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血清肌红蛋白快速酶免疫分析诊断急性心肌梗死被引量：2: 2001年; 建立一种测定人血清肌红蛋白 ( Mb)的快速双位点酶免疫分析 ( ELISA) ,仅需 30 min即可给出结果 ,用以早期快速诊断急性心肌梗死 ( AMI)。要点为取得高亲和力、高滴度和高特异性的抗人 Mb抗体 ,Mb-ELISA的各项质量控制指标均符合要求。经初步临床使用 ,9例确诊为 AMI的患者 ,血清 Mb浓度为 2 4 4-955ng/m L;而7例非 AMI的患者 ,Mb均在 32 -78ng/m L正常范围之内 ,正常上限值定为 1 0 0 ng/m; 刘宏伟仲伟强王俊朝葛洪王仁芝; 关键词：酶免疫分析急性心肌梗死肌红蛋白血清诊断

不同直径山羊卵泡卵母细胞的发育特征及体外发育能力被引量：9: 2008年; 目的研究山羊卵巢表面不同直径卵泡卵母细胞的发育特征及体外发育能力,优化山羊早期胚胎体外生产系统。方法收集繁殖期和非繁殖期山羊卵巢,采集表面直径小于1.5 mm、1.5-2.5 mm、2.5-3.5 mm和大于3.5 mm4种卵泡卵母细胞,以Hoechst33342染色检查核发育阶段;同时,利用体外培养方法观察不同直径卵泡卵母细胞的成熟、受精和早期胚胎发育能力。结果直径小于1.5 mm卵泡卵母细胞主要处于GVI期;1.5-2.5 mm卵泡卵母细胞以GVⅠ、GVⅡ和GVⅢ期为主;2.5-3.5 mm卵泡卵母细胞在GVⅡ到GVⅣ期间平均分布;大于3.5mm卵泡卵母细胞主要为GVⅢ到GVBD期。体外培养实验发现,直径小于1.5 mm卵泡卵母细胞仅有个别能完成成熟和卵裂;大于1.5 mm卵泡卵母细胞具有核成熟能力,能完成成熟和受精,但1.5-2.5 mm卵泡卵母细胞的受精卵通常阻滞于4-8细胞期;当卵泡直径大于2.5 mm时,卵母细胞才能较好地支持胚胎继续发育,其桑/囊胚的比例达到30%以上。卵泡卵母细胞的发育特征和体外发育能力与动物所处的繁殖季节无关。结论山羊卵巢上直径大于1.5 mm卵泡卵母细胞具有核成熟能力,大于2.5 mm卵泡卵母细胞能支持早期胚胎继续发育。; 叶华虎袁菊芳刘宏伟张小飞隋丽华陈旖胡娟峰曾林; 关键词：卵母细胞发育能力山羊

犬细小病毒酶标试剂盒的研制被引量：11: 1994年; 用本研究室研制的犬细小病毒单克隆抗体和多克隆抗体．采用夹心ＥＬＩＳＡ原理，研制成功了犬细小病毒快速诊断试剂盒。对从临床病例中收集获得的４７份粪便样品分别用血凝试验和试剂盒进行了检测。两种方法的总符合率为９１．５％，对于明显阳性和阴性样品．两种方法符合率为１００％。试剂盒具有简便、快速、特异的优点。在３０分钟即可用肉眼判定结果。与ＣＤＶ、ＩＣＨＶ、ＦＰＶ、ＭＥＶ没有交叉反应。在４℃可保存６个月以上，室温可保存３个月以上。; 刘宏伟田克恭渠川玫时彦胜王树勤符兆英; 关键词：犬病细小病毒试剂盒

自制和进口试剂盒在犬细小病毒检测中的应用被引量：1: 1998年; 用本研究室研制的犬细小病毒单克隆抗体和多克隆抗体，采用夹心ＥＬＩＳＡ原理，研制成功犬细小病毒快速诊断试剂盒。对８７份犬粪便样品进行检测，并与ＨＡ法和美国ＩＤＥＸＸ公司研制的ＥＬＩＳＡ试剂盒进行比较。结果表明，与ＨＡ法相比，自制试剂盒的敏感性为９３．３％，特异性为１００％，总符合率为９５．４％；与美国试剂盒相比，自制试剂盒的敏感性为１００％，特异性为８４．６％，总符合率为９５．０％，达到国外同类产品的水平。; 田克恭遇秀玲吴娜刘宏伟范薇隋丽华; 关键词：犬细小病毒试剂盒

不同直径山羊卵泡卵母细胞的发育特征及体外发育能力: 目的研究山羊卵巢表面不同直径卵泡卵母细胞的发育特征及体外发育能力，优化山羊早期胚胎体外生产系统.方法收集繁殖期和非繁殖期山羊卵巢，采集表面直径小于1.5 mm、1.5 - 2.5 mm、2.5 - 3.5 mm和大于...; 叶华虎袁菊芳刘宏伟张小飞隋丽华陈旖胡娟峰曾林; 关键词：卵母细胞发育能力山羊

用接手臂的Sepharose 4B柱亲和层析纯化抗人绒毛膜促性腺激素抗体: 1998年; 目的：克服亲和层析纯化抗人绒毛膜促性腺激素抗体（抗ｈＣＧ抗体）ＩｇＧ中载体与配体联接时不良的空间效应，以提高亲和层析的效率。方法：用６－氨基己酸为手臂通过溴化氰连接到Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ上形成一种新的层析介质，然后将ｈＣＧ与之偶联用以纯化抗ｈＣＧ的抗体ＩｇＧ。结果：用该种亲和层析介质纯化的抗ｈＣＧ抗体ＩｇＧ回收率及免疫滴度均高于无手臂的亲和层析介质（活性回收率平均增加２２．５％，比活性平均增加５５．６％）。结论：用接手臂层析介质纯化抗ｈＣＧ抗体ＩｇＧ是一种比较好的方法。; 史燕燕焦有烈刘宏伟; 关键词：促性腺激素绒毛膜纯化

抗人绒毛膜促性腺激素单克隆抗体的研制与鉴定: 1996年; 利用常规杂交瘤技术制备了２株抗人绒毛膜促性腺激素（ｈＣＧ）的杂交瘤细胞。ＥＬＩＳＡ结果表明，单克隆抗体ＩＤ５和４Ｄ５均与人ｈＣＧ有特异性反应，腹水效价分别为３．２×１０－５、６．４×１０－５，均属于ＩｇＧ１亚类。与人促卵泡激素（ｈＦＳＨ）和人促黄体激素（ｈＬＨ）的交叉反应呈阴性。免疫转印结果显示能识别相对分子质量为２４×１０３ｕ的ｈＣＧ－β链条带。亲和常数分别为１．０１×１０７Ｌ／ｍｏｌ、４．４３×１０７Ｌ／ｍｏｌ。; 史燕燕刘宏伟陈娟安星兰刘会君高秀亮焦有烈; 关键词：绒毛膜促性腺激素单克隆抗体

利凡诺方法分离纯化犬血浆蛋白络合及解离条件探讨: 2012年; 目的普通犬血浆和高免血清分别是白蛋白和特异性免疫球蛋白分离纯化的原材料,针对不同的血浆确立相应的络合条件和解离条件,以分离纯化白蛋白和丙种球蛋白。方法血浆按1∶1体积加入利凡诺溶液,用2%Na2CO3调pH值,使犬血浆与利凡诺进行充分络合;上清液两次络合后解离,获得丙种球蛋白;沉淀解离获得白蛋白。分别对上清液、两次解离液进行蛋白浓度、纯度的测定。结果确定pH 8.5,室温络合2 h,利凡诺浓度在2.3%时为白蛋白的最佳络合条件;pH 6.0,室温络合2 h,利凡诺浓度2.3%为丙种球蛋白最佳络合条件。0.6%氯化钠,0.25%辛酸钠,pH 1.37为白蛋白解离最佳条件;0.85%氯化钠,1.3%甘氨酸,pH 6.8为丙种球蛋白的最佳解离条件。结论利用利凡诺方法,可以成功分离和纯化犬白蛋白和丙种球蛋白。; 隋丽华陈旖李瑞生刘宏伟赵彦斌张小飞黄永莉刘红燕刘永梅叶华虎; 关键词：犬血浆分离纯化

犬细小病毒胶体金免疫层析快速诊断试纸条的研制被引量：2: 2002年; 犬细小病毒性肠炎是由犬细小病毒(CPV)引起的犬的一种急性烈性传染病。临床表现以呕吐、出血性肠炎、严重的脱水和非化浓性心肌炎为特征。发病急,病程短,死亡率高(病死率为10%—50%)。及早确诊是提高治愈率的关键、本实验室采用胶体金免疫层析方法研制成功了犬细小病毒胶体金史疫层析快速诊断试纸条。该试纸条与原来的酶联试剂盒相比具有快速、简便、灵敏、特异之优点。并且给出结果直观、普通人员不用培训即可使用,适用于宠物门诊及用户自测,为临床兽医诊断"犬细小病毒病"提供了一个简便快速灵敏手段。; 刘宏伟邱旭方王俊朝仲伟强王仁芝耿志贤; 关键词：犬细小病毒胶体金单克隆抗体

犬细小病毒抗原变异株的分离与鉴定被引量：1: 2006年; 目的:从犬粪便病料中分离和鉴定犬细小病毒(can ine parvovirus,CPV)抗原变异株CPV-2 a和CPV-2b。方法:将疑似犬细小病毒感染的病犬粪便接种猫肾细胞,进行病毒分离、常规病毒学鉴定和分子生物学鉴定。结果:常规病毒学鉴定和分子生物学鉴定表明,分离得到5株犬细小病毒抗原变异株,其中2株为CPV-2 a,3株为CPV-2b。结论:本研究分离的5株犬细小病毒为研究CPV变异及制备CPV特异性诊断试剂奠定基础。; 杨敬刘宏伟刘大伟战大伟范薇隋丽华孙岩松; 关键词：犬细小病毒

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