房国锋
- 作品数：11 被引量：37H指数：3
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 发文基金：山东省农业良种工程项目国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪人工授精中深部输精技术的研究与应用被引量：15
- 2012年
- 近年来,一种仅需低精子数的深部输精技术得到了研究和应用。相对于常规子宫颈输精法,深部输精就是将精液输送到子宫体、子宫角或输卵管部。采用低剂量的新鲜或冷冻-解冻精液进行深部输精,母猪所取得的繁殖力和所需的操作时间与常规人工授精没有明显差异。深部输精技术可以大幅提高优秀公猪的利用率,提高冷冻或性别控制精液的使用效果,其在繁殖领域的研究以及在养猪生产中具有广阔的应用前景。本文概述猪人工授精中3种深部输精技术的研究与应用情况,分析实施深部输精需要考虑的一些影响因素。
- 房国锋曾勇庆
- 关键词：人工授精深部输精繁殖力
- RNA干扰沉默PID1基因肉兔模型的构建被引量：4
- 2014年
- 为进一步研究PID1基因的功能,本试验在前期构建并筛选得到的高效PID1RNA干扰表达载体pGPU6/GFP/Neo-PID1-2的基础上,利用精子介导法制备RNA干扰PID1转基因肉兔模型。对繁殖的F1代肉兔个体进行活体荧光检测、PCR、RT-PCR和Western blot检测,并对不同组别(阳性组、阴性组和空白对照组)体重达3.0kg左右的F1代肉兔抽样屠宰进行肌内脂肪的测定。研究结果表明:外源基因和绿色荧光蛋白基因(GFP)在转基因兔后代中可成功表达,试验组得到F1代个体106只,其中阳性兔7只,转基因阳性率为6.60%。PID1基因RNAi阳性兔与阴性兔、空白对照兔相比,RT-PCR检测PID1基因mRNA表达量显著降低(P<0.05),Western blot测得PID1蛋白表达水平呈下降趋势,肌内脂肪的含量显著降低(P<0.05);综上表明,PID1基因与肌内脂肪沉积密切相关。本研究从RNAi肉兔模型构建的角度进一步验证了PID1基因对肌内脂肪沉积影响的功能,也为下一步研究制备高肌内脂肪优质PID1转基因猪奠定了基础。
- 徐正刚杨伦曾勇庆张哲陈伟杨云房国锋王守栋
- 关键词：新西兰肉兔RNA干扰肌内脂肪
- RNA干扰沉默PID1转基因肉兔模型的构建
- 徐正刚杨伦曾勇庆陈伟张哲杨云王守栋房国锋楚青惠
- 关键词：新西兰肉兔RNA干扰肌内脂肪
- 实时荧光定量PCR法检测转基因猪外源基因整合拷贝数被引量：2
- 2016年
- 以GFP转基因猪为研究对象,以转铁蛋白受体基因为内参基因,通过SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR建立针对外源基因GFP和内参基因的双标准曲线和方程。对转基因猪基因组DNA中外源基因和内参基因的拷贝数同时定量检测,外源基因与内参基因起始模板拷贝数的比值即为外源基因在转基因猪中的整合拷贝数。同时,利用Southern-blot进行验证分析。结果显示:实时荧光定量PCR法检测2头转基因阳性猪外源基因拷贝数分别为3和2,2头转基因阴性猪外源基因拷贝数均为0,结果同Southern-blot检测一致。结果表明:实时荧光定量PCR法高通量、灵敏、方便,可以更好的用于转基因猪外源基因整合拷贝数的检测。
- 房国锋王守栋曾勇庆陈伟王延东李川皓
- 关键词：荧光定量PCR转基因猪拷贝数
- 2A肽介导猪PID1与CuZnSOD双基因真核共表达载体的构建与细胞表达
- 2014年
- 构建PID1基因与CuZnSOD基因的真核共表达载体,在PK15细胞中鉴定基因的表达。PCR扩增的PID1与CuZnSOD两基因分别经双酶切后定向插入pIRES2-AcGFP1空载体,构建pIRES2-CuZnSOD-PID1真核双表达载体并进行测序与酶切鉴定。采用脂质体转染法将重组质粒转染至PK15细胞,细胞内荧光显微镜下观察其荧光的表达,RT-PCR、Westernblot技术分别检测PID1基因与CuZnSOD基因mRNA和蛋白表达情况。重组克隆载体插入目的片段序列与PID1基因与CuZnSOD基因序列完全一致。PIRES2-CuZnSOD-PID1真核双表达载体测序、酶切鉴定结果与预期结果一致。荧光显微镜下观察转染后的PK15细胞出现绿色荧光。RT-PCR检测结果显示,转染细胞中PID1基因与CuZnSOD基因表达量明显高于对照组(P<0.05)。Westernblot检测结果表明pIRES2-CuZnSODPID1真核双表达载体稳定有效表达。成功构建pIRES2-CuZnSOD-PID1真核共表达载体,且双基因在真核细胞独立稳定表达,为转基因猪等育种新材料的制备奠定基础。
- 张哲李同明曾勇庆陈伟徐正刚杨云房国锋王守栋楚青惠
- 关键词：CUZNSODPK15细胞
- 乳酸菌对育肥猪肌肉风味前体物质及营养特性的影响被引量：13
- 2014年
- 为研究饲喂不同剂量乳酸菌对育肥猪肌肉风味前体物质和营养品质特性的影响,选择体重约30 kg的杜×长×大三元杂交猪216头,随机等分为4组;对照组、试验1组、试验2组、试验3组分别通饮水饲喂乳酸菌液0、50、100、150 mL(乳酸菌液中活乳酸菌浓度≥1×109cfu/mL),试验猪饲喂至平均约100 kg体重时,分组抽样屠宰并取背最长肌进行肉质测定。结果表明:饲喂乳酸菌液对猪肉总胆固醇和肌苷酸(IMP)含量具有显著影响(P<0.05),50、100 mL组总胆固醇含量分别比对照组降低9.65%、5.11%(P<0.05);100 mL组IMP含量比对照组提高50.57%(P<0.05)。饲喂乳酸菌液的3个试验组猪肉中的总胶原蛋白(TC)、可溶性胶原蛋白(SC)均高于对照组,其中,50、150 mL组的TC比对照组分别提高17.68%、19.19%(P<0.05),50 mL组的SC比对照组提高44.44%(P<0.05)。饲喂乳酸菌液对猪肉总氨基酸(TAA)、鲜味氨基酸(DAA)含量具有显著影响(P<0.05),3个试验组的TAA、DAA含量均显著高于对照组(P<0.05)。饲喂乳酸菌液对猪肉总单不饱和脂肪酸(MUFA)、总多不饱和脂肪酸(PUFA)含量具有显著影响(P<0.05),其中,3个试验组的PUFA含量均显著高于对照组(P<0.05)。研究结果提示,饲喂乳酸菌能够明显提升猪肉的风味和营养等品质特性,其作为商品肉猪肉质改良的饲料添加剂具有独特的开发利用价值。
- 相伟张天阳曾勇庆汪官保赵勇陈伟张建梅房国锋王守栋
- 关键词：乳酸菌风味前体物质营养特性
- 热应激的危害与夏季养猪的饲养管理技术措施被引量：1
- 2014年
- 夏季高温是影响猪只健康和生产力的主要不利因素。在炎热的夏季,热应激会引起猪机体内分泌功能紊乱、消化机能减弱、免疫机能下降,如果饲养管理不当,则不仅影响生长育肥猪的采食与生长,而且往往造成种猪繁殖障碍,表现为受胎率、产仔数和泌乳性能下降,流产、难产和死胎发生率升高等,严重影响到养猪业的经济效益。概述了高温应激对猪体的不利影响,并提出夏季的饲养管理技术措施,旨在为广大养猪场(户)提供技术参考。
- 刘雪萍房国锋曾勇庆
- 关键词：夏季热应激养猪生产饲养管理技术
- 猪人工授精中深部输精技术的研究与应用
- 本文概述了猪人工授精中3种深部输精技术的研究与应用情况,分析了实施深部输精需要考虑的一些影响因素.得出了深部输精技术可以大大提高优秀公猪的利用效率,提高冷冻或性控精液的使用效果,其在繁殖领域的研究以及在养猪生产中具有广阔...
- 房国锋曾勇庆
- 关键词：养猪业人工授精繁殖性能
- 文献传递
- F_1代转CuZnSOD基因猪的制备与研究被引量：2
- 2016年
- 为进一步研究CuZnSOD基因对肉质表达调控的作用机理,探究通过磁性纳米颗粒介导精子载体法制备转基因猪的可行性。本试验在重组质粒先后与磁性纳米颗粒和精液共孵育的基础上,再通过人工授精获得F1代仔猪。对繁殖得到的F1代个体进行PCR、荧光定量PCR及Western blot检测,对屠宰的4头阳性猪采用绝对定量PCR进行转基因拷贝数鉴定,F1代个体达100kg左右时抽样屠宰进行肉质及抗氧化性能测定。结果表明,F1代阳性率为30.23%。阳性组CuZnSOD在5种组织中的RNA和蛋白水平上的表达量较阴性组均上调。本试验得到的标准曲线:ΔCt=-3.121 6lgN+17.281(R2=0.992 1,P<0.001),4头阳性猪中外源基因拷贝数分别为25.89、80.61、106.69、83.03。肉质及抗氧化性能测定结果显示,阳性组肌肉滴水损失显著低于阴性组(P<0.05);阳性组肌肉T-SOD1d、T-SOD2d活性显著高于阴性组,MDA1d、MDA2d含量显著低于阴性组(P<0.05)。研究结果表明:CuZnSOD基因的过表达可以提高肌肉的抗氧化性能,降低滴水损失,进而改善肉质,同时,证明磁性纳米颗粒介导的精子载体法可以用于制备转基因动物。
- 王守栋房国锋曾勇庆陈伟李川皓王延东
- 关键词：CUZNSOD磁性纳米颗粒转基因猪肉质抗氧化性能
- 磁性纳米颗粒精子介导构建PID1转基因猪
- 养猪生产是世界动物产业的重要组成部分。随着全球经济的发展，猪肉品质已经引起了消费者和生产者的广泛重视。规模化养猪生产已经造成肉质变差，肌内脂肪降低。肉质是畜牧生产中最重要的经济性状之一。提高猪肉品质，对于养猪业有着十分重...
- 房国锋
- 关键词：转基因猪磁性纳米颗粒肌内脂肪
- 文献传递
