施思
- 作品数：8 被引量：21H指数：3
- 供职机构：西南民族大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 印度洋某海域深海微生物多样性分析
- 2012年
- 利用元基因组技术,直接提取印度洋深海浓缩海水的总DNA,利用细菌和古菌的通用引物扩增16SrRNA片段并建立文库,在对阳性克隆进行酶切验证的基础上,广泛大量地挑取单克隆进行测序,应用分析软件和数据库资料,研究印度洋深海微生物的多样性,结果发现了3个不同细菌的OTU.
- 施思安莉颖伍红
- 关键词：微生物多样性
- 里氏木霉RutC30常温常压等离子体ARTP)诱变筛选pyr4基因缺陷型菌株及转化系统的建立被引量：7
- 2014年
- 以里氏木霉Trichoderma reesei重要工业生产菌Rut C30为出发菌株,通过等离子体(ARTP)诱变筛选,以5‐氟乳清酸(5‐FOA)和尿苷(Uridine)进行筛选,获得一株pyr4基因缺陷株Rut C30ΔU3。用含有野生型里氏木霉pyr4基因的互补质粒转化突变株,可回复野生性状。经测序发现其pyr4基因在核酸序列多个位点发生突变,其中包括两个错义突变和一个移码突变,从而导致乳清酸核苷‐5′‐磷酸脱羧酶失活。经遗传稳定性研究分析,传代5次后仍保持良好的尿苷依赖性、去葡萄糖阻遏以及高产纤维素酶特性。经实验筛选获得了pyr4基因缺陷菌株可作为基因表达系统的受体菌株,建立了以尿苷营养缺陷为筛选标记的木霉转化系统。
- 安莉颖易欣欣秦丽娜施思陶勇伍红董志扬
- 关键词：里氏木霉等离子体诱变
- 里氏木霉几丁质酶基因的克隆及其同源转化研究
- 2013年
- 丝状真菌里氏木霉(Trichoderma reesei)外切几丁质酶具有β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性.根据里氏木霉基因组数据库获得了一个编号为21725的外切几丁质酶nag1基因序列,根据检索结果,从里氏木霉QM9414基因组DNA中克隆获得1.9kb的基因片段.构建了以cbh1为启动子和终止子的重组质粒pCbhNag,与含有pyr4基因的质粒pSKpyr4共转化里氏木霉pyr4缺陷株RutC30ΔU3.共得到99个转化子,初筛得到5株乙酰氨基葡萄糖苷酶酶活较高的转化子,其中N3菌株的β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶酶活可达26.65 U/mL,而出发菌株的胞外几丁质酶几乎无酶活.成功实现了里氏木霉几丁质酶的克隆及同源表达.
- 安莉颖施思秦丽娜陈飞董志扬伍红
- 关键词：里氏木霉几丁质酶
- 苦丁茶多糖提取工艺条件的优化研究被引量：7
- 2010年
- 研究苦丁茶多糖提取工艺的最优条件.方法:通过单因子及正交实验分析浸提温度、浸提次数、沉淀时95%乙醇与样品的比例三个因素对其所含茶多糖(TPS)提取得率的影响,从而优化茶多糖提取工艺的条件.结果:单因子实验中,在温度为95°C、沉淀时乙醇与水的比例是1:5、提取的次数是2次时,提取量最大.正交实验分析得到优化的提取工艺条件为浸提温度90°C,沉淀时95%的乙醇与样品体积的比例为5:1,浸提次数1次.
- 施思陈炼红伍红
- 关键词：苦丁茶多糖正交试验
- 几种茶叶中α-淀粉酶抑制剂的研究被引量：3
- 2011年
- 对熟普洱、生普洱、苦丁、龙井、铁观音等五种茶叶中α-淀粉酶抑制剂进行了研究.结果显示:普洱茶的α-淀粉酶抑制剂的最佳作用温度为70℃;五种茶叶中α-淀粉酶抑制剂的抑制率依次为苦丁茶>熟普洱>铁观音>龙井>生普洱.
- 伍红安莉颖施思刘熙娅
- 关键词：茶叶Α-淀粉酶抑制剂降低血糖
- 里氏木霉RutC-30产纤维素酶条件优化研究被引量：2
- 2012年
- [目的]优化里氏木霉RutC-30产纤维素酶的液体发酵条件。[方法]以里氏木霉RutC-30为出发菌株,通过单因素试验研究培养基不同氮源(硫酸铵、尿素、蛋白胨)及浓度、不同碳源(纤维素、乳糖、甘油、葡萄糖)及浓度和不同的初始pH(3.0、4.0、5.0、6.0、7.0)对产酶的影响,在此基础上选取氮源、碳源和pH为影响因子采用正交试验探讨里氏木霉RutC-30产纤维素酶的优化条件。[结果]正交试验分析表明,各因素对产酶影响顺序依次为碳源>氮源>pH,里氏木霉RutC-30产纤维素酶的最佳条件是:以1%纤维素为碳源、以0.5%蛋白胨为氮源,初始pH值为4.0,在30℃产酶发酵培养5 d,纤维素酶活力高达7.303 U。[结论]里氏木霉RutC-30经优化培养后,产酶能力可得到大幅度提高,具有潜在的工业应用价值。
- 安莉颖施思谭德勇伍红
- 关键词：纤维素酶正交试验培养条件优化
- 碳源对里氏木霉QM9414胞外酶基因表达的影响被引量：2
- 2011年
- 对里氏木霉QM9414在纤维素、木聚糖、乳糖、甘油、葡萄糖等不同碳源培养条件下,纤维素酶、木聚糖酶的活性差异以及其培养液中总分泌蛋白的表达差异进行了分析.发现纤维素、乳糖和木聚糖均可诱导纤维素酶和木聚糖酶的合成;而葡萄糖是两种酶合成的抑制性碳源.通过对不同碳源培养条件下,里氏木霉QM9414培养液中总分泌蛋白的SDS-PAGE分析,获得其分泌蛋白表达谱.选取差异表达的蛋白,进行质谱分析,获得4个蛋白序列.根据里氏木霉基因组数据库序列的同源性分析发现:乳糖诱导了一个与海藻糖酶同源的蛋白;而木聚糖诱导产生了一个未知的蛋白质高表达;纤维素为碳源诱导产生了与阿拉伯糖酶同源的蛋白质;葡萄糖为碳源诱导产生与水解α-1,4-糖苷键的淀粉酶同源的蛋白质;根据同源性分析,不同碳源诱导产生的蛋白都是与碳源利用有关的糖苷键水解酶.
- 伍红陈秀珍董志扬安莉颖施思
- 关键词：里氏木霉纤维素酶木聚糖酶质谱分析
- 青贮饲料添加剂及环境微生物产纤维素酶的研究
- 青贮饲料具有成本低廉、营养价值高且不受气候和季节限制等优势，广泛应用于家畜的饲养中。青贮过程涉及到益生菌的代谢及物质降解等作用，故常用作为青贮添加剂以促进青贮饲料发酵、防腐并提高其适口性。青贮添加剂按其作用可分为促进性添...
- 施思
- 关键词：青贮饲料添加剂多样性纤维素酶系统发育树
- 文献传递
