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日本囊对虾Cathepsin B基因的克隆与原核表达: ＜正＞日本囊对虾（Marsupenaeus japonicus）是我国沿海重要的经济养殖种类,性别控制一直是水产遗传育种的研究热点。本实验对由双向电泳与质谱技术鉴定的日本囊对虾性腺差异蛋白中的组织蛋白酶B（Catheps...; 岳亮王艺磊张子平林鹏邹志华谢芳靖陈锦民冯建军; 文献传递

日本囊对虾性腺差异的蛋白质组学及其差异表达基因Cathepsin B的分析: 日本囊对虾（Marsupenaeus japonicus）系甲壳动物，是我国东南沿海重要的经济养殖种类。近年来，随着对虾养殖业以及分子生物学技术的快速发展，与对虾性腺发育相关基因克隆与表达逐渐成为水产遗传育种的重点。但是...; 岳亮; 关键词：日本囊对虾蛋白质组学双向电泳组织蛋白酶B 实时定量PCR; 文献传递

日本囊对虾性腺差异蛋白质组学研究: ＜正＞双向电泳技术（two-dimensional electeophoresis）是分离复杂蛋白最有效的方法之一。近年来,双向电泳技术在水产生物研究中不断被应用。本研究采用实验室制备的一种能同时提取RNA、DNA和Pr...; 岳亮王艺磊张子平林鹏冯建军邹志华谢芳靖; 文献传递

差异蛋白质组学技术在水生动物应激反应研究中的应用: 2011年; 差异蛋白质组学是蛋白质组学的主要研究内容之一,着重于研究特定因素引起的不同样品间蛋白质组的差异,揭示并验证蛋白质组在生理或病理过程中的变化,并从理论上推断造成这种变化的原因。近年来,差异蛋白质组学已逐步应用到水生动物的应激反应研究中。在周围环境发生变化,如非生物环境因子改变以及病原微生物感染时,水生动物会通过特异的应激反应削弱或者抵抗其危害,其与环境的相互作用机理可通过蛋白质的差异表达体现出来。本文就差异蛋白质组学技术在水生动物应激反应研究中的应用及进展进行了回顾和综述。; 岳亮王艺磊张子平冯建军林鹏; 关键词：差异蛋白质组学水生动物

日本囊对虾组织蛋白酶B基因的原核表达及纯化: 2017年; 采用原核表达的方法得到日本囊对虾(Marsupenaeus japonicus)组织蛋白酶B基因的重组蛋白。以日本囊对虾卵巢组织为试验材料,采用双标签(GST和His)的方法,用带有EcoRⅠ和NotⅠ酶切位点以及6×His-tag的特异引物扩增Cathepsin B的开放阅读框,并连接至表达质粒pGEX-4T-2中。将重组表达质粒导入大肠杆菌BL21中,在30℃条件下,用终浓度为1mmol/L的IPTG(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside)诱导5h得到最佳诱导量,His亲和柱进行纯化,纯化蛋白依次于8、6、4、2、1、0 mol/L尿素缓冲液中梯度透析,得到复性后可溶于水的重组蛋白,经SDS-PAGE检测,得到单一条带,其分子质量约为63ku。取冻干后的蛋白制备多克隆抗体,抗体效价达50 000,经Western blot检测,同样可在63ku处得到该条带,表明制备的组织蛋白酶B(CB)多克隆抗体具有特异性,该抗体可特异识别CB蛋白。; 黄媛王艺磊张子平岳亮冯建军郭松林林鹏; 关键词：日本囊对虾卵巢原核表达多克隆抗体

日本囊对虾性腺蛋白质双向电泳的样品制备方法的改进被引量：5: 2011年; 采用一种能同时提取RNA、DNA和Protein的试剂(RDP试剂)进行日本囊对虾性腺总蛋白质的制备,并通过双向电泳(2-DE)技术与传统的裂解液法比较提取效果.RDP法所得2-DE图谱清晰,条纹少,蛋白质点数多,而裂解液法存在横向和纵向拖尾,其碱性端蛋白质点大量缺失,说明RDP法能有效去除蛋白质样品中盐离子、脂类等干扰成分.结果不仅为后续的日本囊对虾性腺蛋白质组学研究提供了技术保障,也为其他甲壳类动物性腺总蛋白质的提取提供了借鉴.; 岳亮王艺磊张子平冯建军邹志华谢芳靖林鹏; 关键词：双向电泳日本囊对虾

日本囊对虾性腺蛋白质双向电泳的新型样品制备方法: 采用一种能同时提取RNA、DNA和Protein的试剂(RDP试剂)进行日本囊对虾性腺蛋白质的制备，并通过双向电泳(2-DE)技术与传统的裂解液法比较提取效果.RDP法所得2-DE图谱清晰，条纹少，蛋白点数多，而裂解液法...; 岳亮王艺磊张子平冯建军邹志华谢芳靖林鹏; 关键词：双向电泳日本囊对虾

差异蛋白质组学在水生动物免疫研究中的应用被引量：1: 2009年; 差异蛋白质组学是指依据蛋白质样品在不同时期、不同组织、不同状态或不同外界条件下表达不同，来筛选、鉴定蛋白质，可以通过对差异蛋白质的分析鉴定研究编码该差异蛋白的基因，扩展对该基因功能的研究，也可以结合功能蛋白质组学研究，发现新的蛋白质，完善已有的蛋白质组数据库。差异蛋白质组学技术主要有双向电泳技术（2-DE）、荧光双向差异凝胶电泳技术（DIGE）、多维色谱技术（HPLC）以及蛋白质芯片技术（Protein Chip）。; 林鹏岳亮邹志华冯建军王艺磊; 关键词：差异蛋白质组学动物免疫功能蛋白质组学蛋白质组学技术双向电泳技术

差异蛋白质组学技术及其在水生动物应激反应研究中的应用: 蛋白质组学是蛋白质组学的主要研究内容之一.主要通过比较不同状态下组织或细胞的蛋白质表达的变化,揭示其重要生理过程的机理.本文主要介绍了差异蛋白质组学的分析研究技术,对非生物环境因子改变、内分泌干扰化学物及病原微生物感染引...; 岳亮王艺磊张子平冯建军林鹏; 关键词：水生动物差异蛋白质组学

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岳亮