付家瑜
- 作品数：53 被引量：357H指数：13
- 供职机构：北京大学人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部科学研究基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 多参数流式细胞术分析415例成人和儿童B-ALL白血病相关免疫表型被引量：11
- 2006年
- 为了探讨FCM在微量残留病(MRD)检测中的意义,利用4 -6组4色抗体组合,以CD45/SSC设门法对273例成人和142例儿童B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患者进行了多参数流式细胞术(FCM)免疫分型检测和白血病相关免疫表型(leukemia associated immunophenotyping, LAIP)分析。结果表明:根据CD34和CD10的表达特点,可将B-ALL患者分为I型(CD34+CD10-);Ⅱ型(CD34+CD10+);Ⅲ型(CD34-CD10+);Ⅵ型(CD34-CD10-)。Ⅰ型和Ⅱ型患者LAIP的阳性比例分别为100%和92%,但Ⅲ型患者LAIP阳性率只有79.2%,显著低于Ⅰ型和Ⅱ型患者。总体B-ALL患者LAIP的检出率为90%,成人与儿童组无明显差异。而利用CD34/CD10/CD19/CD45一组抗体,LAIP检出率达到77.6%。结论: 90%成人和儿童B-ALL白血病患者具有LAIP,因此对这类患者适宜用多参数流式细胞术进行MRD监测。
- 刘艳荣陈珊珊常艳付家瑜张乐萍王卉李玲娣主鸿鹄刘桂兰陆道培黄晓军
- 关键词：白血病相关免疫表型多参数流式细胞术
- c-cbl反义RNA抑制K562细胞的增殖被引量：1
- 1998年
- 为探讨原癌基因c-cbl对CML细胞增殖的影响,我们用RT-PCR克隆了包括5′端非编码区的人类c-cbl基因部分序列,将之反向插入pcDNA3载体,并转染K562及NB4细胞。经MTT实验、半固体集落培养和流式细胞术观察细胞增殖能力的改变。结果表明,限制性酶切分析及序列测定证明所克隆的基因核苷酸序列正确,MTT实验显示反义载体转染K562细胞生长明显受抑,24、48及72小时增殖抑制率分别为30.07％,42.53％和55.75％(P值均<0.001),FCM-BrdU法测定的细胞倍增时间之比为1∶1.87(P<0.02),细胞集落形成抑制率为33.01％,反义转染基因NB4细胞增殖率无改变。上述结果直接地证明了c-cbl在CML细胞生长中的重要性。
- 郭子宽李金兰高晖付家瑜陈珊珊
- 关键词：反义RNA原癌基因K562细胞
- 伊马替尼治疗慢性髓性白血病患者ABL蛋白点突变与临床表现的关系
- ＜正＞慢性髓性白血病（CML）发病基础是t（9;22）易位形成BCR/ABL融合蛋白,甲磺酸伊马替尼 （Im）选择性抑制ABL酪氨酸激酶（包括v-ABL、P210BCR/ABL、P190BCP/ABL、TEL/ABL）活...
- 秦亚溱李金兰阮国瑞主鸿鹄江倩付家瑜常艳李玲娣刘艳荣陈珊珊
- 文献传递
- 慢性髓性白血病患者伊马替尼治疗后ABL激酶区点突变分析被引量：11
- 2005年
- 目的研究伊马替尼治疗慢性髓性白血病(CML)患者ABL酪氨酸激酶区点突变发生情况。方法采用巢式PCR扩增30例伊马替尼治疗时处于加速/急变或慢性期后期,伊马替尼临床治疗效果不佳,在治疗不同时间的45例CML患者的骨髓标本,检测bcr/abl融合mRNA的abl激酶区,纯化、测序并进行序列同源性分析。结果13例患者检出点突变(43.3%),类型分别为E255K4例,G250E4例,F359C+G250E、E355G、M244V、Y253H及D276G1各1例。其中12例发生疾病进展,转入加速/急变期,8例疾病进展时表现为纯合型点突变,3例为野生与突变型ABL同时存在(1例无进展时标本)。加速/急变期患者(1.5～30个月,中位5个月)明显早于慢性期后期患者(11～45个月,中位25.5个月)检出点突变(P<0.05)。4/7例随访患者在急变前的7～15个月分别检测到不同程度的点突变。结论ABL激酶区点突变是伊马替尼治疗CML失效的主要原因之一。定期监测ABL激酶区点突变有助于及早采取干预治疗,提高疗效。
- 秦亚溱刘艳荣李金兰阮国瑞主鸿鹄江倩付家瑜陆颖常艳李玲娣黄晓军陈珊珊丘镜滢
- 关键词：蛋白质酪氨酸激酶点突变伊马替尼
- 逆转录聚合酶链反应检测慢性髓细胞白血病骨髓成纤维细胞BCR/ABLmRNA
- 1999年
- 熊玉宁付家瑜李金兰常艳陈珊珊
- 关键词：RT-PCR慢性白血病
- AML1/ETO融合转录子在白血病患者化疗及骨髓移植后的追踪观察被引量：5
- 2001年
- 利用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术分别检测 4 9例初治病人及 12例化疗、8例BMT后病人不同时期骨髓细胞AML1/ETOmRNA的表达。结果显示 :①AML1/ETOmRNA可表达于AML M2 ,AML M4及MDS RAEB T中 ;② 9例病人化疗后、5例Allo BMT及 1例Auto PBSCT后RT PCR结果分别转为阴性并处于持续完全缓解状态 ,2例化疗病人由阴性转为阳性而后复发 ,1例化疗病人持续弱阳性后转阳性并复发。 2例Allo BMT病人移植后持续阳性并分别死于复发及GVHD。研究结果提示 ,化疗及骨髓移植可以使RT PCRAML1/ETOmRNA转为阴性 ;由阴性转阳性或持续阳性可能预示复发 。
- 秦亚溱刘艳荣李金兰付家瑜常艳陆道培郭乃榄陈珊珊
- 关键词：急性白血病骨髓增生异常综合征化疗骨髓移植
- PDCD5在成人急性髓性白血病骨髓细胞的异常表达被引量：10
- 2007年
- 为了研究成人急性髓性白血病(acute myeloid leukemia,AML)骨髓细胞凋亡促进分子---PDCD5的表达,以探讨PDCD5在AML发病机制中的作用,利用21种不同荧光标记的单克隆抗体标记骨髓细胞,通过流式细胞术检测AML病人及正常人骨髓不同群细胞的胞内PDCD5的表达。部分标本进行蛋白印迹实验检测AML病人及正常人骨髓细胞内PDCD5的表达。结果表明:36例未治AML病人骨髓总的有核细胞内PDCD5平均荧光强度明显低于30例正常人组,分别为3059±1392:7432±1261(P<0.01),其中未治AML病人骨髓粒细胞、单核细胞、幼稚细胞及淋巴细胞内PDCD5平均荧光强度均低于相应的正常人组骨髓细胞,分别为3939±2121:8367±1045;3156±1635:5917±2329;2824±1592:3998±2106;1474±816:3355±2042(P值均小于0.01)。部分标本进行蛋白印迹检测的结果也显示AML病人骨髓细胞内PDCD5的表达低于正常人。结论:未治AML病人骨髓总有核细胞的PDCD5表达低于正常人,未治AML病人骨髓粒细胞、单核细胞、幼稚细胞及淋巴细胞内PDCD5表达均低于正常人组骨髓细胞。PDCD5的异常表达可能在AML的病理机制中起到一定的作用。
- 阮国瑞陈珊珊马曦常艳王卉付家瑜秦亚溱李金兰刘艳荣
- 关键词：急性髓性白血病PDCD5骨髓细胞细胞凋亡
- 急性淋巴细胞白血病bcr/abl融合基因表达及其与免疫表型的关系被引量：1
- 1997年
- 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测了M-bcr/abl和m-bcr/abl两种类型融合基因在48例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的表达,并且绝大多数病例同时进行了免疫表型和DNA倍体的流式细胞术分析。结果表明,25%(12/48)的病例M-bcr/abl或m-bcr/abl融合基因阳性,m-bcr/abl阳性率略高。分析bcr/abl阳性病例的免疫表型,发现大多数病例为B系标志阳性,但部分T系标志阳性的病例也检测出M-bcr/abl或m-bcr/abl,说明bcr/abl阳性ALL病例以B系标志阳性者居多,T系标志阳性的ALL病例也可为bcr/abl阳性。
- 喻新建薛文韬付家瑜常艳高晖陈珊珊
- 关键词：急性淋巴细胞白血病BCR/ABL融合基因基因表达免疫表型逆转录-聚合酶链反应
- 慢性髓性白血病异基因造血干细胞移植后M-bcr/abl及m-bcr/abl融合转录子追踪观察被引量：4
- 2003年
- 为研究慢性髓性白血病 (CML)异基因造血干细胞移植 (SCT)后M bcr/abl及m bcr/abl融合转录子表达特征 ,采用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术测定 72例CML患者SCT后不同时间骨髓M bcr/abl及m bcr/abl融合转录子的表达。结果显示 ,CML患者移植后 <6个月M bcr/abl阳性率 (79.2 % ,4 2 /5 3)显著高于 6 - 12个月(34.3% ,11/32 )及≥ 12个月 (35 .1% ,13/37) (P <0 .0 0 1) ,各时间段M bcr/abl阳性患者的临床复发率分别为1 9% (1/5 3) ,0 (0 /32 )及 16 .2 % (6 /37) ;6例临床复发患者中有 5例复发时M bcr/abl与m bcr/abl同时阳性。 14例遗传学缓解患者移植 6个月后M bcr/abl阳性的 17份标本无 1例m bcr/abl阳性。结论 :多数CML患者移植后M bcr/abl仍为阳性 ,一般在 6个月内转阴 ,移植后M bcr/abl阳性的患者不一定复发 ,同时追踪观察M bcr/abl及m bcr/abl融合转录子可能会有助于监测残存白血病。
- 秦亚溱刘艳荣李金兰付家瑜常艳阮国瑞王卉丘镜滢陆道培陈珊珊
- 关键词：慢性髓性白血病异基因造血干细胞移植
- 定量检测WT1基因表达水平在急性髓系白血病微量残留病监测中的意义被引量：24
- 2005年
- 目的评价定量检测WT1基因表达水平在监测急性髓系白血病(AML)微量残留病(MRD)中的意义。方法采用实时定量RT-PCR(RQ-PCR)技术分别测定了15名正常人骨髓及72例AML患者治疗前后123份骨髓标本WT1基因mRNA表达水平,同时对62份患者标本定量检测了AML1-ETO融合基因mRNA表达水平,对跟踪观察的8例患者50份标本同时监测了WT1及AML1-ETO基因mRNA水平变化。WT1及AML1-ETO基因表达水平用内参照基因ABL归一化。结果WT1、AML1-ETO及ABL RQ-PCR的标准曲线相关系数均>0.99,日内差及日间差均<4%。正常骨髓WT1mRNA中位水平为0.008(0.001～0.019)。67例初治AML患者中61例(91.0%)WT1mRNA表达高于正常水平,其中37例(55.2%)高于正常100倍以上。各型AML中M4EO及M3患者WT1mRNA水平最高,明显高于其他亚型,M1及M5型最低。WT1与AML1-ETO mRNA水平明显正相关(r=0.88,P<0.001),4例血液学持续缓解患者中3例WT1mRNA水平始终在正常范围内波动。4例发生血液学复发的患者中3例复发前1个月WT1mRNA的水平分别超出正常上限的31.4,11.4及4.0倍。结论RQ-PCR定量检测WT1mRNA水平可用于监测大多数AML患者MRD,但是敏感度不如AML1-ETO融合基因,WT1mRNA水平持续增高或明显异常预示复发。
- 秦亚溱阮国瑞李金兰付家瑜常艳王卉李玲娣刘艳荣陈珊珊
- 关键词：WT1基因急性髓系白血病微量残留病疾病监测融合基因
