杨昱
- 作品数：22 被引量：73H指数：5
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金军队“十一五”科技攻关课题更多>>
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- JAB1过表达增加人肺腺癌细胞对化疗的敏感性
- 2011年
- 目的通过探讨缺氧诱导因子1(HRE-1)启动子诱导JAB1过表达致人肺腺癌细胞(A549)对化疗敏感性的增加程度,来找到提高肺癌缺氧区肿瘤细胞对化疗敏感性的方法,最终达到逆转肺癌化疗耐药的目的。方法首先成功构建缺氧反应元件启动子所驱动的pUC57-HRE-JAB1真核表达质粒。随后,将该质粒导入A549细胞,化疗药物顺铂(C-DDP)也同时加入处理A549细胞。采用RFPCR和Western blot分别检测转染后A549中JAB1的mRNA和蛋白表达水平。采用流式细胞术检测经pUC57-HRE-JAB1质粒转染后A549细胞周期和凋亡的改变。结果较空白对照组和空载体组,经pUC57-HRE-JAB1真核表达质粒转染后,A549细胞中JAB1的表达明显增加(P<0.05)。同时,细胞周期被阻滞于G1期,并且转染后顺铂所诱导的细胞凋亡率较单纯顺铂处理明显增加(P<0.01)。更为重要的是,pUC57-HRE-JAB1导入增加了A549细胞对C-DDP的敏感性。结论缺氧诱导因子1启动子所诱导的JAB1过表达增加了肺癌细胞的化疗敏感性,为逆转肺癌化疗耐药提供了一种可行的治疗策略。
- 胡明冬周长喜杨昱徐剑铖李琦
- 关键词：缺氧诱导因子JAB1耐药顺铂
- 鞭毛蛋白在实验性脓毒症性肺损伤中作用的初步探讨
- 2009年
- 目的在脓毒症急性肺损伤(ALI)大鼠模型中观察鞭毛蛋白在其体内可能的致炎症肺损伤作用,及其抗血清可能的对抗炎症损伤的作用。方法复制脓毒症大鼠模型(致伤组),用鞭毛蛋白抗血清对抗(治疗组),并设定对照组(除不结扎、不刺破、不切除盲肠外,其余处理同致伤组),于2、4、6、12、24、48h时,对比观察其动脉血氧分压(PaO2)、湿/干比值(W/D)、血清和肺泡灌洗液(BALF)中鞭毛蛋白和TNF-α含量的变化以及肺组织病理改变。结果与对照组比较:在12、24、48h时,致伤组PaO2显著降低,而W/D显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);在6、12、24、48h时,致伤组鞭毛蛋白含量显著升高;在24、48h时,治疗组PaO2显著降低,差异有统计学意义(P<0.01),而W/D显著升高(P<0.01)。在12、24、48h时,致伤组TNF-α含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);在24、48h时,治疗组TNF-α含量显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。致伤组与治疗组比较:在12、24h时,致伤组PaO2显著低于治疗组,差异有统计学意义(P<0.01),而W/D和TNF-α含量显著高于治疗组,差异有统计学意义(P<0.01)。镜下观察大鼠肺组织发现致伤组在12h后发生显著的病理变化,而治疗组在24h后才发生显著的病理变化。结论鞭毛蛋白是脓毒症时导致大鼠肺炎症损伤的重要致伤因素。
- 胡明冬徐剑铖钱桂生周长喜杨昱毛梅
- 关键词：鞭毛蛋白脓毒血症急性肺损伤
- 脓毒症肺损伤大鼠鞭毛蛋白含量变化及其意义被引量：2
- 2006年
- 急性呼吸窘迫综合征（ARDS）是急性肺损伤（ALI）的严重阶段，脓毒症为其常见病因。最近的研究表明，革兰阴性菌产生的鞭毛蛋白有高强致炎作用，推测鞭毛蛋白可能是急性肺部炎症过程的重要激发物。但在脓毒症诱导ALI时，鞭毛蛋白有何变化目前尚不清楚。本实验通过观察脓毒症肺损伤大鼠外周血血清、支气管肺泡灌洗液（BALF）、肺组织匀浆中鞭毛蛋白的含量，旨在阐明ALI发病机制，为其防治提供新的理论及实验依据。
- 周长喜徐剑铖胡明冬杨昱
- 关键词：急性肺损伤鞭毛蛋白脓毒症急性呼吸窘迫综合征支气管肺泡灌洗液
- 重组Shh因子对海水浸泡肺微血管内皮细胞增殖和凋亡的影响研究被引量：4
- 2009年
- 目的观察不同剂量重组Shh(recombinant sonic hedgehog,rShh)因子对海水浸泡肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cell,PMVEC)的促进增殖及抗凋亡作用。方法组织块法原代培养大鼠PMVEC,建立大鼠PMVEC海水浸泡模型,加入不同剂量重组Shh因子,采用TUNEL法检测PMVEC凋亡率。采用2,3-苯基溴化四唑(MTT)染色计数法测定细胞增殖活性。结果海水浸泡可导致PMVEC损伤,表现为PMVEC细胞增殖受到抑制以及凋亡发生率增加。重组Shh能降低海水所致PMVEC增殖抑制率和其凋亡率,在实验剂量范围内,其促增殖和抗凋亡作用呈剂量依赖性。结论重组Shh可促进海水浸泡PMVEC增殖和抑制其凋亡。
- 杨昱钱桂生王关嵩邓朝霞周长喜
- 关键词：SHH肺微血管内皮细胞
- 脓毒症肺损伤大鼠鞭毛蛋白含量与TNF-α相关性研究被引量：6
- 2007年
- 目的观察脓毒症大鼠肺损伤模型中鞭毛蛋白与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的相关性。方法120只健康雄性Wistar大鼠随机分为2组,即脓毒症组、假手术组。脓毒症组用盲肠结扎穿孔法建立模型,假手术组除不结扎穿孔、不切除盲肠外,其他处理同脓毒症组。分别于致伤后2、4、6、12、24、48h时点,取大鼠颈动脉血做血气分析观察动脉血氧分压(PaO2)的变化;光镜下观察肺组织病理变化;采用ELISA法检测外周血血清、支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织匀浆中鞭毛蛋白含量以及外周血血清TNF-α的含量。结果成功复制了大鼠脓毒症肺损伤模型,脓毒症组在致伤后12h时点血PaO2明显下降,致伤后48h时点降到最低,脓毒症组12、24、48h时点血PaO2显著低于对应时点假手术组(P<0.01)。光镜下可见脓毒症组24h时点肺组织有以中性粒细胞为主的炎细胞浸润、肺间质和肺泡水肿,假手术组未见明显病理变化。脓毒症组血清、BALF和肺组织匀浆中鞭毛蛋白含量在致伤后12h和24h时点明显增加,12、24、48h时点显著高于对应时点假手术组(P<0.01),脓毒症组血清TNF-α含量在致伤4h后各时点均显著高于对应时点假手术组(P<0.01)。Pearson相关性分析表明,脓毒症发生时大鼠血清、BALF和肺组织匀浆中鞭毛蛋白含量与外周血血清TNF-α含量呈正相关(r=0.711,P<0.05;r=0.66,P<0.05;r=0.52,P<0.05)。结论脓毒症发生时,鞭毛蛋白可能通过诱导TNF-α的产生导致肺损伤。
- 周长喜徐剑铖钱桂生胡明冬杨昱刘英新
- 关键词：鞭毛蛋白脓毒症急性呼吸窘迫综合征TNF-Α
- JAB1对缺氧环境肺癌A549细胞化疗敏感性调控的研究被引量：2
- 2012年
- 目的观察导入pcDNA3.1-HRE-JAB1真核表达质粒的肺癌A549细胞,在低氧环境下对健择(Gemzar)的化疗敏感性,以期找到一种提高肺癌化疗敏感性的方法。方法首先构建缺氧反应元件启动的pcDNA3.1-HRE-JAB1真核表达质粒,鉴定后将该质粒导入肺癌A549细胞。在低氧环境培养过程中加入化疗药物Gemzar,观察空白组(A549)、空载体组(A549+pcD-NA3.1-HRE)和质粒组(A549+pcDNA3.1-HRE-JAB1)肺癌A549细胞对Gemzar的敏感性。采用Real-time PCR和Westernblot分别检测各组肺癌A549细胞中JAB1的mRNA和蛋白表达水平;流式细胞术检测各组肺癌A549细胞周期分布和凋亡情况。结果通过双酶切鉴定,确定构建获得了pcDNA3.1-HRE-JAB1质粒。在有化疗药物Gemzar的情况下,质粒组分别与空白组或空载体组比较,质粒组肺癌A549细胞中JAB1mRNA和蛋白表达水平明显增加(P<0.01),细胞凋亡率明显增加(P<0.01),而细胞周期被明显阻滞于G1期(P<0.01)。结论 JAB1在低氧环境下高表达提高了药物Gemzar化疗的敏感性,这将可能成为一种理想的提高肺癌或其他实体恶性肿瘤化疗敏感性的手段。
- 胡明冬徐剑铖杨昱徐静周长喜毛梅王艺
- 关键词：A549细胞JAB1健择化疗敏感性
- Toll样受体5在鞭毛蛋白致大鼠急性肺损伤中的表达及其研究被引量：2
- 2007年
- 目的检测鞭毛蛋白诱导急性肺损伤大鼠肺组织中Toll样受体5(TLR5)mRNA的表达和NF-κB活性变化,初步探讨TLR5在鞭毛蛋白致大鼠急性肺损伤中的作用及其信号转导途径。方法从大肠杆菌中分离纯化鞭毛蛋白并鉴定。大鼠经尾静脉注射鞭毛蛋白以建立急性肺损伤(ALI)模型。原位杂交法和核酸电泳迁移率实验(EMSA)分别检测鞭毛蛋白致ALI大鼠肺组织中TLR5mRNA表达及NF-κB活性。结果从大肠杆菌中成功分离纯化出鞭毛蛋白,其分子量约65 kD。静脉注射鞭毛蛋白成功建立了大鼠急性肺损伤模型。在静脉注射鞭毛蛋白复制大鼠ALI模型过程中,随着鞭毛蛋白剂量增加及其作用时间的延长,肺组织TLR5的表达逐渐增多,NF-κB活性增强。结论静脉注射鞭毛蛋白可导致大鼠急性肺损伤;TLR5作为细胞膜上鞭毛蛋白的受体参与了鞭毛蛋白致大鼠急性肺损伤的作用过程;NF-κB信号转导通路可能在鞭毛蛋白诱导大鼠ALI的过程中发挥着作用。
- 杨昱徐剑铖钱桂生胡明冬
- 关键词：TOLL鞭毛蛋白急性肺损伤核因子-ΚB
- Toll样受体5在鞭毛蛋白致大鼠急性肺损伤中的表达及其研究
- 目的κB检测鞭毛蛋白诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织中Toll样受体5(TLR5)mRNA的表达和核因子NF-κB活性变化,初步探讨TLR5在鞭毛蛋白致大鼠急性肺损伤中的作用及其信号转导途径。从大肠杆菌中分离纯化鞭毛蛋...
- 杨昱徐剑铖钱桂生
- 文献传递
- 海水淹溺肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白1表达变化的研究被引量：15
- 2008年
- 目的观测海水淹溺肺损伤大鼠肺组织水通道蛋白1(AQP1)表达变化。方法100只健康雄性Wistar大鼠随机分为两组,即海水淹溺组、对照组。海水淹溺组用气管吸入海水法建立模型,对照组除不吸入海水外,其他处理同海水淹溺组。分别于致伤后0.5、1、2、4、8 h时点,取大鼠颈动脉血做血气分析观察动脉血氧分压(PaO2)的变化;光镜下观察肺组织病理变化情况;采用免疫组织化学法检测肺组织表达与分布;采用RT-PCR方法检测AQP1 mRNA表达。结果成功复制了大鼠海水淹溺肺损伤模型:海水淹溺组在吸入海水后血PaO2明显下降,海水淹溺组各时点血PaO2显著低于相应时点对照组(P<0.01)。光镜下可见海水淹溺组各时点肺组织有毛细血管充血、肺间质、肺泡水肿和灶性出血,对照组未见明显病理变化。免疫组化显示海水淹溺组肺间质的毛细血管内皮AQP1的阳性表达,积分光密度值显著高于对照组的表达(P<0.05);海水淹溺组大鼠肺组织AQP1 mRNA表达也显著高于对照组(P<0.01)。结论海水淹溺肺损伤时肺组织AQP1蛋白及mRNA表达增加,AQP1在ALI/ARDS水的转运中可能起着重要作用。
- 周长喜钱桂生杨昱邓朝霞王建春王关嵩
- 关键词：淹溺急性肺损伤水通道蛋白1
- 大鼠静注鞭毛蛋白后不同时相点肺急性炎症损伤的研究被引量：3
- 2008年
- 目的研究经尾静脉注入鞭毛蛋白后,不同时相点大鼠肺水肿以及肺部炎症的发生情况。方法210只清洁级雄性Wistar大鼠,分三批,每批随机分为对照组和经尾静脉注入鞭毛蛋白致伤,2、4、6、12、24、48h时6个不同时相点检测组,共七组。正常对照组大鼠给予生理盐水,致伤组大鼠给予鞭毛蛋白50μg/kg,静注后分别于2、4、6、12、24、48h时,测定动脉血氧分压(PaO2);肺毛细血管通透性(Evans blue含量);肺组织湿干比值(W/D);肺泡灌洗液(BALF)细胞计数以及用ELISA法检测外周血、肺组织与BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-10细胞因子的含量。结果静注鞭毛蛋白后,随时间的增加,大鼠PaO2下降;毛细血管通透性增加;肺W/D增加;BALF的细胞计数增加;外周血、肺组织及BALF中,TNF-α、IL-1β含量增加,IL-10含量减少。在致伤组与对照组之间,以上各指标差异有统计学意义(P<0.05)。结论静注鞭毛蛋白后,致大鼠肺急性炎症损伤具有时间差异性。
- 胡明冬徐剑铖周长喜杨昱
- 关键词：鞭毛蛋白急性肺水肿细胞因子
