付小哲
- 作品数：180 被引量：332H指数：10
- 供职机构：中国水产科学研究院珠江水产研究所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 鳜鱼病害防治新技术(三)被引量：1
- 2007年
- （一）研制的几种鳜鱼疫苗
鱼类免疫学研究证实，几乎所有真骨鱼类都具有较为完善的免疫系统，除非特异性免疫外，对入侵的病原体（如嗜水气单胞菌）还可产生特异性免疫应答，将病原体杀死、降解或排除。
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- 关键词：病害防治鳜鱼非特异性免疫嗜水气单胞菌真骨鱼类
- 牡蛎中副溶血弧菌荧光定量PCR检测方法的建立及其应用被引量：21
- 2011年
- 以副溶血弧菌毒素调控基因(toxin regulations,toxR)作为靶标基因,设计特异性引物及TaqMan探针,以含toxR基因的质粒为模板,建立质粒拷贝数与CT值的标准曲线,分别采用含toxR基因质粒、纯培养的副溶血弧菌和添加副溶血弧菌的牡蛎(Ostrea)模拟样品进行灵敏度试验,结果表明,其灵敏度分别为15拷贝、18 CFU/mL和180 CFU/mL。同一个样品的30次重复性试验表明,试验内及试验间的变异系数分别为0.95%和1.5%。结果显示,本研究建立的副溶血弧菌荧光定量PCR检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好,可用于牡蛎等水产品中副溶血弧菌的定量检测。
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- 关键词：副溶血弧菌荧光定量PCR
- 基于荧光定量PCR的鳜传染性脾肾坏死病毒滴度检测方法被引量：10
- 2014年
- 针对传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)的ORF007基因,设计特异性引物及TaqMan探针,建立了ISKNV的实时荧光定量PCR方法。采用CPE法对连续10倍稀释的ISKNV培养液的滴度进行了测定,同时采用荧光定量PCR法测定病毒拷贝数。结果显示,荧光定量PCR测定的病毒拷贝数与CPE法测定的病毒滴度具有良好的线性关系,其线性方程为y=1.076x+0.545(R2=0.998 6),其中y为基因组拷贝数浓度的对数,x为病毒滴度TCID50的对数。研究表明,荧光定量PCR法可替代CPE法应用于ISKNV疫苗抗原的定量,大大缩短了疫苗制备的时间,为疫苗生产提供了方便。
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- 关键词：传染性脾肾坏死病毒疫苗滴度定量PCR
- 传染性脾肾坏死病毒、鳜鱼蛙病毒和鳜弹状病毒三重PCR检测方法的建立被引量：1
- 2021年
- 【目的】建立可同时检测传染性脾肾坏死病毒(infectious spleen and kidney necrosis virus,ISKNV)、鳜鱼蛙病毒(Siniperca chuatsi ranairidovirus,SCRIV)和鳜弹状病毒(Siniperca chuatsi rhabdovirus,SCRV)的三重PCR检测方法,为鳜鱼等养殖品种流行病学调查提供方法支撑。【方法】根据ISKNV MCP基因、SCRIV MCP基因和SCRV N基因设计3对特异性引物,对PCR扩增反应中的退火温度和引物用量进行优化,建立可同时检测ISKNV、SCRIV和SCRV的三重PCR方法。为验证该方法的敏感性和特异性(备测病毒为IPNV、GCRV、KHV、SGIV、NNV、TiLV和SVCV),对22份疑似感染ISKNV、SCRIV和SCRV的样品分别进行单一和三重PCR检测。【结果】成功建立了三重PCR检测方法,利用该方法可同时检测ISKNV、SCRIV和SCRV,特异性较好,对IPNV、GCRV、KHV、SGIV、NNV、TiLV、SVCV等无扩增;该方法敏感性好,对3种病毒核酸的检测下限均为0.01 ng/μL;利用该方法和3种病毒单一PCR方法同时对22份临床样品进行检测,结果显示2种方法吻合率为100%,其中ISKNV阳性率为27%、SCRIV阳性率为41%、SCRV阳性率为9%、ISKNV和SCRIV混合感染阳性率均为9%,无ISKNV、SCRIV和SCRV混合感染。【结论】建立的三重PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高等特点,可对这3种病毒进行快速鉴别诊断。
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- 关键词：传染性脾肾坏死病毒三重PCR
- 纳米酶在农业方向的研究进展
- 2024年
- 纳米酶作为一种具有类酶活性的新型纳米材料,在抗逆改良、食品检测、食品加工与保鲜、植物保护和种子处理等方向具有广泛的应用前景.文章对纳米酶的定义、分类及其在农业方向的应用进行了综述,对目前存在的问题进行了探讨,并对其未来的发展方向进行了展望.
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- 关键词：农业食品
- 锦鲤疱疹病毒PCR鉴定方法和保存方法
- 目的 探讨检测锦鲤疱疹病毒三种不同的PCR方法的比较以及不同保存条件对锦鲤疱疹病毒的稳定性的影响。方法： 根据OIE推荐的基因(TK基因和Sph基因)，设计合成3对特异性引物，针对胸苷激酶基因(TK)、聚合酶基因(Sph...
- 李莹莹潘厚军王庆付小哲石存斌
- 关键词：锦鲤疱疹病毒PCR
- 加州鲈弹状病毒三水株全基因组序列测定及分析被引量：2
- 2020年
- 【目的】对加州鲈弹状病毒弱毒三水株(MSRV-SS-7)及其母源株(MSRV-SS)进行全基因组克隆和测序分析。【方法】采用分段扩增方法对MSRV-SS-7及MSRV-SS基因组核心序列进行PCR扩增,第1轮根据鳜鱼弹状病毒(SCRV)基因序列(NC_008514.1)设计10对引物进行扩增并测序;在第1轮扩增产物测序、拼接基础上,设计8对引物进行第2轮扩增,拼接后获得基因组核心序列。同时用cDNA末端快速扩增法(RACE)获得3′和5′末端序列。采用Vector NTI 8.0对基因组核心序列和末端序列进行拼接,获得基因组全序列,使用Clone Manager 8.0对MSRV-SS-7和MSRV-SS进行序列比对分析;同时使用DNAMAN将基因组G基因序列转换为氨基酸序列,并通过MEGA 5.0与其他鱼类弹状病毒的G蛋白氨基酸序列进行进化树分析。【结果】MSRV-SS-7及其母源株MSRV-SS基因组全长均为11548 bp,包含N、P、M、G、L等5个结构基因,基因组结构为3′Leader-N-P-M-G-L-Trailer 5′;MSRV-SS-7与MSRV-SS全基因组中共有10处核苷酸不同。G蛋白进化分析表明,MSRV-SS-7及母源株MSRV-SS与SCRV亲缘关系最近,且与鲈鱼弹状病毒属(Perhabdovirus)聚为一支。【结论】克隆分析了MSRV-SS-7的全基因组序列,可以用于后续活疫苗的开发。
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- 关键词：弱毒株加州鲈全基因组序列G蛋白
- 鳜弹状病毒与传染性脾肾坏死病毒双重PCR检测方法的建立被引量：2
- 2020年
- 【目的】建立鳜弹状病毒(SCRV)和传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)的双重PCR检测方法。【方法】分别针对SCRV N基因和ISKNV MCP基因的保守区域设计特异性引物,通过优化退火温度和引物用量(μL)比,建立SCRV和ISKNV的双重PCR检测方法,并对该方法的敏感性和特异性进行检验。应用建立的双重PCR方法对20份临床样品进行单一和双重PCR检测,比较单一和双重PCR的检测结果。【结果】成功建立了SCRV和ISKNV双重PCR方法,该法特异性较强,对草鱼呼肠孤病毒(GCRV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)、神经坏死病毒(NNV)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)、新加坡石斑鱼虹彩病毒(SGIV)、罗非鱼湖病毒(TiLV)等鱼类常见病毒无扩增;敏感性较好,对2种病毒DNA的检测下限均为0.01 ng/μL。20份临床样品的双重PCR样品检测结果显示,3份为SCRV阳性,11份为ISKNV阳性,2份为SCRV和ISKNV混合感染,结果与单一PCR检测结果一致。【结论】建立的SCRV和ISKNV双重PCR检测方法特异性较强,敏感性较好,可用于鳜鱼SCRV与ISKNV的快速鉴别诊断和分子流行病学调查。
- 梁红茹范芷仪蔡秀珠付小哲林强刘礼辉黄志斌牛银杰林蠡李宁求
- 关键词：传染性脾肾坏死病毒双重PCR病毒检测
- 一种传染性脾肾坏死病毒弱毒疫苗株及其应用
- 本申请涉及病毒疫苗技术领域，尤其是涉及一种传染性脾肾坏死病毒弱毒疫苗株及其应用。本申请选取强毒株ISKNV DW，在CPB细胞进行连续传55代，发现ISKNV‑p55对鳜已无致病力，而且能提供100％的免疫保护。上述结果...
- 牛银杰李宁求付小哲梁红茹罗霞林强马宝福
- 阿米洛利在制备防治鳜弹状病毒感染的药物中的应用
- 本发明公开了一种阿米洛利在制备防治鳜弹状病毒感染的药物中的应用，属于药物技术领域。Na<Sup>+</Sup>/H<Sup>+</Sup>交换的依赖是巨胞饮的标志性特征，阿米洛利(EIPA)是Na<Sup>+</Sup>...
- 梁红茹付小哲林强罗霞牛银杰李宁求
