付家瑜
- 作品数：53 被引量：358H指数：13
- 供职机构：北京大学人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金卫生部科学研究基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 多参数流式细胞术分析415例成人和儿童B-ALL白血病相关免疫表型被引量：11
- 2006年
- 为了探讨FCM在微量残留病(MRD)检测中的意义,利用4 -6组4色抗体组合,以CD45/SSC设门法对273例成人和142例儿童B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患者进行了多参数流式细胞术(FCM)免疫分型检测和白血病相关免疫表型(leukemia associated immunophenotyping, LAIP)分析。结果表明:根据CD34和CD10的表达特点,可将B-ALL患者分为I型(CD34+CD10-);Ⅱ型(CD34+CD10+);Ⅲ型(CD34-CD10+);Ⅵ型(CD34-CD10-)。Ⅰ型和Ⅱ型患者LAIP的阳性比例分别为100%和92%,但Ⅲ型患者LAIP阳性率只有79.2%,显著低于Ⅰ型和Ⅱ型患者。总体B-ALL患者LAIP的检出率为90%,成人与儿童组无明显差异。而利用CD34/CD10/CD19/CD45一组抗体,LAIP检出率达到77.6%。结论: 90%成人和儿童B-ALL白血病患者具有LAIP,因此对这类患者适宜用多参数流式细胞术进行MRD监测。
- 刘艳荣陈珊珊常艳付家瑜张乐萍王卉李玲娣主鸿鹄刘桂兰陆道培黄晓军
- 关键词：白血病相关免疫表型多参数流式细胞术
- c-cbl反义RNA抑制K562细胞的增殖被引量：1
- 1998年
- 为探讨原癌基因c-cbl对CML细胞增殖的影响,我们用RT-PCR克隆了包括5′端非编码区的人类c-cbl基因部分序列,将之反向插入pcDNA3载体,并转染K562及NB4细胞。经MTT实验、半固体集落培养和流式细胞术观察细胞增殖能力的改变。结果表明,限制性酶切分析及序列测定证明所克隆的基因核苷酸序列正确,MTT实验显示反义载体转染K562细胞生长明显受抑,24、48及72小时增殖抑制率分别为30.07％,42.53％和55.75％(P值均<0.001),FCM-BrdU法测定的细胞倍增时间之比为1∶1.87(P<0.02),细胞集落形成抑制率为33.01％,反义转染基因NB4细胞增殖率无改变。上述结果直接地证明了c-cbl在CML细胞生长中的重要性。
- 郭子宽李金兰高晖付家瑜陈珊珊
- 关键词：反义RNA原癌基因K562细胞
- 凋亡促进分子TFAR19在成人慢性髓性白血病骨髓细胞的异常表达被引量：19
- 2002年
- 目的 :研究成人慢性髓性白血病 (chronicmyeloidleukemia ,CML)骨髓细胞凋亡促进分子———TFAR19的表达 ,以探讨TFAR19在CML发病及疾病进展中的作用。方法 :利用 15种不同荧光标记的单克隆抗体标记骨髓细胞 ,通过流式细胞术检测未治CML慢性期病人、CML加速 /急变期病人、及正常人骨髓不同细胞群细胞内TFAR19的表达。结果 :2 0例未治CML慢性期及 13例加速 /急变期病人骨髓总的有核细胞内TFAR19平均荧光强度明显低于 10例正常人组骨髓总的有核细胞 ,分别为 5 793± 15 36 ,72 6 0± 781,P <0 .0 1及 4 2 93± 10 82 ,72 6 0± 781,P <0 .0 1,其中未治CML慢性期及加速 /急变期病人骨髓粒细胞内TFAR19平均荧光强度低于正常人组骨髓粒细胞 ,分别为 6 2 4 0± 1734,8317± 72 6 ,P <0 .0 1,及 5 75 9± 14 87,8317± 72 6 ,P <0 .0 1;未治CML慢性期及加速 /急变期病人骨髓淋巴细胞内TFAR19平均荧光强度低于正常人组骨髓淋巴细胞 ,分别为 12 92± 6 39,2 2 71± 82 0 ,P <0 .0 1,及 12 31± 2 81,2 2 71± 82 0 ,P <0 .0 1。CML加速 /急变期病人总的有核细胞与未治CML慢性期病人相比 ,TFAR19表达进一步降低 ,分别为 4 2 93± 10 82 ,5 793± 15 36 ,P <0 .0 1。结论 :未治CML慢性期病人、CML加速 /急变期病人?
- 阮国瑞陈珊珊常艳付家瑜王卉秦亚溱李金兰刘艳荣
- 关键词：白血病髓样慢性PDCD5骨髓细胞
- 反义VEGFcDNA转染联合应用IFNα或信号转导抑制剂571(STI571)对K562细胞的协同抑制
- 2002年
- 目的 :探讨转染反义VEGFcDNA及联合应用IFNα或STI571对慢性髓性白血病 (chronicmyeloidleukemia ,CML)急变细胞株K562的作用。方法 :利用转染反义 (AS)、正义 (S)VEGF1 2 1 cDNA及空载体 (V ,pcDNA3)的K562细胞株 ,采用台盼蓝拒染法、流式细胞术Annexin V FITC/PI双标技术 ,观察IFNα或STI571(CGP571 4 8B)对转染后K562细胞增殖及凋亡的影响。结果 :IFNα(1 0 0u·ml 1 )能抑制K562 /AS细胞生长 ,增加其凋亡。STI571 (0 .1 μmol·L 1 )对K562 /V、K562 /S和K562 /AS细胞生长均有抑制作用。低剂量VP1 6(1 0mg·L 1 )或低剂量STI571 (0 .1 μmol·L 1 )在 2 4h就对K562 /AS细胞有诱导凋亡的作用 ,且VP1 6(1 0mg·L 1 )与STI571(0 .1 μmol·L 1 )的联合应用具有协同诱导K562 /AS细胞凋亡的作用。在 72h时 ,0 .1 μmol·L 1 的STI571对K562 /V、K562 /S和K562 /AS细胞均有诱导凋亡的作用。结论 :转染反义VEGF1 2 1 cDNA联合应用IFNα能协同抑制细胞增殖 ,转染反义VEGF1 2 1 cDNA能增加K562细胞对VP1 6或STI571的敏感性。提示抗VEGF药物可能成为治疗CML的新策略。
- 阮国瑞刘艳荣陈珊珊于弘常艳付家瑜李金兰秦亚溱
- 关键词：反义VEGF内皮细胞生长因子干扰素ΑSTI571
- 610例急性髓系白血病免疫表型和白血病相关免疫表型分析被引量：22
- 2007年
- 目的探讨急性髓系白血病(AML)患者免疫表型和白血病相关的免疫表型(LAIP)特征及在微量残留病(MRD)检测中的意义。方法采用 CIM5/SSC 设门四色流式细胞术,检测610例AML 患者和20名健康志愿者下列抗原的表达:CD7、CD117、CD33、CD34、CD10、CD19、CD56、CD38、CD13、CD14、CD64、CD9、CD16、CD2、CD5、CD11b、CD123、HLA-DR。结果正常骨髓中 CD34^+和CD117^+SSC 值低(SSC^(low))的细胞比例分别为(0.35±0.15)%和(0.76±0.31)%。CD34^+SSC^(low)细胞中绝大多数细胞共表达 CD13、CD33、CD38、CD117、HLA-DR(84%～94%)。CD9和 CD15的相对比例为20%和33%,而 CD11b、CD56、CD19和 CD64的相对比例均低于10%,CD7为12%。CD117^+SSC^(low)细胞中,CD19^+、CD11b^+、CD56^+和 CD7^+细胞相对比例低于10%,CD9^+细胞为14%,CD38^+和 HLA-DR^+细胞的相对比例为87%和91%,其余抗原(CD15、CD13、CD33、CD34)均在30%～50%。AML 患者中 CD117、CD38表达率约为95%,CD33、CD9表达率约为84%。HLA-DR 和 CD13表达率分别为77.23%和75.25%。CD64和 CD34的表达率分别为64.41%和59.51%。CD15表达率为43.06%,CD11b 表达率为22.07%。86.39%的 AML 患者 LAIP 阳性,以 AML-M_1和 M_3最高,AML-M_(4Eo)最低。LAIP 主要表现为交叉系列抗原表达和非同期共抗原表达,前者以 CD34与 CD7、CD19、CD56同时阳性为主。在非同期抗原表达中,CD34^+CD64^+、CD117^+CD11b^+、CD117^+CD38^(-/dim)、CD117^+HLA-DR^(-/dim)正常值在0.01%左右,与 AML 之间的对数差大于3,为灵敏度较高的 LAIP。结论多参数流式细胞术适于80%以上 AML 患者 MRD 检测。
- 刘艳荣王亚哲陈珊珊常艳付家瑜李玲娣王卉于弘江滨黄晓军
- 关键词：免疫表型分析白血病非淋巴细胞急性微量残留病
- 成人急性白血病免疫表型的特点被引量：20
- 1995年
- 用流式细胞仪－单免疫荧光标记法检测了１２８例成人急性髓细胞白血病（ＡＭＬ），８３例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）及１７例慢性粒细胞白血病急变期患者骨髓细胞的免疫标志。常规用１０种单抗。有四种表型：①系列专一性；②系列非专一性；③仅表达ＨＬＡ－ＤＲ；④“裸型”。系列专一性表型在ＡＭＬ与ＡＬＬ中分别占５３．１％与７８．３％。我们认为根据ＦＡＢ分型法及免疫表型结果，采用反常免疫表型一词，能较客观地反映其免疫学特征。
- 陈珊珊薛文韬张海帆付家瑜李鲲常艳付剑峰吴萍娜
- 关键词：免疫表型急性白血病
- 伊马替尼治疗慢性髓性白血病患者ABL蛋白点突变与临床表现的关系
- ＜正＞慢性髓性白血病（CML）发病基础是t（9;22）易位形成BCR/ABL融合蛋白,甲磺酸伊马替尼 （Im）选择性抑制ABL酪氨酸激酶（包括v-ABL、P210BCR/ABL、P190BCP/ABL、TEL/ABL）活...
- 秦亚溱李金兰阮国瑞主鸿鹄江倩付家瑜常艳李玲娣刘艳荣陈珊珊
- 文献传递
- 慢性髓性白血病患者伊马替尼治疗后ABL激酶区点突变分析被引量：11
- 2005年
- 目的研究伊马替尼治疗慢性髓性白血病(CML)患者ABL酪氨酸激酶区点突变发生情况。方法采用巢式PCR扩增30例伊马替尼治疗时处于加速/急变或慢性期后期,伊马替尼临床治疗效果不佳,在治疗不同时间的45例CML患者的骨髓标本,检测bcr/abl融合mRNA的abl激酶区,纯化、测序并进行序列同源性分析。结果13例患者检出点突变(43.3%),类型分别为E255K4例,G250E4例,F359C+G250E、E355G、M244V、Y253H及D276G1各1例。其中12例发生疾病进展,转入加速/急变期,8例疾病进展时表现为纯合型点突变,3例为野生与突变型ABL同时存在(1例无进展时标本)。加速/急变期患者(1.5～30个月,中位5个月)明显早于慢性期后期患者(11～45个月,中位25.5个月)检出点突变(P<0.05)。4/7例随访患者在急变前的7～15个月分别检测到不同程度的点突变。结论ABL激酶区点突变是伊马替尼治疗CML失效的主要原因之一。定期监测ABL激酶区点突变有助于及早采取干预治疗,提高疗效。
- 秦亚溱刘艳荣李金兰阮国瑞主鸿鹄江倩付家瑜陆颖常艳李玲娣黄晓军陈珊珊丘镜滢
- 关键词：蛋白质酪氨酸激酶点突变伊马替尼
- 逆转录聚合酶链反应检测慢性髓细胞白血病骨髓成纤维细胞BCR/ABLmRNA
- 1999年
- 熊玉宁付家瑜李金兰常艳陈珊珊
- 关键词：RT-PCR慢性白血病
- AML1/ETO融合转录子在白血病患者化疗及骨髓移植后的追踪观察被引量：5
- 2001年
- 利用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术分别检测 4 9例初治病人及 12例化疗、8例BMT后病人不同时期骨髓细胞AML1/ETOmRNA的表达。结果显示 :①AML1/ETOmRNA可表达于AML M2 ,AML M4及MDS RAEB T中 ;② 9例病人化疗后、5例Allo BMT及 1例Auto PBSCT后RT PCR结果分别转为阴性并处于持续完全缓解状态 ,2例化疗病人由阴性转为阳性而后复发 ,1例化疗病人持续弱阳性后转阳性并复发。 2例Allo BMT病人移植后持续阳性并分别死于复发及GVHD。研究结果提示 ,化疗及骨髓移植可以使RT PCRAML1/ETOmRNA转为阴性 ;由阴性转阳性或持续阳性可能预示复发 。
- 秦亚溱刘艳荣李金兰付家瑜常艳陆道培郭乃榄陈珊珊
- 关键词：急性白血病骨髓增生异常综合征化疗骨髓移植
