杨红军
- 作品数：2 被引量：38H指数：1
- 供职机构：南京林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 草菇木聚糖降解酶系基因诱导表达调控机理研究
- 半纤维素降解菌在自然界中半纤维素的循环中起着重要的作用。草菇(Volvariella volvacea)以稻草等秸秆为生长基质通过生物转化将其转变为具有较高附加值的食用子实体。这显示草菇中应有完备高效的纤维素、半纤维素酶...
- 杨红军
- 关键词：草菇半定量RT-PCR
- 文献传递
- 中性内切型纤维素酶在毕赤酵母中高水平表达的研究被引量：37
- 2006年
- 中性内切型纤维素酶在纺织及造纸工业具有重要的应用,为了进一步提高从我国草菇中克隆的一种新的中性内切型纤维素酶(EG1)在Pichiapastoris中的表达水平,我们进行了提高基因拷贝数及高密度发酵等多种手段实现其高水平表达的研究。在前期研究的基础上,利用对已整合eg1的重组子再转化的方法,从含有2000μgLZeocin的YPDSZ平板上筛选到高抗Zeocin转化子,在摇瓶培养条件下,该转化子表达量比原来提高了3.8倍,在pH4～8条件下均有稳定表达,接种量(OD600=5.0)表达水平最好,提高甲醇的诱导浓度对表达有显著的促进作用。用3.2L发酵罐进行了高密度发酵,甲醇诱导95.5h后达到最高值,比摇瓶培养再提高了6.4倍,因此利用高抗Zeocin转化子及高密度发酵的手段,使EG1的表达水平提高了34倍,蛋白表达量达8.80mgmL,EG1酶活达到543.36IUmL,实现了中性内切纤维素酶的高水平表达,本研究将大大促进建立我国纺织用纤维素酶大规模高效生产技术。
- 丁少军宋美静杨红军邢增涛周蕊曹杰
- 关键词：毕赤酵母
