李淑莲
- 作品数：96 被引量：272H指数：10
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学化学工程更多>>
- 抗人DR5单克隆抗体——mDRA-6与顺铂协同杀伤白血病细胞HL-60作用研究被引量：5
- 2007年
- 目的:观察抗死亡受体5(Death receptor5,DR5)单克隆抗体———mDRA-6与顺铂(DDP)对HL-60细胞的协同杀伤作用。方法:DR5蛋白免疫BALB/c小鼠,融合筛选抗DR5杂交瘤细胞,制备抗DR5单抗———mDRA-6;流式细胞术测定顺铂对HL-60细胞表面DR5表达及细胞凋亡率;荧光显微镜下观察mDRA-6与顺铂协同作用下HL-60细胞形态变化;MTT法测定不同浓度的顺铂与mDRA-6对HL-60细胞存活的影响;琼脂糖凝胶电泳检测mDRA-6与顺铂联合对HL-60细胞DNA片段化的影响。结果:顺铂可诱导HL-60细胞表面DR5表达增加,mDRA-6与顺铂联用致HL-60细胞出现染色质浓缩、断裂,细胞出芽,凋亡小体形成等细胞凋亡形态学变化;250ng/ml的mDRA-6作用于HL-60细胞10小时,细胞凋亡率为16.61%;0.16μg/ml的DDP作用于HL-60细胞10小时,细胞凋亡率为2.35%;二者联合作用后,HL-60细胞凋亡率增至57.10%;mDRA-6与DDP联合作用HL-60细胞,DNA琼脂糖凝胶电泳显示明显“梯形”条带。结论:抗DR5单抗———mDRA-6与DDP对HL-60细胞具有强大的协同杀伤作用。
- 李淑莲马远方刘广超张军白慧玲刘英杰
- 关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体死亡受体单克隆抗体顺铂
- 金属硫蛋白拮抗同型半胱氨酸对血管内皮细胞的脂质过氧化作用被引量：6
- 2005年
- 目的:观察金属硫蛋白(metallothionein,MT)对同型半胱氨酸(homocysteine Hcy)损伤血管内皮细胞的拮抗作用及机制。方法:培养液中分别加入Hcy及Hcy+MT孵育血管内皮细胞,自动生化分析仪测培养液乳酸脱氢酶(LDH)活性,硫代巴比妥酸法测细胞丙二醛(MDA)含量。结果:同型半胱氨酸增加内皮细胞LDH及蛋白漏出,并使细胞MDA含量明显升高。MT呈浓度依赖性地抑制Hcy所致的血管内皮细胞损伤及MDA增高。结论:MT拮抗Hcy对血管内皮细胞的脂质过氧化损伤。
- 李淑莲陈清张永雪
- 关键词：金属硫蛋白同型半胱氨酸血管内皮细胞
- JNK信号传导通路在抗人DR5单克隆抗体mDRA-6诱导白血病细胞凋亡中的作用
- 2009年
- 目的:探讨JNK信号传导通路在抗人DR5单克隆抗体mDRA-6诱导白血病细胞Jurkat和U937凋亡过程中的作用。方法:MTT法检测mDRA-6对Jurkat和U937细胞的生长抑制作用;以Caspase抑制剂Z-VAD-FMK和JNK抑制剂SP600125进行干预,采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术定量分析Jurkat和U937细胞凋亡;利用免疫印迹技术检测mDRA-6作用下凋亡细胞的JNK蛋白的表达情况。结果:mDRA-6对Jurkat和U937细胞具有明显的生长抑制作用;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测显示,10μg/ml的mDRA-6作用Jurkat和U937细胞3小时,其凋亡率分别为62.62%和35.65%,JNK抑制剂干预后细胞凋亡明显增加;免疫印迹技术检测显示,mDRA-6作用细胞5分钟后JNK即呈现活性片段表达,并随作用时间的延长其活性增强,而Caspase全抑制剂干预后,5、15分钟JNK磷酸化增强,但随后随时间递减。结论:mDRA-6抑制Jurkat和U937细胞生长并诱导其凋亡,其凋亡过程中有JNK的激活并发挥抗凋亡作用。
- 蔡静李淑莲王靖王赟袁艳军蒋祺秦方园马远方
- 关键词：JNK白血病细胞凋亡
- 大鼠多次采血常用的三种方法探讨被引量：15
- 2013年
- 目的探讨大鼠在1天内或者短时间内需要多次采血常用的三种方法,提高大鼠实验的成功率。方法采用90只雄性Wistar大鼠,分别用眼眶后静脉采血法、颈静脉采血法及心脏穿刺采血法进行采血实验。结果眼眶后静脉采血法:采血0.2—0.3 mL/次,每只大鼠3—4次/d。颈静脉采血法:采血0.2—0.4 mL/次,每只大鼠6—8次/d。心脏穿刺采血法:采血0.3—0.4 mL,每只大鼠3—5次/d。结论三种采血方法取血量相对比较大,血液标本质量高,更利于大鼠的动物实验,但各有应注意的事项。
- 王明丽张晶王耀辉李淑莲马远方
- 关键词：采血方法
- 抗人DR5单克隆抗体诱导HL-60细胞凋亡机制
- 2012年
- 探讨抗人DR5单克隆抗体(mDRA-6)诱导白血病细胞系HL-60细胞凋亡的可能机制。MTT法检测mDRA-6对HL-60细胞的生长增殖的影响,以及Caspase 8、10、3抑制剂对mDRA-6抑制HL-60细胞生长增殖的影响;琼脂糖凝胶电泳检测HL-60细胞DNA片断化降解;Western blot检测mDRA-6对HL-60细胞Caspase 8、10、3的激活改变。结果发现,mDRA-6呈时间、浓度依赖性地抑制HL-60细胞的生长增殖,10 mg/L的mDRA-6作用HL-60细胞6 h、8 h和10h,细胞增殖抑制率分别为23.96%、44.10%和50.28%;琼脂糖凝胶电泳显示,10 mg/L的mDRA-6作用6 h,HL-60细胞呈现凋亡细胞特有的DNA梯形条带;Western blot检测结果发现,mDRA-6作用HL 60细胞不同时间,Caspase 8均只有酶原条带出现,无激活片段产生,而Caspase 10和Caspase 3显示明显裂解片段产生,并随mDRA-6作用时间延长而增多;预先使用15μmol/L的Caspase 10及Caspase 3抑制剂孵育细胞1 h,能够使mDRA-6对HL-60细胞的生长抑制率分别降低64.15%(t=10.13、P<0.01)和53.69(t=8.93、P<0.01)%,而预先使用15μmol/L的Caspase 8抑制剂孵育细胞1 h,mDRA-6对HL-60细胞的生长抑制率仅降低4.40%(t=0.52、P>0.05)。以上实验结果提示,mDRA-6通过激活Caspase 10启动凋亡信号分子,诱导白血病HL-60细胞凋亡。
- 李淑莲王赟张舒曼王靖
- 关键词：死亡受体5单克隆抗体凋亡半胱天冬酶
- 一种快速检测HE4和CA125的纳米硒试剂盒
- 本发明属于生物学免疫层析检测方法领域，具体涉及一种快速检测HE4和CA125的纳米硒试剂盒及其制备方法。该试剂盒由样品垫、结合垫、反应垫、吸水垫和PVC底板组成；所述的反应垫上有包被有抗CA125抗体A2的检测线T1、包...
- 王志增王耀辉郭亚飞任阳光周倩文郑植张海龙马远方李淑莲
- 感染后膈肌无力分子机制的研究策略
- 2012年
- 感染是膈肌无力的重要原因之一,但对其认识匮乏,分子机制更鲜有研究。有实验表明内毒素处理小鼠后膈肌中活性PKR和上游MAPK激活剂MEK3/6显著增加,而这种变化的方式与Caspase转导通路的激活一致。通过建立小鼠膈肌和肌细胞感染模型,采用Western印迹、酶活性测定、流式细胞检测和膈肌肌力测量等方法,探讨感染致膈肌肌力下降与Caspase、p38等分子的关系;运用化学抑制剂和基因抑制剂进一步确认其在肌肉功能障碍中的作用。p38与细胞生长有关,直接用siRNA沉默后肌细胞无法分化成熟,影响进一步研究。为此科学家培育出新一代p38转基因小鼠,将终止密码、Cre-Loxp与负显性基因(DN)有机结合,定时定点控制肌细胞DN基因表达,克服RNAi之不足,开创肌细胞模型中重要基因功能研究的新路径。可以预期,通过证实感染造成的膈肌细胞功能障碍与p38通路之间的关系,人们能够将从分子水平探讨感染引起膈肌肌力下降的机理和可能的防治策略。
- 姬新颖李涛张军刘广超李淑莲刘峰涛牛保华黄红莹白慧玲蒋杞英马远方
- 关键词：分子机制P38CASPASE
- TRAIL-R2的表达与肿瘤诊断治疗及预后相关性研究
- 马远方白慧玲张军李淑莲刘广超杜耀武都景芳刘英杰刘峰涛陈居杲赵昆朋
- 应用领域和技术原理通过基因-r-程技术制备了TRAIL-R2，即死亡受体5(DR5)，并利用它通过单克隆抗体技术制备了抗DR5的单抗，并且利用获得的识别DR5不同表位的两株单抗制备了检测DR5的双抗体夹心ELISA试剂盒...
- 关键词：
- 关键词：肿瘤
- 新型死亡受体激动性多价抗体及其在制备抗肿瘤药物中的应用
- 本发明提供了一类新型抗人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的受体DR（death receptor）胞外区的抗体。该类死亡受体激动性多价抗体可以识别DR4、DR5的相同或相似的表位，形成多价抗体，诱导表达DR4和/或DR5的肿...
- 马远方刘峰涛柴立辉张军刘广超李淑莲
- 文献传递
- 交联抗人DR5单抗诱导的Jurkat细胞凋亡的信号转导
- 2007年
- 目的探讨抗肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的死亡受体5(DR5)单抗——YM366EC对Jurkat细胞增殖的影响,闸明抗DR5抗体的抗肿瘤效应机制。方法MTT方法检测抗体对Jurkat细胞存活率,FITC-Annexin V/PI标记流式细胞仪检测交联YM366EC对Jurkat细胞凋亡率影响。交联YM366EC作用于Jurkat细胞2、4、6、8、10、12 h收集细胞,提取蛋白Western blot检测Bcl-2、Cyt-C、Caspase-8、Caspase-3、Bax、Caspase-9的变化。结果抗DR5抗体单独应用不能抑制高表达DR5分子的Jurkat细胞增殖,但应用抗小鼠IgC交联DR5抗体后可直接诱导TRAIL敏感的Jurkat细胞凋亡改变。并且Western blot检测到随着抗体诱导时间的延长Jurkat细胞Bcl-2蛋白表达减少;Cyt-C、Bax,有活性的Caspase-8、Caspase-3和Caspase-9蛋白的表达增加。结论交联抗DR5抗体YMB66EC对Jur- kat细胞增殖有明显的抑制作用,诱导的Jurkat细胞凋亡的分子机制涉及到Cyt-C、Bax、Caspase-8、Caspase-3、Caspase-9。
- 白慧玲杜耀武王雪银李淑莲王靖刘广超马远方
- 关键词：交联JURKAT细胞凋亡
