宛煜嵩
- 作品数：145 被引量：360H指数：12
- 供职机构：中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家科技重大专项转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生化学工程更多>>
- 转基因玉米Bt11品系特异性荧光RPA检测被引量：6
- 2017年
- 重组酶聚合酶介导的等温扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)作为一种新型等温扩增技术,具有反应时间短、灵敏度高、特异性强等特点,在转基因检测领域得到了广泛关注。本研究针对转基因玉米Bt11外源插入链接区域设计筛选了特异性引物和探针,建立了快速准确的荧光RPA检测方法,在39℃条件下,20 min内完成扩增并且能够实时监测,可以准确有效地检测到50个拷贝的靶标片段。而且,对于背景复杂的植物基因组DNA能够得到准确的扩增曲线。本研究不仅可以满足常规实验室检测,通过RPA便携式仪器,还可以满足转基因植物现场检测,具有广阔的应用前景。
- 李凯金芜军李亮李亮刘卫晓苗朝华
- 关键词：转基因检测
- 转基因水稻mfb-MH3301的外源插入片段全序列及其旁侧序列
- 本发明在专利CN103667476A的基础上公开了转基因水稻mfb‑MH3301的外源插入片段全序列及其旁侧序列。本发明通过hiTAIL‑PCR和LA‑PCR扩增的方法获得外源插入片段和水稻序列连接区的3’端旁侧序列，其...
- 苗朝华董美高进宛煜嵩刘卫晓王迪梅英婷王锋金芜军
- 文献传递
- 用于检测转基因玉米双抗12-6的RPA引物探针组合、试剂盒及检测方法
- 一种转基因玉米双抗12‑6的RPA检测引物与探针组合、试剂盒及检测方法，根据外源插入DNA序列与玉米基因组的连接区域设计大量RPA引物，从中筛选出一对可快速有效检测出转基因玉米双抗12‑6成分的引物探针组合。以转基因玉米...
- 宛煜嵩孟丽霞
- 文献传递
- 转基因水稻mfb-MH3301外源基因纯合/杂合状态的检测方法
- 一种转基因水稻mfb‑MH3301外源基因纯合/杂合状态的检测方法。所述引物的核苷酸序列如序列表SEQ ID No.1、SEQ ID No.2和SEQ ID No.3所示。本发明还公开了其检测方法和检测试剂盒，本发明检测...
- 苗朝华董美高进宛煜嵩刘卫晓王迪梅英婷王锋金芜军
- 文献传递
- 荧光RPA技术检测转基因水稻科丰6号被引量：16
- 2014年
- 目前转基因作物检测通常使用PCR检测方法,PCR检测耗时较长且需要精密控制温度循环的仪器,不适于现场检测。本研究应用重组酶聚合酶等温扩增技术（recombinase ploymerase amplification,RPA）,根据转基因抗虫水稻科丰6号插入连接区整合序列设计筛选了一套可用于RPA检测的引物及探针组合,建立了转基因抗虫水稻科丰6号及其衍生品种转化体特异性荧光RPA检测方法。研究结果表明本方法可稳定特异检出样品中500个拷贝的靶标分子,利用实时荧光检测简化了检测程序,使检测可在10~20 min内完成,与常规PCR检测需要数小时相比极大地缩短了检测时间。使用锂电池驱动的便携式扩增检测仪,对于野外转基因现场检测具有极大的应用价值。
- 徐潮李亮金芜军宛煜嵩
- 关键词：RPA转基因检测
- 抗虫蛋白Cry 3Bb胶体金免疫层析速测试纸条及其使用方法
- 本发明提供了一种胶体金免疫层析速测试纸条，所述试纸条包括底板以及粘着在底板上依次相连的样品垫、金标垫、反应膜和吸水垫，所述金标垫包被抗虫蛋白Cry 3Bb单克隆抗体‑胶体金结合物，该试纸条特异性强，灵敏度高，并且，操作简...
- 金芜军刘卫晓宛煜嵩苗朝华黄卫红董美高进王迪孟丽霞赵伟玲文婷婷
- 一种用于转基因玉米核酸含量分析的质粒参考物及核酸含量分析方法
- 一种用于核酸含量分析的质粒参考物的构建方法，是将核酸样品的内标基因和待检测基因，又称外源基因共同构建到质粒载体中，替代基因组DNA，实现对待测样品的含量确定。连入到质粒的两个片段中间含有酶切位点，质粒DNA提取纯化后，用...
- 李亮董美金芜军宛煜嵩刘卫晓李凯王迪
- 文献传递
- 中国转基因水稻的研究进展及产业化问题分析被引量：15
- 2010年
- 水稻在我国粮食生产和消费中占有重要地位,也是世界上最重要的粮食作物之一。水稻转基因研究已成为当前国内外植物分子生物学和作物育种研究的热点。目前我国转基因水稻研究处于国际领先水平,有望成为转基因抗虫棉之后又一个进入产业化的转基因粮食作物,这可能将在确保我国粮食安全中发挥重要贡献。从国内外转基因水稻研发概况、我国Bt抗虫水稻生物安全评价两方面综述了我国转基因水稻产业化的前景,并在此基础上对产业化提出相关建议与对策。
- 孙国庆金芜军宛煜嵩林敏
- 关键词：转基因水稻
- 水稻成熟胚盾片诱导愈伤组织再生体系的建立被引量：20
- 2002年
- 采用水稻成熟胚盾片诱导愈伤组织作为分化再生的外植体,通过优化激素组合和调节培养基渗透压,建立了适合水稻遗传转化的高效再生体系.将水稻成熟胚诱导愈伤组织分化再生的过程划分为3个不同时期,即成熟胚盾片愈伤组织诱导,胚性细胞诱导保持,胚性愈伤组织分化再生.以Culture I(LS+2,4-D 2.0 mg/L)诱导成熟胚盾片愈伤组织,愈伤组织剥离后接种于CultureⅡ-3(LS+2,4-D 2.5 mg/L+山梨醇3g/L)上诱导胚性愈伤组织,继代后接种于CultureⅢ-2(MS+NAA 0.5 mg/L+6-BA1.0 mg/t+Kinetin 2.0 mg/L+山梨醇8g/L)上分化成苗.培养结果表明,该再生体系所获得的胚性愈伤组织分化再生率均在60%～80%之间.利用本研究建立的高效再生体系建立水稻外源基因遗传转化系统,使转化过程中所得转化愈伤组织高效再生成苗,从而顺利获得转化植株,可以提高水稻外源基因转化的效率,为水稻品种的定向遗传改良提供优良的遗传转化技术体系.
- 伍成祥宛煜嵩徐俊苏金方宣钧
- 关键词：水稻成熟胚愈伤组织
- 草甘膦高抗菌株的分离、鉴定及生理生化特性研究被引量：8
- 2009年
- 从采自新疆的土壤中分离到一株草甘膦抗性菌株P23,该菌株能够耐受200mmol/L的草甘膦,可在最高含350mmol/L草甘膦的培养基中生长。在草甘膦浓度为100~200mmol/L之间时,菌株生长迅速,最适pH为7.0,最适生长温度为37℃,具有氨苄青霉素、卡那霉素抗性。用16S rDNA通用引物,经PCR扩增、测序得到P23的16S rDNA序列,该序列在GenBank的登录号为FJ374126。在NCBI中经BLAST后发现与苍白杆菌属（Ochrobactrum）的16S rDNA序列相似性达到99%。结合各项生理生化指标鉴定结果将菌株命名为人苍白杆菌P23（Ochrobactrum anthropiP23）。
- 李海红宛煜嵩金芜军王英典林敏
- 关键词：草甘膦RDNA人苍白杆菌
