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霉酚酸对肝细胞自噬相关因子表达的影响: 2016年; 目的比较日本爆发性丙型肝炎病毒1型(hepatitis C virus Japanese fulminant hepatitis-1,HCV JFH-1)感染的Huh7细胞中细胞自噬因子在霉酚酸(mycophenolic acid,MPA)处理组与对照组的表达差异,探讨MPA对肝细胞自噬相关因子的调节影响。方法用HCV JFH-1感染Huh7细胞,用5μg/ml的霉酚酸处理细胞24 h,用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,q PCR)和蛋白免疫印迹法测定细胞内HCV、微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated-protein 1 light chain,MAP1-LC3B,简写LC3B)、自噬相关因子3(autophagy-related gene 3,ATG3)和自噬相关因子7(autophagy-related gene 7,ATG7)的信使核糖核酸(messenger ribonucleic acid,mRNA)和蛋白相对表达量,比较上述因子在处理组和对照组之间的差异。结果在核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)和蛋白水平上,MPA可以降低HCV在Huh7细胞中的表达并且降低自噬标记物LC3B mRNA和LC3B-II的蛋白质表达(均有P<0.001);MPA可以使Huh7细胞中的自噬相关因子ATG3和ATG7的mRNA和蛋白相对表达量下降(P<0.001;P=0.003;P=0.010;P=0.002)。结论 MPA可以抑制HCV JFH-1在Huh7细胞中的复制和细胞自噬,并且可以下调自噬因子ATG3和ATG7的表达,推测MPA可能通过调节自噬关键因子表达来抑制细胞自噬从而拮抗HCV的复制。; 蒋俊俊苏锦明李彧陈晖梁冰玉黄颉刚潘沛江刘洁赵芳凝梁浩霍文哲叶力; 关键词：霉酚酸自噬

甲基苯丙胺对人类免疫缺陷病毒感染者巨噬细胞炎性蛋白表达的影响被引量：1: 2014年; 目的：探讨甲基苯丙胺（冰毒）对 HIV 感染者巨噬细胞炎性蛋白（MIP）-1α、MIP-1β、IL-6表达的影响。方法设吸食甲基苯丙胺的 HIV 感染组、无吸毒史的 HIV 感染组、吸食甲基苯丙胺的非HIV 感染组和健康对照组，每组15名。流式细胞仪检测 HIV 感染者 CD4＋ T 淋巴细胞计数，并测定HIV 载量；ELISA 法检测血浆 MIP-1α、MIP-1β、IL-6表达水平。组间差异比较和交互作用分析采用 t检验和方差分析。结果在 HIV 感染者中，吸食甲基苯丙胺者与非吸毒者比较，CD4＋ T 淋巴细胞明显下降、HIV 载量明显升高（t 值分别为5．431，4．670，均 P ＜0．01）。在 HIV 感染者中，吸食甲基苯丙胺者 MIP-1α、MIP-1β、IL-6表达量分别为（40．60±9．84）、（47．35±11．25）和（37．94±11．44） pg/mL ，无吸毒史者分别为（31．31±8．11）、（39．40±8．41）和（31．31±8．11） pg/mL（t＝2．822，P＝0．001；t＝2．192， P＝0．020；t＝1．831，P＝0．043）；非 HIV 感染者中，吸食甲基苯丙胺者 MIP-1α、MIP-1β、IL-6分别为（24．45±5．90）、（27．82±7．25）和（27．18±8．57） pg/mL ，健康对照组分别为（28．42±5．79）、（31．76±9．04）和（23．28±6．07） pg/mL（t＝1．860，P＝0．158；t＝1．317，P＝0．233；t＝1．438，P＝0．228）。甲基苯丙胺与 HIV 感染在调节上述细胞因子表达水平时，均不存在交互作用（均 P＞0．05）。结论吸食甲基苯丙胺可上调 MIP-1α、MIP-1β的表达，表明甲基苯丙胺可能在促进 HIV 的感染中具有调节作用。; 李彧石艺叶力陈晖蒋俊俊梁冰玉黄颉刚周波廖艳研苏锦明潘沛江梁浩; 关键词：甲基苯丙胺白细胞介素6

霉酚酸对丙型肝炎病毒复制的抑制作用: 2013年; 目的调查临床使用的免疫抑制剂，包括霉酚酸、雷帕霉素和他克莫司（FK-506）对肝细胞中HCV复制的影响。方法用各种免疫抑制剂处理HCVJFH-1感染的肝细胞，利用实时定量RTPCR检测HCVRNA的水平，用WesternBlot检测HCV核心蛋白表达水平。结果用霉酚酸处理HCVJFH-1感染的肝细胞，可以极大地降低HCVRNA的水平和减少HCV核心蛋白的表达；雷帕霉素和FK-506对HCV复制的影响不大。外源性鸟嘌呤核苷可以逆转霉酚酸对HCV复制的抑制作用。结论在肝细胞中霉酚酸通过耗尽细胞的鸟嘌呤核苷抑制HCV复制。霉酚酸在临床上可能有益于HCV感染的肝移植患者。; 陈晖曾锦荣叶力苏锦明李彧霍文哲; 关键词：肝炎丙型肝炎病毒属免疫抑制剂霉酚酸

干扰素对Huh7细胞自噬相关基因表达影响的研究: 目的：　　研究干扰素(Interferon，IFN)对肝细胞内细胞自噬相关基因(Autophagy associated genes，ATGs)表达的影响，初步探讨干扰素通过阻断细胞自噬途径而抑制丙型肝炎病毒(Hepat...; 李彧; 关键词：干扰素丙型肝炎基因表达实验药理

不同类型干扰素对Toll样受体在Huh7细胞中表达的影响被引量：1: 2014年; 目的探讨不同类型干扰素对肝细胞Toll样受体(toll like receptor,TLR)3、4、7、9表达的影响。方法感染丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)JFH-1病毒的Huh7细胞分别加入干扰素α(interferon,IFN-α)、IFN-β、IFN-γ、IFN-λ1处理24 h,以实时定量聚合酶链反应(real time polymerase chain reaction,RT-PCR)分析Toll样受体3、4、7、9以及HCV复制水平的变化。结果各干扰素均能抑制HCV的复制(t分别为-45.699、-68.165、-70.994、-67.111,均有P<0.001)。方差分析显示各干扰素处理组间TLR3、TLR4、TLR7及TLR9的相对表达量差异有统计学意义(F分别为125.901、263.537、163.289、31.774,均有P<0.001),进一步两两比较可知,IFN-α、IFN-β能上调TLR3(t分别为21.312、25.420,均有P<0.001)、TLR7(t分别为26.456、24.289,均有P<0.001)的表达,同时下调TLR9的表达,而对TLR4的表达没有影响;IFN-γ可上调TLR4、TLR7的表达,对TLR3和TLR9的表达没有影响;IFN-λ1可上调TLR3、TLR7、TLR9的表达水平,但对TLR4的表达没有影响。结论不同干扰素对肝细胞不同Toll样受体表达的作用不同,反映出不同干扰素具有不同的抗病毒作用机制。; 陈晖李彧蒋敦科苏锦明曾锦荣阮族明莫林芳叶力; 关键词：干扰素丙型肝炎病毒 TOLL样受体

阿片类毒品对HIV-1感染者PBMCs中TLR9基因表达的影响被引量：3: 2015年; 探讨滥用阿片类毒品(Opiates)对Ⅰ型艾滋病病毒(Human immunodeficiency virus,HIV-1)感染者外周血单个核细胞(PBMCs)中TLR9基因表达水平的影响,为阐明阿片类毒品促进HIV-1复制的作用机制奠定基础。首先在南宁、柳州、钦州市地区的美沙酮、艾滋病自愿咨询检测门诊招募对象,经研究对象知情同意,分为4组,即阿片类毒品滥用的HIV-1感染组(Opiates HIV(+)组)、阿片类毒品滥用非HIV-1感染组(Opiates HIV(-)组)、非阿片类毒品滥用的HIV感染组(Non-opiates HIV(+)组)和健康对照组(Control组),每组随机招募50人。其次,以问卷形式调查对象的人口学特征,并采集其外周静脉血,分离出PBMCs后提取RNA。最后采用qPCR、蛋白质印迹法(Western blot,WB)法检测4组人群PBMCs中TLR9的mRNA、蛋白表达水平。经调查发现4组人群在年龄、性别、民族、户籍所在地、婚姻状况、文化程度和吸毒年限等人口学特征方面差异均无统计学意义(P>0.05)。Opiates HIV(+)与Non-Opiates HIV(+)组病毒载量中位数分别为4.450×103和3.977×103 cp/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。TLR9 mRNA相对表达量在Opiates HIV(+)、Non-Opiates HIV(+)、Opiates HIV(-)和Control组中分别为(2.13±1.59)×10-3、(3.66±2.22)×10-3、(1.96±1.42)×10-3和(7.66±4.87)×10-3。阿片类毒品滥用和HIV感染对TLR9的表达存在交互作用(F=25.91,P=0.000)。经单独效应分析,HIV阳性与阴性人群中,阿片类毒品滥用者TLR9相对表达量均明显低于非毒品滥用者(P<0.05);在吸毒人群中,HIV阳性者与HIV阴性者两组间差异没有统计学意义(P>0.05);在不吸毒人群中,HIV阳性者低于正常组,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。WB的结果显示,Opiates HIV(+)、Non-Opiates HIV(+)、Opiates HIV(-)三组TLR9蛋白的表达量均低于Control组。上述结果表明阿片类毒品能够下调HIV-1感染者PBMCs中TLR9的表达水平,提示阿片类毒品可能通过影响TLR9所介导的机体免疫效应,进而促�; 潘沛江韦富梅蒋俊俊梁冰玉黄颉刚廖艳研苏锦明李彧杨小艺陈晖叶力梁浩; 关键词：阿片类毒品 HIV-1

阿片类毒品对HIV感染者PBMCs中IFN-α、ISG56、MxA表达的影响被引量：4: 2016年; 目的通过检测阿片类毒品(opiates)对HIV感染者中干扰素α(interferon-α,IFN-α)、干扰素诱导基因56(interferon-stimulated gene 56,ISG56)、粘病毒抵抗蛋白A(myxovirus resistance protein A,Mx A)表达水平的影响,初步探讨阿片类毒品对人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)复制影响的机制。方法研究对象选取美沙酮门诊、艾滋病自愿咨询检测门诊人群200名,分为4组:Opiate+HIV+组、Opiate+HIV-组、OpiateHIV+组和对照组。面对面问卷调查并采集研究对象外周静脉血,分离外周血单核细胞,采用实时荧光定量PCR法、免疫印迹法、ELISA法等检测4组人群中IFN-α、ISG56、Mx A的mRNA,蛋白表达水平,比较相关因子相对表达量的差异。结果 4组人群在年龄、性别、民族、户籍所在地、婚姻状况、文化程度及职业等人口学特征方面差异均无统计学意义(均有P>0.05)。无论是在基因还是蛋白水平上,HIV感染人群中毒品滥用者的IFN-α、ISG56和Mx A的表达水平均低于非毒品滥用者,差异均有统计学意义(均有P<0.05)。结论阿片类毒品可能抑制抗病毒效应因子IFN-α、ISG56和Mx A的表达,从而促进HIV-1的复制。; 蒋俊俊李旭廖艳研韦富梅潘沛江梁冰玉黄颉刚苏锦明李彧陈晖叶力梁浩; 关键词：干扰素Α 流行病学方法

siRNA对人-单核巨噬细胞TLR2基因表达的抑制被引量：1: 2014年; 目的:筛选特异性抑制人-单核巨噬细胞TLR2基因表达的siRNA(small interference RNA)序列,在分子水平上初步讨论其在HIV治疗方面的前景。方法:在基因库中寻找TLR2基因的mRNA序列,针对TLR2基因设计并合成3条siRNA,阳性对照为人类看家基因GAPDH siRNA,阴性对照为6-羧基荧光素标记的siRNA(NC-FAM)。采集健康人新鲜外周血,分离单个核细胞,再经贴壁法培养纯化为人-单核巨噬细胞。采用阳离子脂质体试剂Lipofectamine 2000介导转染培养的人-单核巨噬细胞。用q-PCR法测定干扰后单核巨噬细胞的TLR2 mRNA的表达,Western blot法测定干扰后TLR2蛋白表达。结果:转染72 h后,阳性对照组GAPDH mRNA及蛋白的表达明显降低(P<0.05)。siRNAs组TLR2 mRNA表达水平整体有显著性差异(F=41.957,P<0.001),与阴性对照组比较,TLR2 siRNA各组的TLR2 mRNA相对表达水平均明显降低(P<0.05),抑制率分别为46%、43%、43%。WB结果显示,TLR2 siRNA各组的TLR2蛋白表达量显著降低(P<0.05)。结论:本研究设计的siRNA能够有效抑制人-单核巨噬细胞TLR2基因的表达,从分子免疫学角度出发,表明通过阻断siRNA介导的TLR2信号传导通路能够为HIV治疗提供新思路。; 潘沛江叶力陈晖黄颉刚梁冰玉蒋俊俊廖艳研李彧苏锦明陈荣凤梁浩; 关键词：SIRNA

抑制人免疫细胞TLR2基因表达的siRNA及其应用: 一种抑制人免疫细胞TLR2基因表达的siRNA，所述的siRNA的正义链序列为5’-CUUGACCUGUCCAACAACAUU-3’，反义链序列为3’-UUGAACUGGACAGGUUGUUGU-5’。本发明能够明显地抑...; 叶力梁浩黄颉刚梁冰玉蒋俊俊廖艳研潘沛江李彧苏锦明陈荣凤; 文献传递

聚5-硝基水杨酸及其制备方法和应用: 本发明涉及医药技术领域，具体公开了聚5‑硝基水杨酸及其制备方法和应用。聚5‑硝基水杨酸具有如下所示的结构：<Image file="DDA0003923604200000011.GIF" he="298" imgCont...; 靳荣华李彧苏波欧阳阿露卢佳玉郭宏伟

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