张海霞
- 作品数：7 被引量：51H指数：4
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- 相关领域：生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>
- 温度、光强和pH对条斑紫菜孢子体和配子体类囊体膜上光系统活性的影响被引量：8
- 2005年
- 光合作用研究中,对于个体发育过程中类囊体膜蛋白结构和功能的变化所知甚少,其中的一个限制因素是能否纯化得到大量高活性的稳定且均一的膜蛋白。作者以条斑紫菜(Porphyra yezoensis)2个不同发育阶段(孢子体和配子体)作为研究对象,分离得到了孢子体和配子体的类囊体膜,在不同的温度、光强和pH下,对其类囊体膜上的光系统活性进行了研究。结果表明,孢子体和配子体的PSI活性均随温度和光强的升高而呈现一个先升高后降低的趋势,在温度18℃,光强为2 320 lx时具有最高的PSI活性。而孢子体和配子体的PSII活性随温度和光强的变化趋势不明显,孢子体PSII活性在温度18℃,光强为2 320 lx 时最高,配子体PSII活性在温度13℃,光强为2 800 lx时最高。孢子体PSI在酸性条件下较活跃,在pH 5.4时具有最高的PSI活性,配子体PSI在碱性条件下较活跃,PSI活性在pH 10.4时最高;孢子体PSII活性随pH的升高呈现一个先升高后降低的趋势,配子体PSII活性随pH变化趋势不明显,但都在pH 8.0处活性最高。
- 梁军张海霞Guenter FritzschHartmut Michel彭国宏
- 关键词：类囊体膜条斑紫菜
- 条斑紫菜孢子体与配子体光合系统Ⅱ(PSⅡ)稳定性研究被引量：2
- 2007年
- 膜蛋白是生物领域研究中的热点和难点。在光合作用研究中,对于藻类个体发育过程中光合膜蛋白结构和功能的变化所知甚少,其中的一个限制因素是能否纯化得到大量高活性的稳定且均一的光合膜蛋白。作者从条斑紫菜(Porphyra yezoensis)孢子体和配子体中分离纯化得到光合系统(PSⅡ)复合物,并研究了其完整性和放氧活性。结果表明,孢子体和配子体的PSⅡ复合物,在4℃条件下保存比在-80℃下保存放氧活性高,稳定性高。配子体PSⅡ复合物,在-80℃保存第6天就已经没有放氧活性,而孢子体PSⅡ复合物仍有放氧活性。对4℃下保存的PSII复合物进行分子筛柱层析,室温吸收光谱测定以及放氧活性测定,发现随着放氧活性逐渐降低,蛋白大分子有聚合现象。室温吸收光谱表明经过长期的保存,吸收峰向短波长方向偏移。
- 柳葵葵张海霞Verena LinhardHartmut Michel彭国宏
- 关键词：孢子体配子体
- 构建转VP28蛋白基因的蓝藻
- ＜正＞ VP28蛋白是位于对虾白斑杆状病毒（white spot syndrome virus,简称 WSSV）囊膜上的一个蛋白,定位于病毒颗粒表面,可能在对虾全身性感染中起作用。WSSV是一个大的双链DNA病毒。该病毒...
- 张春莉黄倢彭国宏宋晓玲杨明丽张海霞施定基
- 关键词：白斑杆状病毒囊膜蛋白引物设计穿梭表达载体转基因蓝藻
- 文献传递
- 人肿瘤坏死因子α基因穿梭表达载体的构建和在鱼腥藻7120中的表达被引量：18
- 1999年
- 报道了人肿瘤坏死因子α(hTNFα)基因穿梭表达载体的构建及其在丝状体蓝藻鱼腥藻 712 0中的表达和鉴定结果 .将质粒pRL rhTNF上hTNFα的cDNA连于pRL 43 9质粒上的PpsbA启动子下游 ,得到中间载体pRL TC .进一步与穿梭质粒pDC 8重组 ,得到可在大肠杆菌和蓝藻中均可表达的穿梭表达载体pDC TNF .pRL rhTNF ,pRL TC和pDC TNF三者在大肠杆菌中的表达量分别为 11.8% ,16 9%和 15 .0 % .通过三亲接合转移将pDC TNF引入鱼腥藻 712 0中并获稳定遗传的转基因株 .从转基因的鱼腥藻 712 0中检测到pDC TNF质粒的存在 ,且在和TNFα的cDNA探针进行的Southern杂交中呈阳性反应 .抽提转基因藻的蛋白样品进行检测 ,在Western印迹中和TNFα单克隆抗体呈阳性反应 .采用TNF对L92 9细胞的细胞毒性方法 ,证明转基因藻粗提液中 ,TNF确有细胞毒活性 .
- 刘凤龙张宏斌施定基商之狄林晨邵宁彭国宏张雪艳张海霞吴锦银王捷徐旭东江悦华钟泽璞赵树进吴旻曾呈奎
- 关键词：肿瘤坏死因子鱼腥藻穿梭表达载体基因表达
- 人肿瘤坏死因子-α基因对鱼腥藻7120的光合活性的影响被引量：4
- 1999年
- 藻类分子生物学和基因工程的发展已使外源基因能在蓝藻中表达,这就有可能分析外源基因对光合作用的影响。本研究采用两种转化系统所得的转基因蓝藻(Anabaena sp.PCC7120)1(To1)、2(To2)及野生藻(Wo)测定其生长曲线表明,它们的生长速度比较接近,转基因藻略微缓慢,生物量也偏少。用氧电极测定转基因藻的饱和光强与野生藻接近,为480μEm^(-2)s^(-1),最大放氧量为355mol O_2/mg Chl.h.吸收光谱测定结果表明转基因藻与野生藻的色素组成一致,均含有叶绿素a、类胡萝卜素和藻蓝蛋白等,但T02的藻胆蛋白含量高于野生藻。低温荧光发射光谱测定表明,外源基因的导入及表达促进了转基因藻中藻蓝蛋白的合成,改变了光能在两个光系统之间的分配,特别是由藻胆蛋白吸收的光能向光系统Ⅰ的传递受阻,不同的转化系统中所得的转基因藻中表现程度亦有差异。
- 彭国宏陈贝张海霞曾呈奎施定基
- 关键词：荧光发射光谱
- 白斑综合症病毒(WSSV)囊膜蛋白VP28基因的克隆及在蓝藻中表达载体的构建被引量：25
- 2003年
- 用蔗糖密度梯度离心法分离纯化白斑综合症病毒(WSSV)。设计并合成引物 ,提取WSSV中国株的基因组DNA作为模板 ,通过PCR ,扩增克隆出VP28基因 ,利用BamHI和EcoRI切点将VP28基因插入克隆载体 pUC19的多克隆位点上 ,得到VP28基因的重组克隆质粒,对其进行双向DNA测序。测序结果表明,该基因含有615个核苷酸 ,与GenBank中已有不同来源的WSSV的序列片段同源性为100 %。利用BamHI切点将VP28的基因插入到穿梭表达载体启动子PpsbA的下游 ,EcoRI酶切鉴定 ,得到正向连接的可在蓝藻表达的重组穿梭表达载体 ,命名为 pRL VP28。
- 张春莉施定基黄倢张海霞彭国宏
- 关键词：白斑综合症病毒蓝藻对虾基因克隆
- 光自养和混合培养对转人肿瘤坏死因子基因鱼腥藻中产物的表达效率的影响
- 彭国宏徐以兵张海霞曾呈奎施定基
- 关键词：鱼腥藻
