杨辉
- 作品数：98 被引量：403H指数：10
- 供职机构：华中科技大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金贝朗麻醉科学研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学经济管理政治法律更多>>
- 重组人前脑啡肽原基因腺相关病毒载体的构建及其镇痛效应的研究
- 研究背景及目的：近来研究证明，将镇痛相关基因导入中枢神经系统能取得较好的镇痛作用，这为晚期癌症患者和慢性疼痛患者带来了希望。重组腺相关病毒是目前认为最安全的病毒载体，在许多疾病的治疗中都得到应用。但在疼痛治疗领域研究较少...
- 杨辉
- 关键词：腺相关病毒镇痛中枢神经基因表达
- 文献传递
- 猿肾病毒40大T抗原基因永生化大鼠神经前体细胞株的构建被引量：18
- 2005年
- 目的建立猿肾病毒40大T抗原基因(SV40Tag)永生化大鼠神经前体细胞株,为细胞移植治疗和转基因治疗提供稳定的细胞来源。方法利用脂质体介导的基因转染技术将含有SV40Tag的质粒pCMVSV40T/PUR转染原代培养的新生大鼠神经前体细胞,经嘌呤霉素筛选,阳性克隆扩大培养并连续传代。应用巢蛋白抗体进行细胞鉴定,5%胎牛血清诱导细胞分化后,应用免疫细胞化学法检测其分化能力,观察细胞的形态及其生长状况,绘制细胞生长曲线。用RT-PCR、Southern印迹杂交和免疫细胞化学法检测SV40Tag在转染细胞中的表达。结果转染细胞经筛选培养后获得1 个阳性细胞克隆,免疫细胞化学结果显示细胞的巢蛋白和微管相关蛋白2染色为阳性,增殖能力较强。5%胎牛血清可诱导转染细胞分化为微管相关蛋白2阳性和胶质纤维酸性蛋白阳性细胞。Southern印迹杂交结果显示转染细胞基因组中存在SV40Tag cDNA,并可检测到SV40Tag mRNA及其蛋白的表达。转染细胞经扩大培养,命名为永生化神经前体细胞。贴壁培养的神经前体细胞,群体倍增时间为(22.9±2.7)h,传代、冻存和复苏对细胞形态及生长无明显影响。结论成功地构建了SV40Tag永生化的大鼠神经前体细胞株。
- 高峰田玉科杨辉安珂张传汉
- 关键词：猴病毒40永生化神经前体细胞新生大鼠细胞株大T抗原
- 急性等容血液稀释时患者围术期血液生理和肝肾功能的变化被引量：3
- 2003年
- 目的 探讨急性等容性血液稀释(ANH)血液生理和肝肾功能的变化。方法 选择全麻下行开颅术患者40例,ASA分级为Ⅱ～Ⅲ级,术前无贫血、凝血障碍和肝肾功能异常,随机分为两组,一组在麻醉稳定后放血(15ml/kg),同时经肘静脉等速输入等量的6％羟乙基淀粉(稀释组);另一组传统输血为对照(输血组)。两组患者分别在术前和术后抽血检测血常规、凝血功能,在术前和术后1天抽血查肝肾功能,统计两组患者术中出入总量和尿量。结果 两组患者术中出血量无显著差异,稀释组需异体血量显著低于输血组。两组患者术后凝血酶原时间(PT)、部分凝血活酶时间(APTT)明显延长(P<0.05)、PLT显著降低,但在正常范围内,输血组变化比稀释组明显,均超过正常范围;术后输血组患者GPT升高,平均值达44.5U,其中9例异常(>45U),4例BUN异常,稀释组术后BUN无明显变化。结论 ANH和传统输血方法相比对血液生理和肝、肾等器官的影响较小,更安全,适用于临床。
- 王芙蓉杨辉王鹏田玉科
- 关键词：急性等容血液稀释血液生理肝肾功能ANH病例分析
- 紫杉醇诱导神经病理性疼痛大鼠脊髓背角5-羟色胺含量变化被引量：2
- 2012年
- 目的观察紫杉醇诱导神经病理性疼痛大鼠脊髓背角5-羟色胺(5-HT)含量变化。方法雄性SD大鼠54只,体重约300 g,随机均分为正常对照组(A组)、紫杉醇溶媒组(B组)和紫杉醇组(C组)。分别于腹腔注药前1 d、注药后3、5、7、9、11、14、18、21 d检测大鼠机械缩爪阈值。腹腔注药前1 d、注药后7、14、21 d每组各处死大鼠4只,取脊髓腰膨大背角组织,用高效液相色谱荧光法测定5-HT含量。腹腔注药后14 d取大鼠右侧坐骨神经,透射电镜观察神经病变情况。结果与注药前1 d比较,C组机械缩爪阈值从紫杉醇注射后7 d开始显著降低,并持续至注药后21 d达最低值(P<0.05),且显著低于A、B组(P<0.05)。坐骨神经超微结构C组纤维髓鞘板层结构松散,排列紊乱、肿胀变形、厚薄不均,A和B组大鼠坐骨神经未见异常。C组脊髓背角5-HT含量注药后7 d开始显著升高,并持续至注射后21 d达最高值(P<0.05),且显著高于A、B组(P<0.05)。C组大鼠脊髓背角5-HT含量与机械缩爪阈值呈显著线性负相关(r=-0.981,P<0.05)。结论紫杉醇诱导的神经病理性疼痛大鼠脊髓背角组织中5-HT含量表达上调,该变化可能参与了紫杉醇所致神经病理性疼痛的发病机制。
- 刘希江曹菲卜慧莲高峰杨辉田玉科
- 关键词：紫杉醇神经病理性疼痛脊髓背角5-羟色胺高效液相色谱法
- 右美托咪定用于俯卧位硬膜外麻醉患者镇静的临床观察被引量：6
- 2014年
- 目的：观察右美托咪定静脉镇静用于俯卧位经皮肾镜取石术硬膜外麻醉患者的可行性与安全性。方法选取2012年4-8月在北京航天总医院40例行硬膜外麻醉下经皮肾镜取石术患者，ASA分级Ⅰ-Ⅱ级，随机分为两组：右美托咪定组（D组）和对照组（C组），每组20例。俯卧位后10min D组缓慢泵注右美托咪定0.5μg/kg的负荷剂量，并以起始剂量0.2μg/（kg·h）泵注维持。每10分钟进行1次RASS评分，根据评分，右美托咪定的剂量每次相应增减0.1μg/（kg·h）以维持RASS评分为-2分。 C组患者不给予静脉镇静用药。术中记录两组患者各时间点的RASS评分、呼吸频率和一般生命体征。麻醉平面确定后10min（T1）、俯卧位后10min（T2）、镇静开始10min（T3）时采集动脉血行血气分析，患者术中舒适满意度于术后24h评定。记录术后24h内并发症。结果手术期间各时点患者RASS评分D组显著低于C组（P〈0.01）；D组患者呼吸频率较同时点C组显著增加（P〈0.01）；两组患者各时点血氧饱和度、动脉氧分压、动脉血二氧化碳分压比较差异均无统计学意义（P〉0.05）；镇静开始后，D组患者血压逐渐下降，心率减慢，D组平均动脉压、心率均低于C组（P〈0.01）；D组患者术中满意度显著高于C组（P〈0.05），术后并发症显著低于C组（P〈0.01）。结论右美托咪定可安全用于俯卧位经皮肾镜取石术硬膜外麻醉患者的静脉镇静，血流动力学较平稳，无呼吸抑制，不良反应少。
- 陈素丽杨辉赵祉阳
- 关键词：俯卧位硬膜外麻醉
- 一种基于多源信息融合的空中造楼机动态安全预警方法及系统
- 本发明公开了一种基于多源信息融合的空中造楼机动态安全预警方法和系统，该方法包括模型变量的选择和预处理；分别采用快速DTW算法和Direct‑LiNGAM算法构建多源传感器图网络，输入至GraphSAGE中进行节点嵌入与信...
- 张立茂王迦淇李永胜杨辉肖仲华黄锦庭王堃宇吴贤国邬毛志林鹏辉郭靖
- rAd5／NR2B镇痛疫苗对神经病理性痛大鼠认知功能的影响被引量：1
- 2010年
- 目的评价N-甲基-D天冬氨酸受体2B亚基（NR2B）基因重组腺病毒（rAd5／NR2B）对神经病理性痛大鼠认知功能的影响。方法雌性SD大鼠40只，体重180～200g，随机分为4组（n=10）：对照组（C组）、rAd5／NR2B镇痛免疫组（rAd5／NR2B组）、神经病理性痛组（SP组）和rAd5／NR2B镇痛疫苗＋神经病理性痛组（rAd5／NR2B＋SP组）。C组和rAd5／NR2B组分别胃内灌注生理盐水0．1ml和rAd5／NR2B镇痛疫苗1×10^8 PFU，2周后重复灌注。SP组制备神经病理性痛模型，1周后腹腔注射生理盐水0．1ml。rAd5／NR2B＋SP组胃内灌注rAd5／NR2B镇痛疫苗1×10^8 PFU，2周后重复灌注，再1周后制备神经病理性痛模型。测定大鼠机械缩爪阈值（MWT）。行Morris水迷宫实验测定大鼠认知功能，记录潜伏期和游泳速度。采用免疫组织化学法检测大鼠海马NR2B的表达水平。结果（1）与C组比较，rAd5／NR2B组MWT差异无统计学意义（P〉0．05），SP组和rAd5／NR2B＋sP组MWT降低（P〈0．05）；与SP组比较，rAd5／NR2B＋SP组MWT升高（P〈0．05）。（2）各组游泳速度比较差异无统计学意义（P〉0．05）；与C组比较，rAd5／NR2B组潜伏期差异无统计学意义（P〉0．05），SP组和rAd5／NR2B＋SP组潜伏期延长（P〈0．05）；与SP组比较，rAd5／NR2B＋SP组潜伏期差异无统计学意义（P〉0．05）。（3）与C组比较，rAd5／NR2B组和rAd5／NR2B＋SP组海马NR2B表达差异无统计学意义（P〉0．05），SP组海马NR2B表达上调（P〈0．05）；与SP组比较，rAd5／NR2B＋SP组海马NR2B表达下调（P〈0．05）。结论rAd5／NR2B疼痛疫苗对神经病理性痛大鼠认知功能无明显影响。
- 杨少兵王公明杨辉高峰田学愎刘希江罗婷田玉科
- 关键词：腺病毒科神经痛
- 大鼠δ阿片受体基因小发卡RNA及人前脑啡肽原基因双表达慢病毒载体的构建与鉴定被引量：1
- 2012年
- 目的构建大鼠δ阿片受体(delta opioid receptor,DOR)基因小发卡RNA(shRNA)及人前脑啡肽原基因(hu-man preproenkephalin gene,hPPE)双表达慢病毒载体并鉴定。方法根据大鼠DOR mRNA序列设计shRNA并合成包含正、反义靶序列的互补DNA链,退火后插入至shRNA表达载体pENTR/U6vector中,构建shRNA表达质粒,并转化至感受态细胞DH5α,抽提质粒后进行测序。合成hPPE基因序列并插入到表达载体pcDNA3.1(+)中,转化至感受态细胞DH5α,挑取多个单克隆进行测序验证。将hPPE插入已构建成功的pENTR/U6-shRNA载体中,再与慢病毒载体pLenti7.3/V5-DEST重组,构建慢病毒载体pLenti-CMV-hPPE-U6-shRNA并转化DH5α感受态细胞,筛选阳性克隆并测序验证,保留测序验证正确的LR重组质粒。用构建的慢病毒表达载体pLenti-CMV-hPPE-U6-shRNA和包装质粒共转染293T细胞,包装病毒,并测定滴度。结果经测序验证重组质粒pENTR/U6-shRNA、pcDNA3.1(+)-hPPE和慢病毒载体pLenti-CMV-hPPE-U6-shRNA均构建成功。大鼠δ阿片受体基因小发卡RNA及人前脑啡肽原基因双表达慢病毒包装成功,病毒滴度为1×107 TU/mL。结论大鼠DOR基因小发卡RNA及人前脑啡肽原基因双表达慢病毒载体构建成功,为研究DOR和hPPE在吗啡耐受中的作用机制及探求更加合理的镇痛方式奠定了基础。
- 逄坤芳陈鹤翔杨辉卜慧莲刘希江
- 关键词：Δ阿片受体RNA干扰慢病毒吗啡耐受
- 不同途径注射含人脑啡肽原基因重组腺相关病毒对慢性神经病理痛大鼠的镇痛作用
- 2013年
- 目的构建含人前脑啡肽原基因的腺相关病毒载体（rAAV／hPPE），将此病毒载体通过不同途径注射至慢性疼痛模型大鼠体内，观察rAAV介导的hPPE体内转染的镇痛作用。方法将阳性对照质粒rAAV／hPPE分别经蛛网膜下、尾静脉和骨骼肌3种途径注射至慢性挤压伤疼痛模型大鼠体内，观察注射后大鼠热痛阈和机械痛阈的变化，8周后，处死大鼠，运用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定大鼠组织hPPE的表达，用放射免疫方法测定大鼠器官组织中亮氨酸．脑啡肽（L—EK）的含量。结果行为学结果说明3种给药方式均可在5d-8周内对坐骨神经慢性挤压（CCI）热痛阈和机械痛阈显著升高；L—EK在脊髓组织中表达水平最高的是鞘内注射组而在血管和心肌组织中表达最高的是静脉注射组；PCR结果表明3种给药方式导致不同组织hPPEmRNA表达水平增高。结论将rAAV／hPPE注射到CCI大鼠体内，rAAV能将hPPE导入易感细胞，并获得较好的镇痛效果。
- 杨辉高峰安珂田学愎王鹏田玉科江辉
- 关键词：腺相关病毒疼痛
- 生物细胞的永生化和去永生化在细胞镇痛中的应用进展被引量：2
- 2004年
- 慢性疼痛和晚期癌痛的治疗研究一直是生命科学的重要课题之一,传统的药物止痛有着诸多不可避免的缺陷。目前,细胞镇痛在动物实验研究方面获得了大量的资料和经验,虽然生物细胞的永生化可暂时解决镇痛细胞的来源和存活等问题,但因其潜在的致瘤性,限制了其推广应用。迄今,随着可诱导的Cre-LoxP重组酶系统在细胞去永生化中的应用,在镇痛细胞的来源、存活和安全性等方面取得了突破性进展,为细胞镇痛的临床应用奠定了基础。
- 安珂杨辉田玉科
- 关键词：生物细胞永生化慢性疼痛
