李春杰
- 作品数：8 被引量：40H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院毒物药物研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生环境科学与工程更多>>
- 细胞色素P450CYP3A65斑马鱼模型建立及对环境污染物的生物响应被引量：7
- 2014年
- 目的：建立细胞色素P450CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼用于快速、直观检测重金属（铜、镉、锌）及类二噁英化合物五氯联苯（ PCB126）等环境污染物。方法 PCR方法钓取斑马鱼CYP3A65基因调控序列，构建于pT2AL200R150G转座载体克隆位点，将pTol2-CYP3A65-EGFP 质粒与pCS-TP 转座酶mRNA共同注射入斑马鱼胚胎单细胞，通过荧光筛选，遗传选育和建立荧光标记转基因斑马鱼品系 Tg （ CYP3A65-EGFP）；利用该转基因斑马鱼胚胎及幼鱼检测上述3种重金属及 PCB126的生物学响应。结果成功建立了CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼品系，绿色荧光在肝和消化道表达；该转基因斑马鱼对3种重金属及PCB126产生生物学响应。染毒96 h后，铜0.1和0.2μmol·L^－1、镉0.35和0.7μmol·L^－1组、锌1.5和3μmol·L^－1组、PCB126所有浓度组荧光相对表达量显著增强（ P＜0.01）；铜0.9μmol·L^－1组、镉2.7和5.4μmol·L^－1组及锌24μmol·L^－1组荧光相对表达量显著减弱（ P＜0.01）；染毒168 h 后，铜0.1和0.2μmol·L^－1组、镉0.35和0.7μmol·L^－1组、锌1.5和3μmol·L^－1组及PCB1262～32μmol·L^－1浓度组荧光相对表达量显著增强（ P＜0.01），铜0.9μmol·L^－1组、镉2.7和5.4μmol·L^－1组、锌12和24μmol·L^－1组荧光相对表达量减弱（ P＜0.05），随着浓度增加荧光减弱，呈现出量效关系。结论 CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼模型可以用来检测铜、镉、锌及PCB126等环境污染物。
- 李春杰赵建张世勇潘微彤蒲韵竹贾启燕查晓丹尚艳楠黄春倩刘艳琴钟玉绪李前丁日高付爱玲赵宝全
- 关键词：细胞色素P450
- 麝香酮对斑马鱼胚胎的发育毒性被引量：19
- 2014年
- 目的：研究麝香酮对胚胎发育的影响。方法受精后3 h（3 hpf）斑马鱼胚胎在含麝香酮分别为5，10，20，40，80和160μmol·L -1的胚胎养殖水液暴露，每24 h 更换一次麝香酮养殖水液，在8，24，48，72和96 hpf 用显微镜观察胚胎发育形态，测定24 hpf 自主抽动次数，48 hpf 心率、孵化率、畸形率和死亡率， RT-qPCR法检测96 hpf 胚胎 sepn1基因表达的情况。结果各暴露组24 hpf 自主抽动次数与正常对照组无统计学差异；48 hpf 后出现脊柱弯曲、心包水肿、卵黄囊水肿，游泳异常的毒性症状；48 hpf 心率减少至每10 s 18．0±1．9（P＜0．01），正常对照组为26．0±0．89；孵化率在48 hpf 时，5～40μmol·L -1组比正常对照组降低（P＜0．05），160μmol·L -1组比正常对照组升高（P＜0．05），其他时间点的各浓度组与正常对照组相比无统计学差异；高浓度下畸形率、死亡率都可达到100％；96 hpf 时，麝香酮40μmol·L -1组胚胎的sepn1基因表达明显下调（P＜0．01）。结论麝香酮对斑马鱼胚胎发育有毒性作用。鱼体脊柱弯曲，游泳异常以及心包水肿发育异常的出现可能与麝香酮抑制胚胎 sepn1基因的表达有关。
- 陈怡君钟玉绪董武李春杰王丽星蒲韵竹尚艳楠赵宝全刘萍
- 关键词：麝香麝香酮斑马鱼胚胎发育
- 冰片对斑马鱼胚胎发育的安全性评价被引量：9
- 2014年
- 目的:研究冰片对斑马鱼胚胎发育的影响。方法:以斑马鱼胚胎为模型,二甲基亚砜为助溶剂,制备冰片溶液(33.6、67.1、134.3、268.5、537.0、1 074.0μmol/L,即冰片①、②、③、④、⑤、⑥组),并且设空白对照组,以受精后小时(hpf)为时间段,对3hpf胚胎进行暴露染毒处理,每24 h更换1次冰片溶液,分别在8、24、48、72、96 hpf时间点以显微镜观察班马鱼胚胎发育形态,测定24 hpf斑马鱼胚胎自主抽动次数、48 hpf心率、孵化率、畸形率和死亡率。实时荧光定量聚合酶链反应法检测斑马鱼胚胎Sepn1基因表达的情况。结果:与空白对照组比较,冰片④、⑤、⑥组斑马鱼胚胎48 hpf出现脊柱弯曲、心囊水肿、卵黄囊水肿,游泳异常的毒性症状;冰片②、③、④、⑤、⑥组斑马鱼胚胎24 hpf自动抽动次数减少;冰片④、⑤、⑥组斑马鱼胚胎24 hpf心率减少;在48 hpf时,冰片①、②、③、④、⑤、⑥组斑马鱼胚胎孵化率降低;在72 hpf时,冰片②、③、④、⑤、⑥组斑马鱼胚胎孵化率降低;在96 hpf时,冰片⑤、⑥组斑马鱼胚胎孵化率降低;冰片④、⑤、⑥组斑马鱼胚胎96 hpf畸形率增加;24 hpf后,冰片④、⑤、⑥组斑马鱼胚胎死亡率降低;冰片④组Sepn1 mRNA表达增强,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结论:高剂量冰片对斑马鱼胚胎发育有明显影响,且呈现一定的时间依赖性。建议婴幼儿、孕妇和哺乳期的妇女长时间或大剂量使用含冰片的药物均应谨慎。
- 陈怡君蒲韵竹颜慧钟玉绪王卓李春杰查晓丹赵宝全刘萍
- 关键词：冰片斑马鱼胚胎发育
- 基于斑马鱼模式生物的新药靶点发现研究
- 2013年
- 斑马鱼在新药靶点发现研究中具有其它生物不可比拟的优势：1．斑马鱼胚胎及幼鱼透明，给药后直接观察发育过程，可观察到细胞运动、脑区形成和心跳等胚胎发育情况，易于发现发育异常的突变体；2．斑马鱼基因与人类同源度高达87％，尤其是中枢神经系统、内脏器官、
- 王丽兴浦韵竹李春杰陈怡君王卓徐艳华赵宝全
- 关键词：模式生物斑马鱼发育过程细胞运动发育情况发育异常
- 基于斑马鱼模式生物的新药靶点发现研究
- 斑马鱼在新药靶点发现研究中具有其它生物不可比拟的优势:1.斑马鱼胚胎及幼鱼透明,给药后直接观察发育过程,可观察到细胞运动、脑区形成和心跳等胚胎发育情况,易于发现发育异常的突变体;2.斑马鱼基因与人类同源度高达87％,尤其...
- 王丽兴浦韵竹李春杰陈怡君王卓徐艳华赵宝全
- 核酸染料Goodview、Gelred和Gelsafe对斑马鱼胚胎发育的毒性作用被引量：3
- 2012年
- 目的研究核酸染料Goodview、Gelred和Gelsafe对斑马鱼胚胎发育的影响。方法将受精后时间(hpf)为3hpf的斑马鱼胚胎随机分组,分别加入0、0.01%、0.02%、0.04%、0.08%、0.16%和0.32%浓度的Goodview、Gelred和Gelsafe 3种核酸染料,观察3种核酸染料对斑马鱼胚胎发育的影响,记录胚胎48 hpf心率,计算72和96 hpf孵化率,96 hpf死亡率及畸形率;同时观察了4、24和48 hpf 3种染料穿透胚胎膜的情况。结果 Goodview、Gelred和Gelsafe 3种核酸染料半数致死浓度(LC50)分别为0.037%、0.092%和0.130%。3种核酸染料0.04%～0.32%浓度组的胚胎48 hpf心率、72和96 hpf孵化率、96hpf死亡率和畸形率与对照组相比都存在显著差异,3种核酸染料96 hpf死亡率、72和96 hpf孵化率还存在剂量-效应关系。Gelsafe 0.08%～0.32%浓度组部分幼鱼出现心囊水肿和脊柱弯曲,0.32%Gelred组染毒后还出现眼点发育不全,Goodview0.04～0.16%浓度组部分幼鱼除心囊水肿和脊柱弯曲外,还出现尾部发育不全等畸形表征。0.01%Goodview 4 hpf能穿透胚胎膜进入胚胎内,随着浓度和时间增加,胚胎内荧光增强。而Gelred和Gelsafe 0.32%浓度下4 hpf未发现明显荧光蓄积点,24hpf和48 hpf仍未发现。结论 3种核酸染料对斑马鱼胚胎发育有毒性,随着使用浓度的增加毒性增加。
- 蒲韵竹王卓李春杰付爱玲赵宝全
- 关键词：斑马鱼胚胎胚胎发育毒性评价
- 敌敌畏对斑马鱼运动行为的影响被引量：8
- 2013年
- 目的利用视频跟踪系统研究敌敌畏对斑马鱼运动行为的影响。方法将斑马鱼浸泡在不同浓度敌敌畏(0、15、20、26、34和45 mg/L)的养殖水中,视频记录染毒后24 h斑马鱼的垂直穿梭次数、顶部停留时间、水平移动距离和水平穿梭次数的变化。结果随着染毒浓度的增加,斑马鱼出现不规则运动。与正常对照组相比,敌敌畏45 mg/L组斑马鱼水平移动距离和水平穿梭次数明显减少(P<0.01)。同时,敌敌畏34和45 mg/L组垂直穿梭次数也显著降低(P<0.01),敌敌畏26、34和45 mg/L组斑马鱼在观察箱顶部停留时间明显延长(P<0.05)。结论敌敌畏对斑马鱼运动行为有抑制作用,通过视频跟踪系统对斑马鱼运动行为的观察和研究方法可广泛应用于药物行为学毒性的评价。
- 王卓蒲韵竹陈怡君李春杰王丽星李前黄春倩张振中张英鸽赵宝全
- 关键词：斑马鱼敌敌畏毒性
- 基于斑马鱼模式生物的新药靶点发现研究
- ＜正＞斑马鱼在新药靶点发现研究中具有其它生物不可比拟的优势:1.斑马鱼胚胎及幼鱼透明,给药后直接观察发育过程,可观察到细胞运动、脑区形成和心跳等胚胎发育情况,易于发现发育异常的突变体;2.斑马鱼基因与人类同源度高达87%...
- 王丽兴浦韵竹李春杰陈怡君王卓徐艳华赵宝全
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