温州医科大学检验医学院、生命科学学院
- 作品数：145 被引量：332H指数：9
- 相关作者：刘丹慧肖红利阳娅玲何哲耘姚小艳更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所宁波大学海洋学院浙江大学医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金温州市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- 脂肪组织RAP1B敲除缓解寒冷条件下肥胖小鼠的脂肪积累
- 2024年
- 该研究旨在探讨RAP1B在脂肪组织细胞代谢功能调节中的作用机制。围绕高脂饮食喂养和冷刺激处理的脂肪组织特异性Rap1b敲除小鼠,结合RAP1B敲低的3T3-L1细胞模型,系统分析RAP1B对白色脂肪组织线粒体功能的影响。通过对比脂肪组织特异性敲除Rap1b小鼠与对照组小鼠在脂肪组织中的体质量、脂肪组织含量、脂质代谢相关指标和体温调节能力,评估RAP1B在脂肪组织代谢中的作用,结果表明,RAP1B缺失的小鼠在HFD喂养下夜间体温显著升高,脂肪含量下降。3T3-L1细胞实验结果显示,RAP1B敲低不影响脂肪细胞分化和脂质积累,但显著提高了线粒体的呼吸功能和ATP产量。进一步研究发现,RAP1B缺失显著提高了小鼠脂肪组织和3T3-L1细胞的线粒体复合体含量,脂肪组织蛋白组学结果显示氧化磷酸化和产热途径富集。这些结果表明,RAP1B缺失后可能通过增强线粒体功能改善脂肪组织的代谢能力,进而影响体温调节和脂质储存。该研究揭示了RAP1B在脂肪组织线粒体功能调节中的关键作用,并提出RAP1B缺失后可能通过增强线粒体功能和改变脂质代谢状态影响肥胖的发展。
- 傅寅旭朱辉王鑫波胡萍乙方毓周怀彬吕建新
- 关键词：肥胖线粒体功能脂肪组织能量代谢代谢性疾病
- 羽扇豆醇通过抑制RhoA-ROCK1信号通路抑制结肠癌细胞增殖被引量：15
- 2020年
- 该文探讨了羽扇豆醇(Lupeol)对人结肠癌HCT116和SW620细胞增殖的影响及相关作用机制。使用不同浓度的Lupeol处理HCT116和SW620细胞后,用MTT法检测细胞活性,CCK8法检测细胞增殖能力,平板克隆实验检测细胞克隆形成能力,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡,(quantitative real-time PCR,qPCR)和Western blot检测相应mRNA和蛋白表达水平,免疫荧光检测β-Catenin蛋白细胞内分布情况。通过构建shRNA敲低两种结肠癌细胞中RhoA,进一步研究Lupeol影响细胞增殖的分子机制。结果显示,Lupeol处理后,HCT116和SW620细胞增殖能力明显下降,克隆形成能力受到抑制,细胞周期阻滞于G0/G1期,细胞内RhoA、ROCK1、β-Catenin、Cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平均显著下降,β-Catenin蛋白胞质和胞膜上分布减少。敲低RhoA后抑制了细胞增殖,同时使得RhoA-ROCK1-β-Catenin信号通路蛋白受到抑制,β-Catenin蛋白胞质和胞膜上分布减少。综上所述,Lupeol可通过抑制RhoA-ROCK1信号通路,抑制β-Catenin蛋白表达,进而抑制HCT116和SW620细胞增殖,Lupeol有望成为临床结肠癌治疗的新药物。
- 蒋亦雯洪丹楼哲丰金龙金
- 关键词：羽扇豆醇结肠癌增殖
- 2例类孟买血型的鉴定及基因突变分析被引量：3
- 2016年
- 目的探讨类孟买表型形成的分子机制和输血策略。方法采用常规血型血清学方法对ABO正反定型不一致的患者进行ABO、H血型检测,采用PCR扩增技术检测ɑ-1,2-岩藻糖基转移酶（α-1,2-fucosyl transfer,FUT1）基因并测序。结果 2例均为类孟买血型Bbm。例1 FUT1基因测序显示为第547~552del AG碱基缺失,即CAGAGAG突变为CAGAG;其2个儿子血型为B型、H表型正常。例2 FUT1基因测序显示547~552del AG和814A〉G复合突变,母亲的FUT1基因为814A/G和547~552del AG杂合,复合突变遗传于母亲。结论 2例FUT1基因纯合和杂合突变致类孟买表型形成。
- 刘秋菊田海英吴爱雪林飞飞陈凤夏林甲进
- 关键词：类孟买血型基因突变输血策略
- 表达呼吸道合胞病毒G蛋白胞外区的重组H1N1流感病毒单剂滴鼻免疫可在小鼠诱导强免疫应答与保护
- 2024年
- 目的基于重组流感病毒载体的呼吸道合胞病毒(RSV)疫苗的构建及在小鼠体内的免疫保护效果评价。方法构建并拯救表达RSV A2型G蛋白胞外结构域(Gecto)的重组甲型流感病毒,将其命名为PR8NAGecto/WSN。体外验证重组病毒G蛋白表达与病毒生长动力学后,单剂滴鼻免疫BALB/c小鼠,并评价体液免疫、黏膜免疫与细胞免疫。免疫4周后,分别用RSV A2与RSV B9320进行攻毒,通过小鼠体重变化、肺组织病毒滴度及病理评价免疫保护效果。结果单剂滴鼻免疫PR8NAGecto/WSN能在小鼠体内产生较强的体液免疫、黏膜免疫及细胞免疫。与对照组比较,免疫组小鼠经RSV A2或B9320两个亚型病毒攻毒后肺病毒载量与肺组织病理均明显改善。结论单剂滴鼻免疫重组PR8NAGecto/WSN疫苗可在小鼠体内诱导较强的RSV特异免疫应答与攻毒保护。本研究为新型RSV黏膜疫苗的研发提供新的思路与实验资料。
- 韩瑞雯王东红王瑭琪程雪婷邴佳洛翟程程孙树才邓瑶黄保英谭文杰
- 关键词：呼吸道合胞病毒流感病毒病毒载体G蛋白
- 原位培养羊水细胞的染色体核型分析
- 目的 :探讨不同产前诊断指征孕妇胎儿异常染色体核型发生率和原位培养羊水细胞染色体嵌合体发生率及相关临床意义。方法:在超声引导下对14455例具有产前诊断指征的孕妇实施羊膜穿刺抽取羊水进行染色体核型分析,对异常染色体核型进...
- 林小玲郑昭科徐雪琴钱昌瑞
- 关键词：羊水细胞产前诊断指征异常染色体核型染色体核型分析染色体嵌合体
- 铜对线粒体中铁硫蛋白功能的毒性机制研究被引量：2
- 2016年
- 该文探讨了铜对线粒体内铁硫蛋白的毒性机理。通过包装慢病毒将Hep G2细胞中铜转运蛋白ATP7B(ATPase copper transporting beta)基因敲低,并用铜离子处理构建高铜细胞模型。通过免疫印迹、胶内酶活、紫外–可见光分光光度法检测细胞线粒体内铁硫蛋白、非铁硫蛋白及铁硫簇组装蛋白量和活性的改变;用电镜观察高铜模型中线粒体的形态改变;用海马能量代谢分析仪检测铜离子对细胞能量代谢的影响。结果发现,高铜细胞模型线粒体内铁硫簇组装蛋白ISCA2(ironsulfur cluster assembly 2)及ISCU(iron-sulfur cluster assembly enzyme)水平下降,抑制了铁硫簇的组装,并进一步影响了线粒体内[2Fe-2S]型及[4Fe-4S]型铁硫蛋白功能,但并不影响非铁硫蛋白。高铜状态也影响了呼吸链复合体活性及线粒体能量代谢,并导致线粒体形态发生改变。这些结果表明,异常累积的铜离子也会通过抑制线粒体中铁硫簇的组装,影响线粒体内铁硫蛋白的功能。
- 李艳纯杜璟刘若兰任雪营林楚贤李江辉谭国强吕建新
- 关键词：铁硫簇铁硫蛋白能量代谢
- 龙血竭单独和联合左氧氟沙星对分离自伤口感染的铜绿假单胞菌的抗菌活性研究
- 目的 :了解龙血竭对分离自伤口感染的铜绿假单胞菌的体外抗菌活性,并评价其与左氧氟沙星联合使用的效果,为临床合理使用龙血竭抗感染治疗提供依据。方法 :收集2017年温州医科大学附属第一医院分离自伤口标本的铜绿假单胞菌26株...
- 郑相阔田学斌方人驰陈栎江张思琴陈涛曾未良周铁丽
- 关键词：龙血竭伤口感染铜绿假单胞菌左氧氟沙星
- 一个X连锁智力障碍家系的全外显子测序分析被引量：4
- 2018年
- 目的对一个非特异性智力低下患者家系进行临床表征及基因突变分析，为该家系遗传咨询提供依据。方法运用多重探针扩增技术（multiplex ligation—dependent probe amplification，MLPA）对先证者进行脆性x综合征筛查。在该家系中通过全外显子测序（whole exome sequencing，WES）分析以及Sanger测序验证，最终对该家系进行遗传学咨询。结果MLPA方法学排除先证者脆性X综合征。全外显子测序结果以及OMIM数据库分析结合先证者临床表型，推断ARX基因第1外显子c．88G〉T位点突变为该患者非特异型智力障碍致病基因。Sanger测序结果显示先证者母亲为ARXC．88G〉T突变的携带者，其姐姐及父亲均无此突变，两位舅舅为该位点半合子突变。结论应用全外显子测序技术对X连锁非特异型智力低下家系进行诊断，明确了该家系的基因致病位点，有助于该家系的遗传咨询。
- 唐少华贾曼莉陈冲李焕铮胡林栾兆棠徐雪琴吕建新
- 关键词：错义突变
- 体外模拟SAH状况下IL-6对大鼠蛛网膜细胞极化状态的影响被引量：2
- 2018年
- 目的初步研究蛛网膜下腔出血(SAH)状况下IL-6对大鼠蛛网膜细胞极化状态的影响。方法细胞免疫化学法(ICC)鉴定培养的大鼠蛛网膜细胞对CK8+18、Vimentin和CD68的表达;采用体外培养的大鼠蛛网膜细胞,经极化诱导剂粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)分别刺激后,采用ELISA法检测极化相关因子IL-12、IL-6和IL-10的变化,观察其是否发生极化;然后用凝血酶作为激活剂活化蛛网膜细胞在体外模拟SAH状况,再采用IL-6刺激活化的蛛网膜细胞和正常(非活化)蛛网膜细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法观察CD68、CK8+18、IL-12和IL-23、精氨酸酶-I(Arg-I)的RNA(相对)表达水平。结果 (1)培养细胞的蛛网膜细胞标志CK18+18和Vimentin、巨噬细胞标志CD68表达阳性。(2)GM-CSF可诱导蛛网膜细胞IL-6和IL-12p40表达增高,而M-CSF未能诱导IL-10表达变化。(3)凝血酶可诱导蛛网膜细胞发生高Arg-I的M2极化。(4)IL-6刺激剂量大则CD68表达早持续时间短的时间模式。(5)IL-6刺激剂量与蛛网膜细胞极化的时间模式明显不同,实验组1、3、7、14d时IL-23表达均增高,对照组IL-23、IL-12p40和Arg-I在刺激14d才增高。结论培养的蛛网膜细胞具有单核巨噬细胞的特性;蛛网膜细胞仅能被极化诱导剂诱导M1极化,未发生M2极化,与外周明显不同;在模拟SAH状况下蛛网膜细胞呈持续的M1型极化,低IL-10的M2型极化状态,显示其极化能力不良,这将不利于蛛网膜下腔中溶血产物的清除和相关SAH后并发症的发生、发展;SAH状况下蛛网膜细胞经IL-6刺激后发生M1/M2极化,其时间和表现模式多样,为IL-6作为"预测SAH预后的标志因子"提供了新证据。
- 陈功陈祥朱丹丹王自谱张小洁信照亮
- 关键词：蛛网膜下腔出血细胞极化IL-6
- 具核梭杆菌通过调节肠道代谢产物丁酸钠上调Cdk1促进结直肠癌发展被引量：4
- 2021年
- 该文探讨了肠道微生物具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum,Fn)通过调节代谢产物丁酸钠(NaB)对结直肠癌(CRC)发生发展的影响及其分子机制。提取临床组织RNA和蛋白,RT-qPCR和Western blot检测肿瘤组织与正常/癌旁组织Cdk1的mRNA及蛋白表达,同时检测具核梭杆菌的mRNA的相对水平,并分析其与Cdk1的相关性。具核梭杆菌处理结直肠癌细胞24 h后检测周期相关蛋白Cdk1和P21的表达水平,核磁共振检测培养基上清差异代谢物。不同浓度差异代谢物NaB处理结直肠癌细胞DLD-1、SW480、HCT116,使用MTT和克隆形成实验检测DLD-1、SW480、HCT116增殖能力。流式细胞术检测NaB对结直肠癌细胞SW480周期阻滞位点,Western blot检测周期相关蛋白Cdk1、P21、C-myc的表达水平。流式细胞术检测NaB处理后结直肠癌细胞SW480凋亡率变化情况,Western blot检测凋亡相关蛋白Cleaved-Casepase3、Cleaved-PARP、Bcl-2的表达水平。采用MTT实验检测不同MOI具核梭杆菌作用结直肠癌细胞4、8、24 h后对其增殖能力的影响。将结直肠癌细胞与具核梭杆菌共培养24 h,Western blot检测相关蛋白Cdk1、c-myc、Cleaved-Caspase3的表达情况。结果显示,在肿瘤组织中Cdk1蛋白水平和mRNA水平均明显高于正常/癌旁组织(P<0.05),并且Cdk1与具核梭杆菌mRNA表达水平存在一定相关性。具核梭杆菌处理结直肠癌细胞DLD-1和HCT116后,Western blot结果显示Cdk1和P21蛋白水平上升。核磁共振结果表明,菌处理组代谢模式与未处理组存在明显差异,主要代谢物NaB相对含量明显低于未处理组(P<0.01)。使用1 mmol/L NaB处理结直肠癌细胞系DLD-1、SW480、HCT11624 h后,细胞生存率分别为(89.18±1.92)%、(85.07±0.61)%、(83.59±2.18)%,且随着药物浓度升高,药物对细胞活性的抑制率逐步上升。同时,经1 mmol/L NaB处理后,DLD-1、HCT116和SW480细胞的克隆形成率相比于对照分别下降了(20.07±4.85)%、(36.47±5.31)%、(31.13±5.22)%。�
- 方晓婷吴依依余婷婷忻诗君娄利琴李晨高洪昌周燕楼永良李祥
- 关键词：具核梭杆菌结直肠癌CDK1
