叶治家
- 作品数：43 被引量：141H指数：6
- 供职机构：第三军医大学军事预防医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市科技攻关计划重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 胆固醇转运相关基因NPC1、NPC2调节造血前体细胞的增殖和分化
- 2017年
- 目的采用NPC1、NPC2基因敲低的造血前体细胞(erythroid myeloid lymphoid,EML)作为模型,探讨NPC1、NPC2对EML细胞增殖、分化的影响。方法通过NPC1 shRNA、NPC2 shRNA重组慢病毒感染EML细胞获得NPC1、NPC2基因有效沉默的EML细胞模型。利用该模型以Filipin染色检测NPC1、NPC2基因敲低后对EML细胞内胆固醇分布的影响,采用CCK-8和台盼蓝染色检测细胞增殖,采用流式细胞仪检测NPC1、NPC2基因沉默后EML细胞干性标志物CD34、sca-1、c-kit及TER-119、CD11b、B220的变化,采用Western blot检测造血干细胞因子(stem cell factor,SCF)刺激细胞后c-kit磷酸化的改变。结果成功构建NPC1、NPC2基因沉默的EML细胞模型,NPC1、NPC2基因在mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.01)。NPC1、NPC2敲低的EML细胞中出现胆固醇蓄积,且在NPC1敲低的EML细胞模型中胆固醇蓄积更显著。沉默NPC1、NPC2基因后使得EML细胞增殖减慢(P<0.01),并且能够降低EML细胞CD34、sca-1和TER-119、B220的阳性率(P<0.01)。经SCF刺激后NPC1基因沉默的EML细胞中c-kit的磷酸化降低显著(P<0.01),但在NPC2基因沉默的EML细胞中c-kit磷酸化的改变差异无统计学意义。结论胆固醇转运相关基因NPC1通过调节细胞胆固醇流动参与了EML细胞的增殖和分化调控。
- 李晶邹云丁王静刘婷婷刘进张楚楚姬凌陈洁平陈亮叶治家
- 关键词：细胞分化
- 表达人外源胰岛素原的人造血干细胞及其应用
- 本发明属于医学分子生物学领域，具体涉及一种表达人外源胰岛素原的人造血干细胞及其制备方法和应用。本发明的表达人外源胰岛素原的人造血干细胞是采用DNA重组技术，将人胰岛素原基因克隆至慢病毒表达载体中，获得能够表达人胰岛素原基...
- 叶治家韩月雯汤玲
- 文献传递
- 放烧复合伤后白细胞介素-3基因的表达被引量：5
- 1997年
- 为了进一步探讨放射损伤和放烧复合伤引起造血功能障碍的机理，研究了作为造血调控的重要细胞因子——白细胞介素－３（ＩＬ－３）基因在放射损伤、烧伤、放烧复合伤后不同时相点基因表达的变化。方法ｍＲＮＡ抽提、分子杂交、细胞培养、ＩＬ－３生物活性测定、３Ｈ－ＴｄＲ参与实验等生物技术方法。结果放射损伤后ＩＬ－３基因的表达受到明显抑制，照射后第３，１４天表达的ＩＬ－３ｍＲＮＡ减少了７７％，２１％；ＩＬ－３蛋白减少了８３％，３６％。烧伤对ＩＬ－３基因表达的影响呈双相性，烧伤后第３天ＩＬ－３表达受到抑制；烧伤后第１４天ＩＬ－３的表达增强；放烧复合伤后ＩＬ－３的表达受到抑制，其抑制程度介于放射损伤与烧伤之间，各观察组ＩＬ－３基因表达的变化与骨髓有核细胞数的变化呈平行关系。结论放射损伤、放烧复合伤后ＩＬ－３基因表达被抑制可能是急性放射病引起造血功能障碍的原因之一。
- 叶治家董燕麟罗成基曹廷兵曾昭铸程天民
- 关键词：烧伤放烧复合伤白细胞介素-3
- 人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶C端片段在大肠杆菌中的表达及其抗体的制备
- 2000年
- 目的 :为了表达人ACATC端片段并制备其抗体。方法 :将编码人ACAT羧基端包含第二跨膜(463 550氨基酸残基)的cDNA片断克隆至不同的大肠杆菌表达载体中 ,构建了系列表达质粒 ,并在多种大肠杆菌中进行了表达研究。结果 :在详细探索表达条件的基础上 ,经温敏诱导 ,成功地在大肠杆菌AR68中表达了N端融合ProteinABCdomain的人ACAT羧基末端包含第二个跨膜区的片段 ,表达量约20mg/L菌液。通过优化纯化条件 ,经Sepharose4B IgG亲和层析柱分离纯化得到表达产物 ,并制备获得其阳性抗血清。结论 :这些工作为进一步表达完整的ACAT蛋白、研究ACAT基因表达调控及其结构与功能的关系奠定了基础。
- 叶治家程天民江智红李伯良
- 关键词：酰基辅酶AACAT高胆固醇血症动脉粥样硬化
- 人IL-16在大肠杆菌中的融和表达
- 2002年
- 目的 将人IL 16cDNA克隆至原核融合表达载体PinpointTMXa 3上 ,并进行表达研究。方法 含IL 16cDNA的质粒IL 16/PGEM 3ZF(+ )和PinpointTMXa 3原核融合表达载体经酶切消化、目的DNA片段的分离、重组连接、筛选、序列分析等系列操作 ,获得重组质粒PinpointTMXa IL 16,将质粒PinpointTMXa IL 16转化至大肠杆菌JM10 9,用IPTG诱导表达JM10 9工程菌 ,Westernblotting检测表达产物。结果 IL 16cDNA成功克隆至融合表达载体PinpointTMXa 3 ,Westernblotting检测经诱导含有PinpointTMXa IL 16质粒的JM10 9细菌 ,有IL 16融合蛋白的表达 .结论 成功地表达了IL 16融合蛋白。
- 曹廷兵叶治家甘立霞钟小林巩燕彭家和
- 关键词：IL-16克隆大肠杆菌
- 人PPARγ-LBD cDNA的克隆及其在大肠杆菌中的表达纯化被引量：2
- 2004年
- 从正常中国人的面部脂肪组织分离总RNA,采用RT-PCR获得人的PPARγ-LBD cDNA,然后克隆至原核表达载体pET28a,构建高效原核表达质粒pET28a-PPARγ-LBD,序列分析表明正常中国人的PPARγ-LBD cDNA序列与Gene Bank报道的序列一致。把构建的pET28a-PPARγ-LBD质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG进行诱导表达,Western blot检测表达产物,在相对分子质量34kDa处有特异的蛋白表达条带,表达蛋白以可溶性和包涵体方式存在。在N末端融合6×His纯化标签的表达产物用Ni^(2+)-NTA离子交换树脂进行纯化,纯化蛋白进行SDS-PAGE纯度分析大于90％以上。因此,获得了正常中国人的PPARγ-LBD cDNA序列,并且在E.Coli中成功表达和纯化了PPARγ-LBD蛋白。
- 曹廷兵叶治家巩燕彭家和江渝
- 关键词：克隆大肠杆菌RT-PCR过氧化物酶体增生物激活受体
- 人可溶性TRAILcDNA的克隆及新型原核表达载体的构建
- 2002年
- 目的 克隆人可溶性TRAIL (sTRAIL)cDNA并构建其原核表达载体 ,为制备新型抗癌分子创造条件。方法 提取HL 60细胞总RNA ,经RT PCR扩增编码人TRAIL 114～ 2 81氨基酸残基的cDNA序列 ,将其克隆至载体pUC19进行序列测定 ,然后构建于新型原核表达载体pQE 80L中。结果 RT PCR扩增得到了 5 0 4bp的DNA片段 ,序列分析表明与GeneBank中报道的编码人TRAIL 114～ 2 81氨基酸残基的cDNA序列完全一致。结论 sTRAILcDNA的克隆及其原核表达载体的构建 ,为进一步制备具有抗肿瘤活性的sTRAIL奠定了基础。
- 李蓉芬何凤田高会广陈姗江渝叶治家彭家和陈敏
- 关键词：STRAILRT-PCR克隆CDNA原核表达载体
- 军事训练中暑的关键干预措施被引量：3
- 2017年
- 中暑是普遍存在于消防员、运动员和部队战士中的一种急症,从事这些职业的人员均需在高温或高湿环境下进行强体力劳动。军人在军事演习或是执行任务过程中对体力要求较高,且通常不能及时休息,加之特殊的防护服和防护装备的使用减少了机体散热,这些极端条件增加了部队战士遭受热损伤的风险。
- 叶治家刘婷婷
- 关键词：劳力性热射病流行病学预防措施
- 核受体LXRα基因的克隆及表达
- 肝X受体(liver X receptors,LXRs)属受核体超家族的一员,最初因其配体未知而被划为孤儿受体之列.LXRs有α、β两种亚型.LXRα主要在脂代谢起重要作用的组织中特异表达,其中在肝脏内表达水平最高,故而...
- 曹廷兵叶治家巩燕彭家和张艳
- 文献传递
- 人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶N端片段在大肠杆菌中的表达
- 1999年
- 目的：重组表达人ＡＣＡＴ的Ｎ端片段。方法：将编码ＡＣＡＴ氨基末端包含第一个跨膜区（１～１９６ａａ）的ｃＤＮＡ片段克隆至不同的大肠杆菌表达载体中，构建了多种大肠杆菌表达质粒，再转化至大肠杆菌中进行表达研究。结果和结论：在详细摸索表达条件的基础上，经温敏诱导，成功地在大肠杆菌ＡＲ６８中表达了Ｎ端融合ｐｒｏｔｅｉｎＡＢＣｄｏｍａｉｎ的人ＡＣＡＴ氨基末端包含第一个跨膜区的片段，表达量约２０ｍｇ／Ｌ菌液。为进一步表达完整的ＡＣＡＴ蛋白。
- 叶治家程天民江智红李伯良
- 关键词：基因表达大肠杆菌ACAT
