万敏
- 作品数：43 被引量：108H指数：6
- 供职机构：吉林大学白求恩医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 重组小鼠IFN-β原核表达载体的构建及包涵体溶解条件的筛选被引量：5
- 2013年
- 目的:通过重组小鼠干扰素β(IFN-β)原核表达载体的构建及对包涵体溶解条件的筛选,建立IFN-β原核表达模型,为筛选适合的包涵体溶解条件提供实验依据。方法:小鼠新鲜肝组织中提取DNA,传统方法构建小鼠IFN-β原核表达载体并命名为IFN-β′。SDS-PAGE检测以传统方法、pH环境、溶解液成分、干菌与溶解液比例、溶解温度和溶解时间的改变对包涵体溶解效果的影响。结果:IFN-β′成熟蛋白鉴定结果与预测结果吻合,诱导表达正常。改变pH值、在溶解液中加入DTT对包涵体溶解效果无影响,包涵体经洗涤液洗涤后亦不能被溶解液所溶解,温度对包涵体溶解几乎无影响,溶解液的比例由1g菌∶5mL溶解液增加为1g菌∶20mL溶解液时能溶解部分IFN-β′蛋白包涵体。结论:成功构建重组小鼠IFN-β原核表达载体,其蛋白以包涵体形式存在,且不易被溶解,在筛选的包涵体溶解条件中仅溶解液比例为影响包涵体蛋白溶解条件。
- 苏雅拉图张永胜陈宇杰胡小平王丽颖万敏吴柒柱
- 关键词：干扰素Β原核表达包涵体
- 卡介苗热休克蛋白70对肿瘤细胞裂解物免疫原性的影响
- 2011年
- 目的:观察卡介苗热休克蛋白70(BCGHSP70)对肿瘤细胞裂解物(TCL)免疫原性的影响,为TCL相关肿瘤疫苗的制备提供依据。方法:应用冻融法制备B16黑色素瘤细胞裂解物B16TCL,将BCGHSP70与B16TCL在体外混合制备BCGHSP70-B16TCL。将C57BL/6小鼠随机分为BCGHSP70-B16TCL组、PBS组、BCGHSP70组和B16TCL组,分别于第1和14天皮下免疫BCGHSP70-B16TCL、PBS、BCGHSP70和B16TCL。于末次免疫后第7天处死小鼠,MTT法观察不同免疫组小鼠脾淋巴细胞在B16TCL体外刺激后的增殖情况,计算刺激指数(SI)。结果:应用冻融法能够使B16细胞完全裂解,所制备的B16TCL中含有丰富的蛋白成分。与PBS组、BCGHSP70组和B16TCL组比较,BCGHSP70-B16TCL组免疫小鼠脾脏明显增大;BCGHSP70-B16TCL免疫组SI高于PBS免疫组(P=0.00)、B16TCL免疫组(P=0.01)和BCGHSP70免疫组(P=0.00)。结论:BCGHSP70能够增强B16TCL的免疫原性,提示BCGHSP70可能作为有效的免疫佐剂用于TCL相关肿瘤疫苗的研究。
- 李贺王华吴秀丽卫红飞孙陆果张永胜于永利王丽颖万敏
- 关键词：卡介苗热休克蛋白质类免疫原性免疫佐剂
- 重组人乳头瘤病毒CTL表位疫苗的构建与表达被引量：4
- 2007年
- 目的:构建人乳头瘤病毒的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位疫苗并在大肠杆菌中表达。方法:应用多轮PCR的方法合成CTL表位基因序列,将其亚克隆入pET28a表达载体中,并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达重组蛋白质,用Western blotting对重组蛋白进行鉴定。结果:采用计算机表位预测的方法选取HPV6、11、16型的CTL表位,通过5轮PCR人工合成人乳头瘤病毒CTL表位疫苗的基因片段HPVepi,用亚克隆的方法构建了重组表达质粒pET28a-Tat-HPVepi,并在大肠杆菌高效表达了该重组蛋白质,经Western blotting鉴定显示出特异性条带。结论:结合计算机表位预测和PCR的方法构建并在大肠杆菌中高效表达了一种人乳头瘤病毒CTL表位疫苗。
- 王艳姝田亚萍万敏于永利王丽颖
- 关键词：病毒疫苗穿膜肽
- 临床医学专业硕士研究生分子生物学教学改革研究被引量：2
- 2017年
- 分子生物学理论和技术推动着整个生命科学领域的发展。为了提高硕士研究生分子生物学的教学效果,为分子生物学培养素质型人才提供有益的参考,文章通过研究新入学硕士研究生对分子生物学理论知识掌握程度,从教学内容的改革,理论知识与临床应用相结合的教学模式,理论与科研实例相结合的教学模式,教师引导下自主学习的教学方法,实验课考核方式的改革五个方面探讨了分子生物学教学改革。
- 房明丽王丽颖王华杨光万敏孙巍
- 关键词：分子生物学硕士研究生教学改革
- 猪瘟病毒内蒙流行株E2融合基因的构建被引量：2
- 2004年
- 目的 :获取猪瘟病毒内蒙流行株的 E2基因并构建融合基因。方法 :采用逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR)技术从感染猪瘟病毒内蒙流行株猪脾脏中获得并扩增 E2基因特异性片段 ,将扩增的 E2基因测序后与Chaperone1 0相连接构成融合基因并连接到表达载体上。结果 :所获得的猪瘟病毒内蒙流行株 E2基因和其他地区猪瘟病毒流行株 (HCL V株 ) E2基因有 4个碱基的差异 ;融合基因 Chaperone1 0 - E2构建成功。结论 :不同地区猪瘟病毒
- 任淑萍陈越万敏包木胜吴秀丽于永利王丽颖
- 关键词：猪瘟病毒基因逆转录聚合酶链反应基因融合
- MUC1免疫复合物抗乳腺癌制剂研制
- 任淑萍杨淑娟王丽影于永利万敏吴秀丽刘亚娟郭丽任明邢雷
- 乳腺癌是威胁女性健康的主要疾病之一，患病年龄越小，存活率越低。为此，临床上急需一种具有特异性治疗作用的制剂，该制剂特异性地杀伤肿瘤细胞，对正常细胞没有损伤作用。粘蛋白1(MUC1)在乳腺癌细胞中高表达。表达在恶性细胞表面...
- 关键词：
- 关键词：乳腺癌免疫复合物抗肿瘤制剂
- 不同诱导剂对工程菌发酵及重组蛋白表达的影响被引量：12
- 2005年
- 目的观察不同诱导剂对工程菌发酵及HSP-MUC1重组蛋白表达的影响,从而选取最佳诱导表达条件。方法分别用IPTG和乳糖作为诱导剂,发酵表达HSP-MUCI重组蛋白质,并对重组蛋白质表达量和性状进行分析。结果用IPTG诱导发酵的菌体经普通匀浆法即可将细菌破碎;而用乳糖发酵的菌体经普通匀浆法不能破菌,通过延长发酵时间也能达到与IPTG诱导相同的表达量。结论乳糖可以作为基因工程重组蛋白的理想诱导剂。
- 卫红飞万敏杨世杰王燕媚李大鹏王爱丽于永利王丽颖
- 关键词：诱导剂工程菌重组蛋白细菌发酵乳糖
- 关于分子生物学教学改革的思考被引量：5
- 2017年
- 为了培养学生的动手能力和创新精神,文章对分子生物学教学改革进行了探究,从学生的重视度不足、知识掌握难度大,以及改善分子生物学理论课程教学,加强分子生物学实验室基本技能训练课程,加强课间科研训练课程教学,建设教师队伍,改进实践教学方法,改革考试方法,注重实践教学平台建设,评估教师综合能力几个方面分析了分子生物学教学改革。
- 杨光房明丽万敏王华孙巍
- 关键词：分子生物学教学改革教学质量
- 新型CpG ODN与氢氧化铝联用作为乙肝疫苗佐剂能刺激IgG2a类抗体的产生
- 目的：寻找能增强乙肝疫苗刺激IgG2a类抗体产生、使机体处于Th1样免疫环境的新型乙肝疫苗佐剂.<br> 方法：选用自行设计的A、B、C型CpG ODN,与商品化重组乙肝疫苗(含Al(OH)3佐剂)混合后于...
- 丛中一包木胜万敏王莉李大鹏王丽颖于永利
- 关键词：乙型肝炎疫苗佐剂免疫应答反应动物模型
- 重组卡介苗热休克蛋白70的纯化及内毒素去除的效果评价被引量：6
- 2010年
- 目的:表达、纯化重组卡介苗热休克蛋白70(BCGHSP70)并去除其中的内毒素。方法:采用10L发酵罐经IPTG诱导表达含有重组表达质粒pET28a/HSP70的BL21(DE3)工程菌(pET28a/HSP70/BL21),SDS-PAGE检测BCGHSP70的表达。超声破碎菌体,裂菌后上清依次经过NiSepharose4B亲和层析、TritonX-114洗涤、SuperdexG-25凝胶过滤层析、Q-SepharoseFF离子交换层析进行纯化。SDS-PAGE鉴定纯化蛋白,Lowry法检测蛋白浓度,37℃水浴孵育0～4h检测纯化蛋白的稳定性,鲎试剂法检测内毒素含量。结果:工程菌pET28a/HSP70/BL21在发酵表达3h后获得96g湿菌,其中相对分子质量约为70000的蛋白约占菌体总蛋白量的29.6%;表达产物纯化后在相对分子质量约70000处可见特异性条带,该分子质量蛋白约占总蛋白量的96.5%;纯化后蛋白浓度约1.2g.L-1;37℃水浴中放置4h后相对分子质量为70000的蛋白约占总蛋白量的95.1%;纯化产物内毒素含量<0.01EU.μg-1。结论:成功表达、纯化了重组BCGHSP70,并有效地去除了其中的内毒素。
- 李贺张培因卫红飞曹昭王影王华胡小平万敏王丽颖于永利
- 关键词：热休克蛋白70纯化TRITON内毒素类
