戴永鑫
- 作品数：5 被引量：27H指数：3
- 供职机构：天津科技大学更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 低温碱性脂肪酶基因克隆与定向进化
- 王海宽戴玉杰戚薇路福平孙同毅戴永鑫鄂旭
- 该项目通过筛选获得了拥有自主知识产权的脂肪酶产生菌种，同时发现其产生的脂肪酶未见报道。菌株34-5所产脂肪酶为低温碱性脂肪酶，具有较好的洗涤剂添加剂方面的应用潜力。以橄榄油为唯一碳源，在25℃和pH9.6的低温碱性条件下...
- 关键词：
- 关键词：脂肪酶基因克隆
- 分枝杆菌甾酮C_(1,2)位脱氢酶基因敲除的研究被引量：5
- 2007年
- 利用分枝杆菌对植物甾醇进行边链降解可产生4-AD(4-烯-雄甾-3,17-二酮)和ADD(1,4-二烯-雄甾-3,17-二酮),ADD由4-AD在C1,2位脱氢酶(ksdD)作用下脱氢产生,这两种物质在化学结构上高度相似,难以分离。首先扩增出部分ksdD基因,大小为631bp,并以此为基础构建打靶载体pUC19-MK。将pUC19-MK电转分枝杆菌感受态,通过同源重组敲除分枝杆菌染色体上正常的ksdD基因,使C1,2位脱氢酶失活,以达到4-AD大量积累的目的。结果通过初筛筛选出5株转化子,进行甾体转化实验,发酵144h时,1号转化子的4-AD生成率达到17.52%,比出发菌株提高了192%,而此时ADD的生成率仅为6.12%,比出发菌株降低了89.9%。
- 田琳李玉史文玉戴永鑫路福平王建玲杜连祥
- 关键词：同源重组打靶载体
- 磷脂酰丝氨酸合成酶基因pss的克隆与表达被引量：3
- 2007年
- 磷脂酰丝氨酸合成酶能催化转酯反应,是定向合成特定磷脂类物质特别是磷脂酰丝氨酸的工具酶,但出发菌株产量低,很大程度上限制了酶法合成磷脂酰丝氨酸的工业化应用。利用表达载体pET-22b,实现了大肠杆菌磷脂酰丝氨酸合成酶基因在大肠杆菌BL21(DE3)中的同源高效表达。利用镍亲和柱对表达产物进行纯化,并用HPLC法对纯化后的重组酶的活力进行检测。结果表明,目的蛋白可在短时间内进行大量表达,蛋白含量是出发菌株的100倍,同时经6h的转酯反应转化率达到33%,重组磷脂酰丝氨酸合成酶活力达到69U/mg蛋白。
- 李斌路福平刘逸寒钱磊戴永鑫
- 关键词：大肠杆菌酶基因表达转酯反应
- 白腐菌对秸秆中木质素生物降解的研究被引量：19
- 2007年
- 研究了白腐菌及其产生的木质素降解酶系对秸秆的木质素生物降解方法,探讨了黄孢原毛平革菌和杂色云芝单一菌株生物降解及双菌株联合降解木质纤维素的规律,白腐菌双菌联合固态培养可使木质素降解率达到47.64%,脱木素选择性为4.74.采用模拟大规模白腐菌堆积培养(厚度30 cm)的方法降解秸秆木质素,培养30 d,木素降解率为32.54%,表明此方法是一种可行的大规模生物预处理方法.
- 戴永鑫王海宽刘逸寒路福平
- 关键词：白腐菌秸秆生物降解木质素
- 3-甾酮-1-脱氢酶基因的表达及甾体转化分析(英文)
- 2006年
- 利用带有P43启动子的表达分泌载体pWB980,实现了简单节杆菌3-甾酮-1-脱氢酶在枯草芽孢杆菌中的表达,表达出的目的蛋白的分子量为55kDa。利用分光光度法检测得到胞内和胞外可溶性部分的酶活分别为每毫克蛋白110±0.5mU和15±0.6mU,比出发菌株简单节杆菌提高了将近30倍。重组芽孢杆菌对甾体底物4-AD(4-烯-雄甾-3,17-双酮)的转化率为45.3%,比出发菌株简单节杆菌提高了近10倍。利用枯草芽孢杆菌对甾体底物进行脱氢为甾体药物的生产开辟了一个新的途径。
- 李玉路福平刘逸寒戴永鑫杜连祥
