吴书军
- 作品数:5 被引量:19H指数:3
- 供职机构:上海生物制品研究所更多>>
- 发文基金:上海市科委重大科技攻关项目上海市青年科技启明星计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学农业科学更多>>
- 冻干人用狂犬病纯化疫苗稳定性观察被引量:2
- 2004年
- 目的 考察用Vero细胞微载体技术研制的冻干人用狂犬病纯化疫苗的稳定性。方法 对疫苗在2~ 8℃放置 2 .5~ 4年的外观、溶解时间、水分、溶解后pH和效力进行检测 ,并进行 37℃ 2~ 4周和 4 5℃ 2周的热稳定性试验。结果 各项检测结果均达到 2 0 0 0年版《中国生物制品规程》的要求。
- 邵益斌吴书军李嘉韩玉英曾蓉芳
- 关键词:狂犬病疫苗微载体纯化
- Vero细胞和流感病毒在无血清条件下的微载体培养被引量:6
- 2007年
- 目的探索Vero细胞和流感病毒在无血清条件下的微载体培养条件。方法在搅拌瓶中,选择合适的微载体,在无血清条件下培养Vero细胞和流感病毒。观察Vero细胞的生长状况,并检测流感病毒的血凝滴度。结果Vero细胞在Cytodex 3上生长最好,每个微载体上接种10个细胞为最佳接种浓度,以MOI=0.005和0.010 CCID50/细胞接种H1N1流感病毒后,在72h时,培养上清病毒血凝滴度达到最高。结论无血清条件下,Vero细胞在Cytodex 3上生长良好,流感病毒能在Vero细胞上成功培养。
- 何春艳陈列胜吴书军唐丽丽
- 关键词:无血清培养微载体流感病毒
- 非洲绿猴肾细胞(Vero)无血清细胞库的建立被引量:4
- 2007年
- 目的建立Vero细胞无血清细胞库。方法采用序贯适应和直接适应方法,将Vero细胞从有血清培养适应到无血清培养,建立Vero细胞无血清细胞主库和工作库,采用STR图谱并结合染色体计数对Vero细胞进行鉴别,并对Vero细胞无血清细胞库进行致瘤性和病毒外源因子检定。结果两种方法均能使Vero细胞适应到无血清培养,其中直接适应法可大大缩短适应代次,因此选择其作为建立Vero细胞无血清细胞库的方法。Vero细胞无血清主库和工作库的STR图谱与日本细胞库公布的Vero细胞STR图谱完全一致,Vero细胞库无外源因子污染,无致瘤性。结论Vero细胞无血清细胞库可用作生物制品生产用候选细胞基质。
- 何春艳唐丽丽李嘉韩玉英吴书军周琳婷应通锋秦洁
- 关键词:非洲绿猴肾细胞无血清培养细胞库
- Vero细胞流感病毒的大规模培养和纯化被引量:4
- 2008年
- 目的:采用反应器技术以细胞为基质培养流感病毒,并探索其纯化工艺。方法:采用5L反应器无血清条件下以Vero细胞为基质培养流感病毒,病毒收获后,经灭活、澄清,采用阴离子柱去除宿主DNA,亲和柱浓缩流感病毒,最后采用分子筛三步层析法进行纯化。结果:整个纯化工艺HA回收率达102%,蛋白降低率为95.3%,宿主蛋白降低率为99.77%,DNA的降低率为99.99%。结论:成功建立了一种细胞流感病毒的纯化工艺。
- 何春艳陈则吴书军唐丽丽秦洁
- 关键词:VERO细胞流感病毒纯化
- 无血清培养MDCK细胞生产狂犬病病毒条件的初步优化被引量:3
- 2009年
- 目的开发一种适应于MDCK细胞生长和狂犬病病毒生产的无血清培养基MDCK-SFM,并对MDCK细胞生产狂犬病病毒的条件进行初步优化。方法方瓶培养MDCK细胞,考察混合脂类、微量元素、氢化可的松、酵母抽提物和鱼胨水解物对MDCK细胞生长的影响。转瓶微载体批培养MDCK细胞,以获得细胞在不同培养基中的生长动力学。以不同的感染量(MOI)和感染时间(TOI)接种狂犬病病毒,确定MDCK细胞感染狂犬病病毒的最佳MOI与TOI。比较含10%NCS的DMEM、VP-SFM和MDCK-SFM培养基培养MDCK细胞生产狂犬病病毒的效果。结果混合脂类有利于细胞贴壁,酵母抽提物和鱼胨水解物可不同程度地促进MDCK细胞生长。以MDCK-SFM培养基培养的MDCK细胞最高密度可达14.3×105个/ml。在MOI=0.5、TOI=72h的条件下,可得到最高的病毒滴度。MDCK-SFM培养基培养MDCK细胞生产狂犬病病毒,可获得较高的病毒滴度(5.13lgFFU/ml)。结论MDCK-SFM培养基适于MDCK细胞生长和培养狂犬病病毒,且成本低,成分比较明确,在MDCK细胞高密度培养生产狂犬病疫苗方面具有较高的应用价值。
- 樊庆帅牛红星吴书军张旭谭文松
- 关键词:MDCK细胞微载体培养狂犬病病毒