中国农业科学院哈尔滨兽医研究所国家牛传染性胸膜肺炎参考实验室
- 作品数：21 被引量：27H指数：4
- 相关作者：王砚范更多>>
- 相关机构：吉林农业大学动物科学技术学院东北农业大学动物医学学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项中国农业科学院哈尔滨兽医研究所所长基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 丝状支原体丝状亚种SC型脂蛋白Q的N末端定点突变及表达载体的构建
- 2006年
- 根据已发表的丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)LppQ基因序列设计引物,从MmmSC HVRI X株中扩增出了LppQ N末端基因,并将其分别克隆到pUC18和pUC19上,利用一步重叠延伸PCR突变方法将其66位的TGA突变为TGG,经克隆与序列测定证实突变成功后,将已突变的LppQ N末端基因插入原核表达载体pET32a的多克隆位点,成功地构建了LppQ N末端基因原核表达载体pET32a-LppQ,为其下一步体外表达奠定了基础。
- 高玉龙辛九庆李媛王砚范
- 关键词：牛传染性胸膜肺炎脂蛋白定点突变
- 猪肺炎霉形体热休克蛋白Hsp70单克隆抗体的制备及鉴定被引量：6
- 2008年
- 以肺炎霉体体(Mhp)Yin-1株为模板,利用所合成的引物扩增了伴侣蛋白DnaK(热休克蛋白Hsp70)C末端基因,将得到的目的片段分别克隆至表达载体pET-28a和pGEX-6P-1中,原核表达获得了重组蛋白6P-1-DnakC和28a-DnakC,经Western-blot分析,均能被Mhp抗血清识别。以28a-DnakC作为包被抗原,建立了间接ELISA检测方法,以6P-1-DnakC为免疫抗原,免疫BALB/c小鼠。筛选和鉴定了2株分泌抗DnaK的杂交瘤细胞株,命名为1AD10、2AF11。Western-blotting结果表明,这2株单抗与Mhp发生特异性反应而不与其他相关霉形体发生反应。抗体亚类鉴定结果显示,1AD10、2AF11分别为IgG2b和IgG2a亚类,且轻链均为κ链。相加ELISA试验表明,2株单抗能识别不同的抗原表位。
- 乔祖健王亮李媛陈超辛九庆李继昌
- 关键词：猪肺炎霉形体热休克蛋白70单克隆抗体
- 丝状支原体丝状亚种SC型中国分离株LppB基因的克隆与序列分析被引量：3
- 2005年
- 李媛辛九庆觹高玉龙王砚范
- 关键词：丝状支原体中国分离株B基因LPP牛传染性胸膜肺炎
- 丝状支原体丝状亚种SC型LppB基因的克隆与表达纯化
- 通过PCR方法,扩增丝状支原体丝状亚种SC型标准株PG1的lppB全基因.将该序列克隆到pMDT18载体上测序.结果表明,lppB基因全长1869bP,编码622个氨基酸;该序列中共有6个TGA编码Trp,而不是终止密码...
- 李媛辛九庆高玉龙王砚范
- 关键词：牛传染性胸膜肺炎病原体基因克隆
- 文献传递
- 丝状霉形体丝状亚种SC型脂蛋白LppQN末端基因克隆与序列分析被引量：2
- 2004年
- 脂蛋白 L pp Q是丝状霉形体丝状亚种 SC型 (Mm m SC)非洲株、欧洲株和疫苗株所特有的。 L pp Q N末端域具有良好的免疫原性 ,在牛体内可诱导产生强大、特异、早期、持续的免疫反应。本研究根据已发表的 L pp Q基因序列设计引物 ,用 Pyrobest TM高保真 DNA聚合酶从 Mmm SC HVRI X株中扩增出了 L pp Q N末端基因序列 ,并进行了克隆与序列测定。核苷酸序列比较结果显示 ,HVRI X株的 L pp Q N末端基因序列与国外发表的序列同源性为 99.7% ,由其推导的氨基酸序列同源性为 99.1% ,为脂蛋白 L pp Q
- 辛九庆高玉龙李媛王砚范
- 关键词：牛传染性胸膜肺炎N末端基因克隆
- 丝状支原体丝状亚种SC型脂蛋白QN末端基因的表达、纯化与活性分析
- 将丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)脂蛋白Q(LppQ)N末端基因克隆至原核表达载体pET32a中,经酶切、PCR、测序证实获得了重组表达质粒,转化Escherichia coli BL21(DE3)菌,经IPTG诱...
- 高玉龙辛九庆李媛王砚范
- 关键词：牛传染性胸膜肺炎
- 文献传递
- 丝状支原体丝状亚种SC型脂蛋白LppQ基因克隆与序列分析
- 脂蛋白LppQ是丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)非洲株、欧洲株和疫苗株所特异的.LppQ N末端域具有较好免疫原性,在牛体内可诱导产生强大、特异、早期、持续的免疫反应.本研究根据已发表的LppQ基因序列设计引物,用...
- 高玉龙辛九庆李媛王砚范
- 关键词：牛传染性胸膜肺炎脂蛋白
- 文献传递
- 丝状支原体丝状亚种SC型中国分离株分子流行特征
- 收集了6个来自不同地方中国历史流行的丝状支原体丝状亚种SC型(Mycoplasma mycoides subsp.MycoidesSC,MmmSC)毒株与PG1、Y-goat进行分子特征比较。全菌体蛋白电泳与PG1完全相...
- 辛九庆李媛高玉龙王砚范钱爱东
- 丝状支原体丝状亚种SC型脂蛋白QN末端基因的表达、纯化与活性分析
- 将丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)脂蛋白Q(LppQ)N末端基因克隆至原核表达载体pET32a中,经酶切、PCR、测序证实获得了重组表达质粒,转化EscherichiacoliBL21(DE3)菌,经IPTG诱导后...
- 高玉龙辛九庆李媛王砚范
- 关键词：牛传染性胸膜肺炎丝状支原体
- 文献传递
- 我国部分省区牛传染性胸膜肺炎流行病学调查被引量：8
- 2005年
- 辛九庆李媛高玉龙王砚范
- 关键词：牛传染性胸膜肺炎流行病学调查世界动物卫生组织丝状支原体纤维素性生物型
