楼屹 作品数:9 被引量:15 H指数:2 供职机构: 上海第二医科大学附属仁济医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 上海市教委科研基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 环境科学与工程 生物学 更多>>
重组单纯疱疹病毒-胸苷激酶和人白介素-2基因痘苗病毒真核表达载体的构建 2001年 目的 构建含单纯疱疹病毒 胸苷激酶 (HSV tk)和人白介素 2 (hIL 2 )基因的痘苗病毒真核表达载体 pMJ6 0 1,为进一步实施胃癌的基因治疗作必要的准备。 方法 利用目的基因与载体的连接、感受态细胞的制备及转化、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、酶切、DNA序列分析等多种基因工程技术 ,将纯化回收的HSV tk和hIL 2分别与 pMJ6 0 1进行连接、转化并鉴定。 结果 分别用BamHⅠ HindⅢ和SalⅠ BamHⅠ酶切位点 ,将HSV tk与hIL 2DNA成功地克隆到pMJ6 0 1真核表达载体上。结论 重组HSV tk +hIL 2基因 pMJ6 0 1的构建 ,为进一步研究胃癌的基因治疗打下坚实的基础。 郜恒骏 朱红音 顾伟齐 楼屹 任卫平 萧树东关键词:单纯疱疹病毒-胸苷激酶 白介素-2 痘苗病毒 基因治疗 真核表达载体 金属螯合亲和层析法对重组幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的纯化 被引量:1 2002年 背景:幽门螺杆菌(H.pylori)疫苗是近年研究的热点。H.pylori尿素酶B亚单位(UreB)是理想的候选抗原。目的:获得纯化的重组H.pylori UreB(rUreB),为进一步的H.pylori疫苗制备打下基础。方法:采用金属螯合亲和层析法(MCAC)在变性条件下纯化rUreB,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和免疫印迹法鉴定纯化产物的分子量、纯度和抗原性。结果:纯化产物的分子量与预计分子量相符,具有良好的特异性UreB免疫原性,且一步即可达到90%以上的纯度。结论:MCAC是一种简单、高效的rUreB纯化方法。 史彤 刘文忠 朱红音 楼屹 萧树东关键词:幽门螺杆菌 尿素酶B亚单位 纯化 尿素酶 幽门螺杆菌疫苗 胃炎 消化性溃疡 一种预防幽门螺杆菌感染的药物制剂 本发明公开了一种预防幽门螺杆菌感染的药物制剂以及本发明作为预防幽门螺杆菌感染的药物的应用。本发明的所述的药物可以通过鼻腔的方式或其他免疫学可行的给药途径对机体进行免疫,本发明的制备方法是将三种抗原蛋白与CpG-ODN在4... 萧树东 史彤 郑青 庞智 朱红音 刘文忠 楼屹文献传递 痘苗病毒真核表达载体pM J601的转化与鉴定 2000年 目的 对痘苗病毒表达载体 p MJ6 0 1进行转化与鉴定 ,为进一步实施痘苗病毒为载体的基因治疗作必要的准备。方法 利用感受态细胞的制备及转化、质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶酶切等多种基因工程技术对质粒 p MJ6 0 1进行转化及鉴定。结果 琼脂糖凝胶电泳清楚地显示了 p MJ6 0 1质粒 3条带和 Bam HI或 H ind 酶切后的线性条带。结论 痘苗病毒表达载体 p MJ6 0 1的转化与鉴定 ,为痘苗病毒载体系统的基因治疗打下了坚实的基础。 郜恒骏 朱红音 楼屹 顾伟齐 房静远 任卫平 萧树东关键词:痘苗病毒 基因工程 真核 重组人白细胞介素-2基因痘苗病毒真核表达载体的构建与鉴定 被引量:2 2000年 目的:构建含人白细胞介素-2(hIL-2)基因的痘菌病毒真核表达载体pMJ601,为进一步实施胃癌的基因治疗作必要准备。方法:利用质粒抽提、琼脂糖凝胶电泳、酶切、目的基因与载体的连接、感受态细胞的制备及转化和DNA序列分析等多种基因工程技术,将纯化回收的hIL-2基因分别与质粒pBluescriptⅡSK+/-及pMJ601进行连接、转化并签定。结果:克隆有hIL-2基因的pLXSN经EcoRI-BamHI酶切后,hIL-2基因被成功地连接到质粒pBluescriptⅡSK+/-上,再经Sail-BamHI酶切后,hIL-2基因又被克隆到pMJ601真核表达载体上。结论:重组hIL-2基因痘苗病毒真核表达载体pMJ601的构建为胃癌的免疫基因治疗打下了坚实的基础。 郜恒骏 朱红音 顾伟齐 楼屹 任卫平 萧树东关键词:重组人白细胞介素2 痘苗病毒 真核表达载体 胃癌 基因治疗 重组人神经营养因子-4/5蛋白抗砷、汞神经毒作用的初步研究 被引量:1 1999年 为观察重组hNT-4/5蛋白对三氧化二砷(As2O3)、溴化汞(HgBr2)毒性的抑制作用。将具有天然蛋白活性的重组hNT-4/5蛋白,加入到被不同浓度的As2O3、HgBr2染毒的各组鸡胚前脑神经细胞培养液中共同孵育,结果表明对照组与实验组的细菌存活数差异有显著性(P<0.01、P<0.05),说明重组hNT-4/5蛋白具有抑制As2O3。 楼屹 王国荃 殷明 殷明 应康 顾少华 应康 谢毅关键词:神经营养因子 三氧化二砷 神经毒作用 重组人神经营养因子-4/5蛋白抗三氧化二砷神经毒作用 被引量:8 1999年 目的初步观察重组人神经营养因子-4/5(hNT-4/5)蛋白对三氧化二砷毒性的抑制作用。方法利用hNT-4/5蛋白具有抗神经毒性的特点,采用本实验室克隆表达及部分纯化的具有天然hNT-4/5蛋白生物学活性的重组hNT-4/5蛋白,以不同水平的重组hNT4/5蛋白(0-100μl)与不同浓度的As2O3(0-160μmol/L)同时加入各组鸡胚前脑神经细胞和PC12细胞培养液中共同孵育24-48小时,观察其对染毒鸡胚前脑神经细胞存活和PC12细胞突起生长的影响作用。结果在鸡胚前脑神经细胞和PC12细胞中与As2O3共同培养48小时后,对照组与实验组的细胞存活率差异有显著性,而且细胞存活率和突起数目随hNT-4/5浓度增高而提高和增加。结论初步观察到重组hNT4/5蛋白具有抑制As2O3的毒性作用,为从基因工程途径寻找抗环境毒物因子提供了依据。 楼屹 王国荃 黄燕 殷明 戴建凉 应康 顾少华 刘建平 谢毅关键词:神经营养因子 三氧化二砷 神经毒 重组IL-2痘苗病毒表达载体pMJ601的构建与鉴定 2000年 郜恒骏 楼屹 朱红音 顾伟齐 房静远 任卫平 萧树东关键词:胃癌 基因治疗 幽门螺杆菌尿素酶B基因的克隆与重组基因的表达 被引量:3 1999年 目的:获得大量纯化的尿素酶B蛋白,为下一步的幽门螺杆菌疫苗研制作准备。方法:采用PCR方法克隆尿素酶B基因,利用基因工程技术进行基因重组,构建表达工程菌。结果:通过对载体、培养条件的优化选择,实现了尿素酶B编码基因在大肠杆菌中的高效表达。结论:克隆到的尿素酶B编码基因和表达的蛋白,其氨基酸序列与文献报道一致。 楼屹 朱红音 顾伟齐 萧树东 谢毅关键词:幽门螺杆菌 尿素酶B 基因