李坚
- 作品数：8 被引量：21H指数：3
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- 棉铃虫核型多角体病毒orf86基因的原核表达、抗体制备与免疫印迹检测被引量：5
- 2010年
- 棉铃虫核型多角体病毒(Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus,HearNPV)orf86是一个功能未知的基因。从HearNPV基因组中通过PCR得到orf86基因编码序列,将其构建于原核表达载体pGEX-4T-2,转化大肠杆菌BL21获得融合表达产物。融合表达蛋白经分离纯化后免疫新西兰大白兔,制备其多克隆抗体。用ELISA测定结果表明,ORF86多克隆抗体效价为1:5.12×105。利用该抗体Western印迹检测HearNPV感染的HZAM1细胞,检测到一个36kD的目的蛋白条带,与ORF86预期大小一致。结果表明该多抗可用于对orf86编码蛋白的检测和相关功能研究。
- 李坚刘强王玉芹项林平王敦
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 苹果蠹蛾颗粒体病毒张掖株(CypoGV-zy)的室内毒力测定被引量：10
- 2011年
- 对我国首次分离到的1株苹果蠹蛾颗粒体病毒本土株系，苹果蠹蛾颗粒体病毒张掖分离株（CypoGVzy）进行了室内毒力测定研究。结果表明：1～4龄幼虫期的LD50分别为4．55×10^3、1·20×10^4、3．43×10^4、2．11×10^PIB·mL^-1。在0．50×10^5PIB·mL^-1病毒浓度下，1～3龄幼虫在感染病毒7～9d后校正死亡率达100％，LT50分别为3．59、4．07、4．66d；4龄幼虫LT50为7．60d，1～4龄幼虫的LT50分别为5．51、5．91、6．53、16．06d。该病毒分离株对我国西北疫区的苹果蠹蛾具有较强的毒力，具有生防应用前景.
- 郑春寒刘强李坚董昆冯纪年张雅林王敦
- 关键词：苹果蠹蛾颗粒体病毒毒力测定
- 一种复合型昆虫病毒增效剂及其制备方法
- 本发明公开的一种复合型昆虫病毒增效剂，按照体积百分比，由以下组分组成：毒素蛋白水溶液：2％-8％，斑蝥素乳油：0.3％-1.5％，Tween-80乳化剂：1％-3％，其余为1×PBS缓冲液，以上各组分的体积百分比之和为1...
- 王敦张雅林李坚项林平刘强徐红星甘恩宇
- 一种增强型CpGV病毒制剂及其制备方法
- 本发明公开的一种增强型CpGV病毒制剂，按照体积百分比，由以下组分组成：活性蛋白M2R溶液：6％-30％，CpGV悬浮液：0.5％-1.5％，Tween-80乳化剂：1％-3％，其余为1×PBS缓冲液，以上各组分的体积百...
- 王敦张雅林李坚王玉芹徐红星郑春寒董琨徐利
- 文献传递
- 一种增强型CpGV病毒制剂及其制备方法
- 本发明公开的一种增强型CpGV病毒制剂，按照体积百分比，由以下组分组成：活性蛋白M2R溶液：6％-30％，CpGV悬浮液：0.5％-1.5％，Tween-80乳化剂：1％-3％，其余为1×PBS缓冲液，以上各组分的体积百...
- 王敦张雅林李坚王玉芹徐红星郑春寒董琨徐利
- 生物防治杆状病毒基因工程研究进展被引量：6
- 2009年
- 杆状病毒作为杀虫剂应用已成为生物防治中不可缺少的环节,但杆状病毒过高的宿主特异性与缓慢的发病致死作用是制约其推广应用的原因之一。我们就如何通过基因工程的方法提高杆状病毒的生物防治效果,从整合外源基因、改造内源基因及生物安全性评价等3个方面,对近年来的相关研究进行了概括,并对基因工程杆状病毒用于生物防治进行了展望。
- 李坚王敦
- 关键词：生物防治基因工程重组杆状病毒
- HearNPV ORF83和ORF86的多抗制备与基因敲除重组Bacmid构建
- 本研究通过对棉铃虫核型多角体病毒（Helicoverpa armigera single nucleopolyhedrovirus, HearNPV）的两个功能未知基因ORF83和ORF86进行多克隆抗体制备和基因敲除,...
- 李坚
- 关键词：基因敲除
- 文献传递
- 一种复合型昆虫病毒增效剂及其制备方法
- 本发明公开的一种复合型昆虫病毒增效剂，按照体积百分比，由以下组分组成：毒素蛋白水溶液：2％-8％，斑蝥素乳油：0.3％-1.5％，Tween-80乳化剂：1％-3％，其余为1×PBS缓冲液，以上各组分的体积百分比之和为1...
- 王敦张雅林李坚项林平刘强徐红星甘恩宇
- 文献传递
