杨菊林
- 作品数：8 被引量：69H指数：4
- 供职机构：中国海洋大学海洋生命学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程化学工程更多>>
- 酶促反应制备壳寡糖及壳寡糖分析被引量：4
- 2008年
- 用壳聚糖酶降解法对壳聚糖进行降解制备壳低聚糖，研究了温度、pH、底物浓度、脱乙酰度、反应时间对酶促反应的影响。对酶解产物进行HPLC分析，用Bio—Gel P-4柱对酶解产物进行初步分离。结果表明，壳聚糖酶降解壳聚糖的最适温度为45℃，pH为6．0，最适底物质量分数为6％，脱乙酰度越高酶解反应所得产物的数均相对分子质量越小，24h后酶解反应达到平衡，酶解产物壳寡糖水溶性极好。P-4柱分离得到聚合度20以上，10～20，10以下3种壳寡糖。
- 杨菊林韩宝芹刘万顺
- 关键词：壳聚糖酶壳寡糖
- 兔眼玻璃体腔两性霉素B的高效液相色谱法测定被引量：3
- 2005年
- 目的:建立高效液相色谱(HPLC)法测定新西兰大白兔眼玻璃体腔两性霉素B.方法:兔眼玻璃体溶液两性霉素B标本100μL经过冷冻干燥后,加入乙腈-水(70:30)20 μL去蛋白,并溶解浓缩回收目标药物,13 000r·min-1离心5 min,取10 μL进样分析.色谱条件为流动相:乙腈-10 mmol·L-1磷酸二氢钠溶液(35:65),流速:0.20 mL·min-1,C18色谱柱,柱温:25℃,检测波长:410nm.结果:两性霉素B在3～500μg·L-1内线性关系良好(r=0.998 8),高、中、低3种浓度的方法回收率为99%～108%,绝对回收率为83%～93%;日内、日间RSD分别为3.1%～12.6%,3.8%～12.9%;检测灵敏度为1μg·L-1.结论:本方法适用于兔眼玻璃体腔两性霉素B的定量分析,过程简单,方法稳定,结果可靠.
- 刘爱明杨菊林杨一涛董晓光
- 关键词：两性霉素B兔眼玻璃体腔高效液相色谱法
- 乙酰丙酮法测定甲壳胺寡糖数均分子量被引量：20
- 2004年
- 采用乙酰丙酮与氨基端反应的生色原理,将乙酰丙酮法应用于甲壳胺寡糖数均分子量的测定。通过对方法的重复性、精密性和稳定性试验,证明方法可靠。同时,通过对已报道测定甲壳胺寡糖端基相对分子质量的铁氰化钾法、HPLC法进行比较。结果表明:乙酰丙酮法比铁氰化钾法更适合甲壳胺寡糖数均分子量的测定。
- 韩宝芹位晓娟房子刘万顺杨菊林
- 关键词：乙酰丙酮法数均分子量HPLC
- 壳聚糖酶分离纯化、性质及降解产物壳寡糖制备与分析
- 壳聚糖酶是一种专一性降解壳聚糖的水解酶，可用于制备功能性的壳寡糖，又可作为生物控制剂，提高植物的抗病能力。
从本实验室保存菌株出发，在温度30℃，转速100rpm，pH6.0，通气量8L/min条件下进行发酵罐...
- 杨菊林
- 关键词：壳聚糖酶酶解壳寡糖分离纯化降解产物
- 文献传递
- 壳聚糖酶的分离纯化及性质研究被引量：16
- 2006年
- 以本实验室分离的产壳聚糖酶YJ02菌株出发,制备壳聚糖酶发酵液,经离心、(NH4)2SO4分级盐析、Q-SepharoseFast Flow阴离子交换、Sephacry S-100凝胶过滤分离纯化步骤,SDS-PAGE显示为一条带,壳聚糖酶纯化了28.9倍,收率为47.6%。该酶的性质研究表明,该酶的分子量为66.2KD,最适反应温度为50℃,最适反应pH为6.0;Mn2+对酶活力有明显的促进作用,Cu2+,Fe3+,Hg2+对酶活力有抑制作用;小分子有机物EDTA和SDS对酶活力有抑制作用,而IAA和β-巯基乙醇对酶活力稍有促进作用。该壳聚糖酶对高脱乙酰度壳聚糖底物水解作用强,酶解位点可能为NGlc-NGlc,酶最大反应速度Vmax=4.1μmol/min,常数Km为64mmol/L。此壳聚糖酶水解壳聚糖制备的壳寡糖数均分子量为2 400Da。
- 韩宝芹杨菊林刘万顺郝日光
- 关键词：壳聚糖酶分离纯化酶学性质壳寡糖
- RP-HPLC测定兔眼房水中环孢素浓度被引量：5
- 2005年
- 目的:建立RP-HPLC测定兔眼房水中环孢素浓度,为环孢素局部缓释给药系统的药物动力学研究提供依据。方法: 以环孢素D为内标物,兔眼房水标本0．2 ml经乙醚单步提取挥干后,20μl甲醇溶解回收,以C18硅胶键合相为固定相,乙腈: 水(88:12)为流动相,紫外检测波长为200 nm,流速:0．1 ml·min-1;柱温:75℃。结果:CsA兔眼房水浓度在25～500 ng·ml-1 范围内呈良好的线性关系,r=0．996 5,方法的相对回收率为100．6％,绝对回收率为85．7％,日内和日间RSD均小于10％,最低检测限为10 ng·ml-1。结论:本方法灵敏度高,操作简单快速,结果可靠,可用于兔眼房水中CsA浓度检测。
- 刘爱明李伟杨菊林王本敏
- 关键词：反相高效液相色谱法眼房水环孢素
- 高产壳聚糖酶菌株的筛选和发酵产酶条件研究被引量：24
- 2005年
- 为探讨专一性地降解甲壳质或壳聚糖的甲壳质酶或壳聚糖酶 ,从采集的土样中分离到 4株产壳聚糖酶能力较强的菌株 ,经摇瓶复筛 ,菌株YJ0 2产酶能力最强。对其发酵产酶条件的研究结果表明其产酶最适培养基组分为 (% ,w/v) :粉末壳聚糖 2 .0 ,葡萄糖 0 .1,NH4NO3 1.0 ,酵母提取物 0 .5 ,K2 HPO40 .0 7,KH2 PO40 .0 3 ,NaCl0 .5 ,MgSO4·7H2 O 0 .0 5 ,起始 pH 6.0。最适产酶培养条件是 :5 0 0mL三角烧瓶装瓶量为 15 0mL ,2 .0 % (v/v)接种量 ,3 0℃ ,15 0r/min培养 72h。在最适产酶培养条件下 ,72h时菌株YJ0 2发酵液中壳聚糖酶活力可达到 17.0 4U/mL。
- 逄玉娟韩宝芹刘万顺杨菊林
- 关键词：壳聚糖壳聚糖酶发酵条件
- 反相高效液相色谱法测定兔眼房水环孢素A(英文)被引量：1
- 2005年
- 目的以环孢素D为内标物,建立RP-HPLC法测定兔眼房水环孢素A(CsA)药物浓度.方法兔眼房水标本经乙醚单步提取挥干后,色谱过程使用ODS柱,乙腈:水(89:11)为流动相,流速:0.1mL·min-1,75℃柱温下进行色谱分析,紫外检测波长为200nm.结果方法的绝对回收率平均为86%,相对回收率平均为100.7%,CsA兔眼房水浓度在25～500ng·mL-1范围内呈良好的线性关系,r=0.9986,最低定量限与最低检测限分别为25ng·mL-1,10ng·mL-1.结论眼科药物研究过程中大量房水标本检测实践表明,本方法过程简便、快速、结果准确,精密度符合方法学要求.
- 刘爱明杨菊林吕志华
- 关键词：环孢素A反相高效液相色谱法兔眼房水
