广西大学动物科学技术学院广西水生动物病害诊断实验室
- 作品数：40 被引量：144H指数：10
- 相关作者：彭亚李大广滕忠作覃丽芬王林锁更多>>
- 相关机构：贵州大学动物科学学院更多>>
- 发文基金：广西水产畜牧兽医局科研计划项目广西壮族自治区自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生自动化与计算机技术化学工程更多>>
- 黄喉拟水龟Cathelicidin基因克隆及表达分析被引量：1
- 2023年
- 【目的】克隆黄喉拟水龟(Mauremys mutica)Cathelicidin基因(MmCath)并分析其组织表达特征,为深入研究MmCath基因在黄喉拟水龟先天免疫中的潜在作用提供理论依据。【方法】运用RACE克隆黄喉拟水龟MmCath基因cDNA序列,利用生物信息学软件进行序列特征分析,并通过实时荧光定量PCR检测MmCath基因在黄喉拟水龟不同组织中的表达特征及细菌攻毒后的表达情况。【结果】MmCath基因cDNA序列全长777 bp,包括63 bp的5’非编码区、483 bp的开放阅读框(ORF)和231 bp的3’非编码区。MmCath基因编码160个氨基酸残基,包括N端的信号肽区,含有4个保守半胱氨酸(Cys)残基的Cathelin肽区和C端的成熟肽区,符合Cathelicidins蛋白家族典型特征。MmCath前体蛋白相对分子质量为17.74 k D,理论等电点(p I)为5.27,其二级结构中α-螺旋占31.25%,无规则卷曲占20.63%,β-折叠占48.12%。黄喉拟水龟MmCath前体蛋白氨基酸序列与西部锦龟(Chrysemys picta bellii)Cathelicidin氨基酸序列的相似性最高,达80.63%,亲缘关系最近。MmCath基因在黄喉拟水龟的表达具有组织差异性,以脾脏和肝脏中的相对表达量较高,在表皮、心脏、肾脏、肺脏、脑、肠道和肌肉等组织中的相对表达量较低;嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)攻毒后MmCath基因表达上调,在攻毒后第3和第6 h其相对表达量极显著高于攻毒前(0 h)的相对表达量(P<0.01,下同),之后有所下降,在攻毒后第36 h再极显著上升,随后下降。【结论】从黄喉拟水龟中克隆的MmCath基因属于Cathelicidins基因家族,参与了黄喉拟水龟抗病原感染过程,可为有效控制黄喉拟水龟细菌性疾病提供新思路。
- 魏华谭雯予吴志刚杨祖鹏张洪耀韩书煜施金谷黄德生梁静真黄钧
- 关键词：黄喉拟水龟基因克隆
- 山瑞鳖红底板病病原菌的分离鉴定及药敏试验被引量：5
- 2015年
- 【目的】了解山瑞鳖红底板病的病原菌及其对药物的敏感性,为生产中有效防治该病提供科学依据。【方法】以常规方法从患红底板病山瑞鳖的肝脏、心脏和腹水中分离病菌,人工感染确定其致病性,以API 20NE生化鉴定与16S r RNA基因序列分析相结合的方法鉴定病原菌,并采用K-B纸片扩散法进行药敏试验。【结果】从患病山瑞鳖的心脏、肝脏和腹水中分离到3株优势菌株,经鉴定均为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),与标准株ATCC 7966的亲缘关系最近,同源性达99.6%。3株病原菌对舒普深、菌必治、多粘菌素B和先锋必等4种药物均高度敏感,而对先锋霉素VI、青霉素G和氨苄青霉素等3种药物均不敏感。【结论】引起广西南宁市某养鳖场山瑞鳖红底板病的病原菌是嗜水气单胞菌,可选用舒普深、菌必治、多粘菌素B和先锋必等药物进行治疗。放养密度大、水质条件差和相互咬伤是山瑞鳖在保温越冬期间红底板病暴发性流行的诱发因子。
- 刘杰胡大胜黄钧梁静真彭亚覃志彪植淇业李大广
- 关键词：红底板病嗜水气单胞菌药敏试验
- 黄沙鳖β-防御素基因克隆及其表达分析被引量：3
- 2020年
- 【目的】明确β-防御素在黄沙鳖先天免疫中的潜在作用,为开展黄沙鳖绿色病害防治及促进其养殖业健康发展打下基础。【方法】运用RACE克隆黄沙鳖β-防御素基因(Hs-BD1)cDNA序列,采用SignalP-5.0、PredictProtein、PSIPRED、Robetta和Clustal X等在线软件进行生物信息学分析,并通过实时荧光定量PCR检测Hs-BD1基因在黄沙鳖不同组织中的表达特征及细菌感染前后的表达变化。【结果】Hs-BD1基因c DNA序列全长493 bp,包括72 bp的5’非编码区(5’-UTR)、201 bp的开放阅读框(ORF)及220 bp的3’非编码区(3’-UTR)。Hs-BD1基因编码66个氨基酸残基,包括22个氨基酸残基组成的信号肽区、3个氨基酸残基组成的前肽区和41个氨基酸组成的成熟肽区。其中,成熟肽区具有6个保守的半胱氨酸残基(31Cys、58Cys、38Cys、52Cys、42Cys和59Cys)及位于C1和C2间的甘氨酸残基(Gly),即Hs-BD1基因属于β-防御素家族。Hs-BD1氨基酸序列与中华鳖β-防御素16的相似性最高(93.9%),基于β-防御素序列相似性构建的系统发育进化树也显示黄沙鳖与中华鳖和西部锦龟聚为一支,其亲缘关系相对较近。6个保守的半胱氨酸残基分别以C1-C5、C2-C4和C3-C6的连接方式形成3个二硫键;Hs-BD1成熟蛋白三级结构是由α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲组成。Hs-BD1基因在黄沙鳖肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的相对表达量较高,在心脏、肠道、肌肉、脑组织和表皮中的相对表达量均较低;以温和气单胞菌攻毒后,Hs-BD1基因在黄沙鳖脾脏中的相对表达量呈上升—下降—上升—下降的变化趋势,在攻毒后第3和36 h共出现2个表达峰值,对应的相对表达量分别是攻毒前(0 h)的20.8和10.6倍,差异均极显著(P<0.01)。【结论】Hs-BD1基因在黄沙鳖的多个组织中均有表达,尤其在肝脏、脾脏、肺脏和肾脏中的相对表达量较高,且可被温和气单胞菌感染诱导表达,说明Hs-BD1基因在黄沙鳖抵�
- 许飘尹杨廷雅胡大胜韩书煜黎姗梅李明盛雪晴梁静真黄钧
- 关键词：黄沙鳖Β-防御素温和气单胞菌
- 黄沙鳖抗菌肽cathelicidin基因克隆及表达特征分析被引量：3
- 2019年
- 【目的】克隆黄沙鳖cathelicidin基因并分析其组织分布特征及在攻毒后的表达变化,为深入研究cathelicidin功能及在黄沙鳖先天免疫中的潜在作用提供基础数据。【方法】采用RT-PCR结合RACE克隆黄沙鳖cathelicidin基因cDNA全长序列,利用生物信息学分析软件对黄沙鳖cathelicidin基因及其推导氨基酸序列进行结构特征分析,并采用实时荧光定量PCR检测黄沙鳖cathelicidin基因在不同组织中的表达特征及攻毒后的表达变化。【结果】黄沙鳖cathelicidin基因cDNA序列全长1026 bp(GenBank登录号MK250818),包括483 bp的开放阅读框(ORF)、315 bp的5'非编码区(5'UTR)和228 bp的3'非编码区(3'UTR)。黄沙鳖cathelicidin基因cDNA序列编码160个氨基酸,包括氨基端的信号肽区域、含有4个保守半胱氨酸(Cys)残基的cathelin区域及羧基端的成熟肽区域。黄沙鳖cathelicidin基因推导氨基酸序列与中华鳖cathelicidin基因推导氨基酸序列(KY948708.1)的相似性最高,为97.5%;基于cathelicidin基因推导氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树也显示黄沙鳖与中华鳖的亲缘关系最近。黄沙鳖cathelicidin基因在脾脏和肝脏中的相对表达量相对较高,其次是心脏,在脑组织、肾脏、肠道、肌肉、表皮和背甲的相对表达量较低。以温和气单胞菌攻毒后,黄沙鳖脾脏cathelicidin基因相对表达量呈升—降—升—降的波动变化趋势,出现2个峰值(攻毒后第3和36 h),对应的cathelicidin基因相对表达量分别是对照(注射等量无菌生理盐水)的23.1和3.5倍。【结论】黄沙鳖cathelicidin基因在脾脏和肝脏中高表达量,且可被温和气单胞菌感染诱导,说明cathelicidin基因在黄沙鳖抵抗病原感染过程中发挥重要作用。
- 马沙盛雪晴许飘尹贺晓晨黎姗梅韦汉英韦慕兰黄立春梁静真黄钧
- 关键词：黄沙鳖抗菌肽CATHELICIDIN基因克隆
- 黄沙鳖疖疮病的病原菌分离鉴定及药敏试验被引量：13
- 2014年
- 【目的】对广西崇左市某养鳖场患疖疮病的黄沙鳖(Trionyx sinensis)进行病原菌分离鉴定及药敏试验,为今后生产中有效防治黄沙鳖疖疮病提供参考。【方法】以常规方法从患病黄沙鳖肝脏和心脏取样进行细菌分离,经人工感染试验确定病原菌的致病性,用API20NE细菌鉴定系统和16SrRNA基因序列分析鉴定病原菌,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验,并根据药敏试验结果选用高度敏感药物进行治疗。【结果】分离获得两株病原菌(X0805A和X0805B),经鉴定均为温和气单胞菌(Aeromonas sobria);在构建的系统发育进化树中,两株病原菌与Aeromonas sobri NCIMB12065(X60412)菌株亲源关系最近,相似性达99.9%,与Aeromonas sobri ATCC 43979(X74683)的相似性为99.6%;两株病原菌的药敏试验结果基本一致,对先锋必、复达欣、头孢呋肟、氧氟沙星、菌必治、呋喃妥因等6种药物极度敏感,对阿米卡星、卡那霉素、链霉素、利福平、氟哌酸、庆大霉素等6种高度敏感,对苯唑青霉素、万古霉素、环丙沙星、复方新诺明、氨苄青霉素、先锋霉素Ⅴ、四环素、妥布霉素、先锋霉素Ⅵ及青霉素G等药物已产生耐药性。【结论】引起广西崇左市某养殖场黄沙鳖疖疮病的病原菌为温和气单胞菌,以先锋必拌料投喂并结合全塘泼洒二氧化氯进行防治可获得良好的效果。
- 彭亚刘杰胡大胜黄艳华梁静真植淇业李凌波黄钧
- 关键词：黄沙鳖疖疮病温和气单胞菌药敏试验
- 罗非鱼源无乳链球菌对多西环素耐药性获得及消失速率测定
- 2018年
- 本试验测定了来自广西的3株罗非鱼源无乳链球菌对多西环素耐药性获得与消失速率。采用二倍稀释法测定多西环素对无乳链球菌的最小抑菌浓度(MIC),以体外诱导法测定无乳链球菌对多西环素耐药性获得与消失速率。试验结果,经过体外诱导,多西环素对菌株NN395、YL418、LZ522的MIC值均由0. 12μg/m L分别上升到0. 98μg/m L、1. 95μg/m L和1. 95μg/m L,耐药性获得速率分别为8倍、16倍和16倍。在不含多西环素的培养基上连续传代后,3株受试菌对多西环素耐药性消失速率均为4倍。4℃保存30d后,NN395、YL418、LZ522耐药突变株对多西环素耐药性消失速率依次为4倍、4倍和8倍。可见,多西环素可体外诱导3株无乳链球菌产生耐药性。在不含多西环素培养基上连续传代后或在4℃保存30d后,该3株受试菌的耐药性均有一定程度的下降。
- 卢兴焕覃铄杰陈耐牟梁毅覃凤林安朝霞苏栒梁静真黄钧
- 关键词：无乳链球菌多西环素耐药性
- 三种细菌混合灭活疫苗对黄颡鱼的保护性实验
- 2021年
- 为了探讨三种细菌混合灭活疫苗对黄颡鱼的免疫保护作用,在防病上提供理论依据,将分离自患病黄颡鱼的温和气单胞菌、恶臭假单胞菌和类志贺邻单胞菌3种细菌浓度均调至约5×108CFU/mL,按1∶1∶1的比例混合均匀成混合细菌悬液,然后制成福尔马林混合灭活疫苗,对黄颡鱼(体重约14.1g±1.2g)进行免疫保护试验,分别在免疫注射后7d、14d和28d进行3种细菌混合活菌的人工感染试验,以检测混合灭活疫苗的保护率。试验结果,使用0.5%福尔马林在25℃条件下灭活菌液24h可达到完全灭活要求,在人工感染后的第1d~3d为各试验组和对照组黄颡鱼的死亡高峰期,在免疫注射的7d、14d和28d后,混合灭活疫苗的免疫保护率依次为64.2%、92.4%和89.0%。表明本试验的3种细菌混合灭活疫苗对黄颡鱼具有一定的保护作用,在免疫注射14d后保护率达到最高。
- 盛雪晴梁金亨叶小红潘英姿梁祖銮苏清荣邓翊煊刘杰梁静真黄钧
- 关键词：黄颡鱼免疫保护
- 黄沙鳖β-防御素基因家族的鉴定及生物信息学分析
- 2022年
- β-防御素是一种富含半胱氨酸的小分子阳离子抗菌肽,在生物机体天然免疫中发挥重要的作用。本研究基于黄沙鳖转录组数据库和PCR验证鉴定了黄沙鳖β-防御素基因(Hs-BDs)家族,并对其进行蛋白理化性质、蛋白结构和进化关系等生物信息学分析。实验结果表明,共鉴定出18个具有完整蛋白编码区的Hs-BDs家族成员,这些Hs-BDs编码蛋白的氨基酸残基数量在59~94之间,蛋白分子量介于6759.13~10731.32 Da,等电点在8.82~10.45之间。系统进化树分析可将18个Hs-BDs家族成员分为4个亚类(Class I~IV)。随机选择部分Hs-BDs进行蛋白结构分析,这些Hs-BDs前体蛋白二级结构主要由α-螺旋、β-折叠片和无规则卷曲3种结构组成;成熟蛋白三级结构预测结果显示6个保守的半胱氨酸残基分别以Cys1-Cys5、Cys2-Cys4和Cys3-Cys6的方式连接形成3个分子内二硫键。本文结果可为进一步研究黄沙鳖β-防御素基因家族的详细功能以及抗菌肽的研发提供基础数据。
- 杨廷雅魏华蒙兰丽吴志刚谭雯予杨祖鹏唐潇毅廖幸莫昱铭梁静真
- 关键词：黄沙鳖生物信息学
- 禾花鲤致病性铜绿假单胞菌的分离鉴定及药敏试验被引量：6
- 2016年
- 探明广西桂林市全州县禾花鲤暴发性死亡的病原菌及其药敏特性,为有效防控禾花鲤暴发性死亡现象提供依据。按常规方法进行病原菌的分离,人工感染试验确定病原菌,分别以API 20NE和16S rRNA基因序列分析对病原菌进行生化鉴定和分子鉴定,K-B纸片扩散法进行药敏试验。结果表明,从患病禾花鲤中分离到1株优势菌株TH4,该菌株对禾花鲤的平均致死率为80.00%,是引起禾花鲤暴发性死亡的病原菌;API 20NE和16S rRNA鉴定结果,TH4为铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa),与标准株Pseudomonas aeruginosa PA94(KM013815)的亲缘关系最近,同源相似度99.9%;病原菌TH4对菌必治等7种药物高度敏感,对青霉素G等7种药物耐药。
- 龙苏梁静真韩书煜范华龙牛志伟邓小红胡大胜黄钧
- 关键词：禾花鲤铜绿假单胞菌病原分离与鉴定
- 金龟子绿僵菌CQMa421对台湾泥鳅的急性毒性试验
- 2023年
- 台湾泥鳅是稻鱼综合种养中常见的养鱼品种。为确定真菌杀虫剂金龟子绿僵菌CQMa421对台湾泥鳅的安全浓度,本研究进行金龟子绿僵菌CQMa421对台湾泥鳅的急性毒性试验。结果表明,金龟子绿僵菌CQMa421对台湾泥鳅的24 h半致死浓度(LC_(50))为93.79 mg/L,48、72 h和96 h的半致死浓度均为86.24 mg/L,金龟子绿僵菌CQMa421对台湾泥鳅的毒性可评价为低毒;安全浓度为21.87 mg/L,该安全浓度远高于金龟子绿僵菌CQMa421在水稻上施用的有效杀虫用量。本研究结果初步确定金龟子绿僵菌CQMa421在稻鳅综合种养中可以作为水稻生产的杀虫剂安全使用。
- 吴志刚蒙兰丽张洪耀谭雯予魏华杨祖鹏李文红梁静真
- 关键词：急性毒性半致死浓度
