈现规律性的区别。 侯祥 周剑惠 常新 王爽 陈超 刘桂艳 齐中 吴丹 安小娜 浦苗 张勇关键词:手足口病 肠道病毒71型 基因特征 VP1编码区 RCA技术的应用及研究进展 被引量:4 2006年 李启明 马学军关键词:单核苷酸多态性 单链DNA 自我复制 感染细菌 放大系统 狂犬病毒中和抗体检测快速荧光灶抑制试验的建立 被引量:10 2010年 目的建立检测狂犬病毒中和抗体的快速荧光灶抑制试验(RFFIT),检测狂犬病毒中和抗体滴度。方法以狂犬病标准毒株CVS-11为标准攻击毒,制备三代病毒,建立CVS—11病毒库;以国际标准抗狂犬病毒血清为对照血清,参考法国巴斯德研究所的RFFIT操作标准,建立适应于中国狂犬病毒中和抗体检测的RFFIT方法,并验证该方法的特异性、稳定性和重复性。结果成功建立了检测狂犬病毒中和抗体的RFFIT试验,验证该试验方法的特异性为100%;重复性试验表明,在本实验室和不同实验室的检测结果P值均〉0.5,具有很好的重复性。结论RFFIT方法的建立进一步完善了中国狂犬病的实验室检测技术,也将提升中国狂犬病的整体监测能力。 于鹏程 吕新军 申辛欣 曹蕾 郑新雄 单虎 唐青关键词:狂犬病毒 中和抗体 滴度 山西省2006年4例聚集性高危急性弛缓性麻痹病例分析 被引量:2 2010年 目的对山西省2006年报告的4例聚集性高危急性弛缓性麻痹(Acute Flaccid Paralysis,AFP)病例进行流行病学分析,并对采集的粪便标本中分离到的4株Ⅲ型脊髓灰质炎(脊灰)病毒(Poliovirus,PV)进行VP1编码区基因特征分析,以判断这起事件的性质。方法按照世界卫生组织《脊灰实验室手册》进行病毒分离与血清学定型,用逆转录-聚合酶链反应扩增VP1编码区基因片段,并进行核苷酸序列测定和分析,构建基因亲缘关系树。结果4例高危AFP病例中的3例为疑似疫苗相关麻痹型脊灰(Vaccine Associated Paralysis Poliomyelitis,VAPP),在发病时间上接近。4株Ⅲ型PV与疫苗参考株BJOPVⅢ相比,VP1编码区核苷酸同源性分别为99.7%、99.9%、99.4%、99.9%,均鉴定为疫苗相关株。基于VP1编码区核苷酸序列建立的进化树表明,4株PV之间无相关性,从3例VAPP中分离到的3株Ⅲ型PV在VP1编码区共享第2637位胞嘧啶核苷酸(C)→尿嘧啶核苷酸(U)突变位点,该位点变异导致氨基酸由缬氨酸(Val)突变为丙氨酸(Ala)。结论加强聚集性高危AFP病例和VAPP的实验室监测,早期发现PV循环并及时阻断。 严冬梅 张勇 王东艳 安洪秋 祝双利 李爱英 杨建芳 温宁 李黎 许文波关键词:脊髓灰质炎病毒 VP1编码区 携带人血管抑制因子K1-5基因的腺相关病毒载体的构建及其对血管内皮细胞的抑制作用 被引量:1 2005年 目的构建含人血管抑制因子K15基因的重组腺相关病毒载体rAAVK5,研究其在体外表达及对血管内皮细胞的抑制作用。方法将K15基因插入通用型AAV载体质粒pSNAV中,构建重组质粒pSNAVK5。用pSNAVK5转染BHK21细胞,经G418选择培养基培养载体细胞株BHKK5。用辅助病毒感染BHKK5细胞包装出重组病毒rAAVK5。研究rAAVK5感染BHK细胞获得的培养上清对血管内皮细胞的抑制作用。结果已获得了重组病毒rAAVK5,滴度达0.5×1012v.g.ml。免疫斑点印迹实验表明,rAAVK5可介导人血管抑制因子K15的体外表达,表达产物对血管内皮细胞增殖具有抑制作用。结论重组病毒rAAVK5在体外对血管内皮细胞的增殖具有抑制作用。为进一步用rAAV病毒载体进行抗血管生成基因治疗的动物实验及临床应用打下了基础。 高雪军 伍志坚 封多佳 吴小兵 侯云德关键词:血管内皮细胞 腺相关病毒载体 BHK-21细胞 选择培养基 BHK细胞 基因插入 中药心康口服液抗柯萨奇B3病毒RNA复制作用的研究 2007年 目的研究探讨中药心康口服液对感染心肌中柯萨奇B3病毒RNA复制的影响。方法小鼠感染柯萨奇病毒B3(CVB3)诱发急性病毒性心肌炎,于急性期治疗后提取鼠心肌总RNA,用逆转录-聚合酶链反应技术检测心肌CVB3RNA含量,经琼脂糖凝胶电泳后,在凝胶成像系统下观察。结果中药心康口服液能明显降低心肌CVB3-RNA的含量,与病毒对照组比较差异有统计学意义,P〈0.01;感染期不同阶段心肌病毒RNA含量的检测显示,心康口服液2个治疗组的病毒含量的检出,并没有随着用药时间的延长而显著降低。结论中药心康口服液能有效地影响心肌CVB3RNA的复制,其对病毒的作用是抑制复制而非杀灭。 万素君 杨帆 黄霞珍关键词:心康口服液 柯萨奇病毒B3 逆转录-聚合酶链反应 心肌炎 环境水体中GⅡ型诺如病毒浓缩研究 被引量:8 2011年 自行设计一种适合野外现场采样的病毒采集浓缩仪,采用一种新型阳离子膜NanoCeram,进行环境水体中GⅡ型诺如病毒浓缩研究。通过预实验,考察了预处理膜、不同的二次浓缩方法、不同洗脱液对病毒回收率的影响,随后优化整个浓缩过程并确定最佳的病毒浓缩方法。结果显示,预处理膜对病毒回收影响较大,PEG-NaCl沉淀、硅藻土吸附这两种二次浓缩方法的效果相当,选择0.15mol/L Na2HPO4作为硅藻土洗脱液。确定了NanoCeram阳离子膜的病毒回收率为3.02%。最后对北京市丰台区洋桥生活污水进行现场采样,成功检测到GⅡ型诺如病毒,证明该方法有效可行,适合于环境水体中诺如病毒的浓缩分离和检测。 梁莎 谢广成 徐子乾 李金松 李丹彤 封少龙 段招军联合固氮施氏假单胞菌A1501功能基因组学研究 @@固氮施氏假单胞菌A1501基因组是一个长度为4.56 Mb的环状染色体,没有发现质粒。在该菌基因组编码的4146个基因中,大约aooo个基因可以在其他5株己完成基因组测定的假单胞菌中找到同源基因。基因组分析鉴定了一个... 燕永亮 杨剑 王瑞 韩云蕾 平淑珍 王忆平 金奇 Claudine Elmerich 林敏关键词:功能基因组学 文献传递 基于颜色判定的环介导等温扩增技术检测HPV6和HPV16 被引量:9 2011年 建立了一种基于颜色判定的简单、快速和灵敏的检测方法,即环介导等温核酸扩增技术(LAMP)应用于HPV6和HPV16亚型的检测。该技术设计分别对应于HPV6和16的E6和E7基因序列中6个区段的4条特异引物,在等温条件下(63℃)进行核酸扩增反应1h,在扩增前加入HNB染料(羟基萘酚蓝)作为反应指示剂,以HNB染料颜色的变化做为结果判定的标准,并经LA-320实时浊度仪和琼脂糖电泳证实。文中利用这种技术对13份已知的单重感染13种HPV不同亚型的临床样本进行了特异性分析,同时对2个含目的片段的克隆质粒的系列稀释物进行了灵敏度分析。结果显示LAMP方法特异性高,颜色法判断的灵敏度均为1000个拷贝DNA分子水平,比Real-time PCR低10~20倍,对62份宫颈刮片临床标本的HPV6和HPV16检出率和HPV分型试剂盒一致。因此,基于颜色判定的环介导等温扩增方法有望应用于人乳头瘤病毒HPV6和HPV16感染的快速筛选,具有在基层疾病预防控制中心和医院推广和应用的潜力。 芦春斌 罗乐 杨梦婕 聂凯 王淼 马学军乌鲁木齐地区63例成人麻疹住院病例分析 2009年 目的分析乌鲁木齐地区63例成人麻疹住院病例的临床、实验室及人群分布特点,为控制成人麻疹提供依据。方法运用描述流行病学,采用Excel方法,对2007年10月~2008年3月,新疆维吾尔自治区人民医院收住的乌鲁木齐地区63例成人麻疹住院病例的临床资料进行分析。结果63例麻疹病例的平均年龄(25.5±0.05)岁,均有发热,体温以39.1~40.0℃为多;61例(96.8%)有皮疹,54例(85.7%)入院时有口腔麻疹黏膜斑;26例(41.3%)并发急性气管-支气管炎,28例(44.4%)胸片显示肺部有炎性阴影。在血常规检测中,11例(17.5%)白细胞计数和中性粒细胞比例明显升高,18例(28.6%)丙氨酸氨基转移酶升高。全部患者经治疗后痊愈出院。结论成人麻疹病例临床症状有重有轻,并发症常见。是否应对高危人群的成人进行免疫,值得探讨和关注。 米吉提·买买提 孙荷 张燕 许文波关键词:成人麻疹