杨辉
- 作品数：105 被引量：222H指数：8
- 供职机构：广西大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金南宁市科学研究与技术开发计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学理学更多>>
- 芽孢杆菌左聚糖蔗糖酶基因克隆、表达及分子改造
- 果聚糖(Fructan)包含低聚果糖、高聚果糖,是一类主要以果糖残基为单体聚合而成的多糖,分子量范围分布较广。高聚果糖通常分为两大类,一类主要由β-(2,1)糖苷键连接而成,归类为菊糖(Inulin);另一类通常是以β-...
- 杨辉
- 关键词：克隆分子改造
- 文献传递
- Bacillus paralicheniformis左聚糖蔗糖酶基因克隆表达及酶学性质研究被引量：3
- 2020年
- [目的]从耐热菌株中克隆表达左聚糖蔗糖酶基因,以获得热稳定性较好、底物耐受性高的重组酶,为左聚糖蔗糖酶催化机理及生产应用研究提供技术基础。[方法]从市售菌肥中筛选耐热菌株并克隆其左聚糖蔗糖酶基因,以pSE380为载体构建重组质粒并转化至大肠杆菌诱导表达,随后通过镍亲和层析获得电泳纯的重组左聚糖蔗糖酶并研究其酶学性质。[结果]分离到耐热菌株LN-05,经16S rDNA序列分析鉴定为Bacillus paralicheniformis。克隆表达的B.paralicheniformis左聚糖蔗糖酶与已公布地衣芽孢杆菌(B.licheniformis) RN-01的左聚糖蔗糖酶存在19个氨基酸残基差异。重组酶催化水解反应最适pH为6.0,最适温度为45℃,于40和45℃保温3 h后残余酶活力分别为89%和78%。Mn^2+、Ag^3+和Cr^2+对重组左聚糖蔗糖酶的水解活力有明显抑制作用,Co^2+和Al3^+对水解活力具有一定促进效果;Ba^2+、Mg^2+和Mn^2+对聚合活力有明显抑制作用,Ag^3+、Cu^2+和K^+对聚合活力具有促进作用。EDTA对重组酶水解活力和聚合活力均具有抑制作用。在最适条件下,重组左聚糖蔗糖酶的最大反应速率(V(max))=74μmol/(min·mg),米氏常数(Km)为7.57 mmol/L。催化聚合反应的最适温度随着底物蔗糖浓度而变化,当蔗糖浓度为50%时,最适温度为40℃;最适聚合反应pH为5.0;当酶浓度为0.9 U/mL,在最适条件下反应24 h,左聚糖产糖量达183.00±1.73 g/L,蔗糖转化率为(36.76±1.84)%。[结论]B.paralicheniformis左聚糖蔗糖酶的热稳定性较好,左聚糖产量高,具有转化蔗糖生产高附加值左聚糖的应用潜力。
- 丛豪罗宁黄飞梁月昭陈硕昌张声峰朱萍杨辉
- 关键词：克隆表达酶学性质
- 热醋酸梭状芽胞杆菌发酵葡萄糖和木薯粉产醋酸
- 2011年
- 在恒定pH值条件下,利用同型乙酸菌热醋酸梭状芽胞杆菌(Clostridium thermoaceticum)进行葡萄糖分批发酵、补料分批发酵和木薯粉发酵醋酸的初步研究。最适发酵葡萄糖模式:补糖的同时加入3倍量的氮源和微量元素补料分批发酵。醋酸产量40.2g/L,葡萄糖利用率98%,葡萄糖转化率0.82g/g,发酵时间为216h。结合葡萄糖发酵特点和木薯粉酶解条件摸索出木薯粉发酵条件:木薯液化后直接加入适量的糖化酶进行发酵并在发酵过程中补加适量糖化酶使醪液中葡萄糖浓度保持在一定范围内。醋酸产量47.3g/L,葡萄糖利用率94.75%,葡萄糖转化率0.89g/g,发酵时间192h。不添加过量的氮源和微量元素同时省略了糖化工段,底物转化率提高时间缩短,是比较理想的发酵模式。
- 潘丽霞杨登峰杨辉李秉正黄慨
- 关键词：木薯粉醋酸补料分批发酵
- 类芽孢杆菌产胆固醇氧化酶的最适产酶条件研究
- 2012年
- 对诱变过的产胆固醇氧化酶的类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.X534)在最适培养基进行了发酵条件的优化,确定其最适发酵条件为起始pH值为8,接种量8%,装液量16%,摇瓶转速180r/min,培养温度34℃,发酵时间50h。优化之后胆固醇氧化酶活达到约580U/L,比优化前提高了约1.5倍。
- 赵芳赵巧丽杨辉张建周河治
- 关键词：胆固醇氧化酶发酵
- 我国糖蜜酒精废液治理技术的回顾和展望被引量：26
- 2002年
- 综述了七十年代以来我国糖蜜酒精废液治理技术的发展历程及有关治理方法 。
- 欧胜彬杨辉梁海秋周河治方张明
- 关键词：糖蜜酒精废液白地霉生物技术糖厂废水处理
- 城市及农村居民高血压防治知识知晓率比较分析
- 2020年
- 目的了解城市与农村居民对高血压防治知识知晓情况。方法2017年2月-2019年5月,按照随机数表法抽取汉中市汉台区新桥社区以及汉台区某某村各200名居民作为调查对象。结果城市居民高血压防治知识总体知晓率为55.26%(1524/2758),明显高于农村居民39.01%(1043/2674),有统计学差异(P<0.05)。结论不管是城市还应时农村居民对高血压防治知识的知晓情况依然较为薄弱,所以医疗卫生部门应较强开展健康宣教的力度,才能提高居民高血压防治知识知晓情况,降低高血压的发生率。
- 黄叶梅杨辉
- 关键词：城市农村居民高血压防治知识知晓率
- 少根根霉菌株发酵生产纤溶酶条件的研究被引量：2
- 2007年
- 发酵条件优化可提高少根根霉菌株8B所产纤溶酶的活性。使用单因素试验和正交试验确定该菌发酵产酶的最佳条件。试验确定最优化发酵条件,培养基:麸皮水5 g/L,尿素5 g/L,胰蛋白胨0.5 g/L,K2HPO4.3H2O0.3 g/L,MgSO4.7H2O 0.15 g/L,pH 5.5,摇床转速160 r/m in,30℃发酵56 h。在此优化条件下培养,8B产纤溶酶活力达到345.41 U/mL,是初始培养基发酵产酶活力的7.52倍。
- 张云瑞常翠贤梁海秋杨辉周河治
- 关键词：少根根霉纤溶酶发酵条件
- 蔗糖直接发酵衣康酸高产菌株的选育被引量：3
- 2003年
- 本文工作以土曲霉NRRL1960为出发菌株,采用Co^(60)、紫外线、亚硝基胍、光敏试剂8-MOP处理等多种理化方法选育衣康酸高产菌株。所得菌株T730在含蔗糖10％的培养基中,于30～35℃在10L发酵罐中培养约66h,产酸率达6.6％,糖酸转化率达66％。该菌株转化率高、稳定性好,具有很大的生产应用价值。
- 杨辉梁海秋杨漓廖威周河治
- 关键词：蔗糖发酵衣康酸高产菌株选育
- 分子酶工程的研究进展被引量：5
- 2004年
- 随着基因工程和蛋白质工程的进展和应用,酶工程在分子水平上的研究与应用也得到了迅猛发展。本文着重介绍了酶基因克隆与异源表达、酶分子的定向改造和进化、融合蛋白与融合酶、酶的人工模拟(抗体酶、分子印迹技术)和端粒酶,综述了分子酶工程的研究进展、趋势及其应用。
- 严萍梁海秋杨辉周河治
- 关键词：分子酶工程基因克隆端粒酶
- 重组左聚糖蔗糖酶生产左聚糖工艺优化被引量：1
- 2023年
- 利用5 000 L发酵罐中试所得的大肠杆菌重组枯草芽孢杆菌左聚糖蔗糖酶酶制剂转化蔗糖生产左聚糖,并优化其工艺条件。选择反应pH值、反应温度和蔗糖质量浓度为主要影响因素,分别以蔗糖转化率和左聚糖产量为响应值,利用Box-Behnken响应面试验对酶法合成左聚糖工艺条件进行优化。响应面试验结果表明:在重组左聚糖蔗糖酶浓度1.6 U/mL、反应pH6.3、反应温度26℃、410 g/L蔗糖的条件下反应30 h,得到的左聚糖产量最高,为(138.59±2.90)g/L,比优化前提高了约80%。在酶浓度1.6 U/mL、反应pH6.5、反应温度24℃、310 g/L蔗糖的条件下反应30 h,得到最高蔗糖转化率(36.73±0.60)%,比优化前提高了约19%。上述优化条件在5 L反应体系中可保持稳定的生产效率,为规模化酶法生产左聚糖的工业应用提供了技术基础。
- 梁文凤侯媛媛郭晓磊陈硕昌朱萍蒙健宗杨辉
- 关键词：响应面法
