何国帮
- 作品数:1 被引量:7H指数:1
- 供职机构:湖北大学生命科学学院分子微生物与基因工程实验室更多>>
- 发文基金:武汉市青年科技晨光计划湖北省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 烟曲霉植酸酶基因的克隆及在毕赤酵母的高效表达被引量:7
- 2003年
- 根据文献报道的烟曲霉植酸酶序列,设计引物以烟曲霉CCTCCAF93044的总DNA为模板进行梯度PCR,扩增出了1条约1.4 kb的带,将该片段进行DNA序列测定,其序列与已报道的烟曲霉植酸酶序列完全一致,但只编码完整的成熟植酸酶序列。将该片段克隆到毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K上,获得表达质粒pHBM108。该质粒转化毕赤酵母KM71所得重组子经PCR验证后进行诱导表达,其中一重组子经144 h诱导,植酸酶表达量至少为1.25 mg/ml,比同类报道的表达量高出60%以上,以植酸钠为底物测得酶活为11.17U/ml。
- 张桂敏张晚鸣何国帮马立新
- 关键词:基因克隆毕赤酵母菌种质粒PCR扩增饲料添加剂