梁迪
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：北京林业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 灰色链霉菌中乙酰木聚糖酯酶基因的克隆、表达及酶学性质研究被引量：1
- 2015年
- 根据Gen Bank数据库中已报道的灰色链霉菌(Streptomyces griseus)全基因组序列,分析得到假定的乙酰木聚糖酯酶基因序列并设计引物;利用分子克隆的方法得到该菌株基因组中乙酰木聚糖酯酶基因,并构建原核表达载体p ET28a-Sgraxe,经IPTG诱导表达重组Sgr Axe,Ni-NTA亲和层析法纯化该蛋白。结果显示,克隆得到乙酰木聚糖酯酶基因axe,其序列全长1 008 bp,编码336个氨基酸。SDS-PAGE检测带有p ET28a-Sgraxe转化菌株诱导表达产物相对分子量约为37 k D,与理论值相符。纯化的重组Sgr Axe酶学性质表明,该酶最适反应温度为50℃,最适p H8.0,热稳定性较强,p H作用范围广;金属离子对酶均表现为抑制作用,尤其是Zn2+严重抑制酶活力;重组酶特征的分析揭示了其在工业中潜在的应用价值。
- 刘伟娜梁迪王晓宇玉王宁厚凌宇金一谢响明
- 关键词：灰色链霉菌原核表达纯化酶学性质
- 细菌β-甘露糖苷酶和真菌裂解性多糖单加氧酶的克隆表达及性质研究
- 纤维素酶和半纤维素酶均属于糖苷水解酶(Glycoside hydrolase，GH，EC3.2.1)，该类酶通过内切或外切的方式使各种糖苷键断裂。经典理论认为，生物质多糖被糖苷水解酶以水解的形式协同降解，例如甘露聚糖需要...
- 梁迪
- 关键词：木质素降解酶协同降解
- 嗜热绿色糖单孢菌木聚糖酶XyN10A基因在毕赤酵母中的分泌表达及其酶学性质研究被引量：1
- 2014年
- 木聚糖酶(Xylanase)可降解自然界中大量存在的木聚糖类半纤维素,由于其在饲料、食品、造纸等领域的广泛应用,越来越受到人们的关注。利用分子生物学技术首次成功构建了一株高效表达嗜热绿色糖单孢菌(Saccharomonospora viridis)木聚糖酶SviXyN10A的重组工程菌,建立了SviXyN10A的毕赤酵母表达体系,实现了SviXyN10A在毕赤酵母(Pichia pastoris)中的分泌表达,并对表达产物进行了诱导表达及纯化,以及酶学性质的研究。结果表明,重组木聚糖酶SviXyn10A用甲醇诱导2 d后酶活即达到7.53IU/mL,最适反应温度为70℃,pH7.0。pH作用范围较广(pH5.0-9.0),具有较强的热稳定性和耐碱性,几乎没有纤维素酶活性,故可以应用在很多工业领域,尤其是在纸浆造纸行业具有很大的潜在应用价值。
- 玉王宁刘伟娜郑菲厚凌宇王晓宇梁迪王伟轩张朔柳静言金一谢响明
- 关键词：木聚糖酶分泌表达毕赤酵母
