欧红梅
- 作品数：4 被引量：23H指数：3
- 供职机构：上海医药工业研究院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项“重大新药创制”科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 流式细胞术在体外微核分析中的应用进展被引量：10
- 2014年
- 体外微核试验以观察分裂细胞中微核的形成来检测化合物遗传毒性,试验周期较体内微核试验短、成本低且符合"减少、替代、优化"原则。与染色体畸变试验比较,体外微核试验还能检测非整倍体诱变剂,且检测终点简单,易于自动化检测。基于流式细胞仪的微核自动化检测技术与传统镜检技术相比,具有显著优势,可以快速、准确、高通量检测化合物的遗传毒性,且贴壁细胞和悬浮培养细胞均适用。本文阐述了流式细胞仪检测体外微核技术的发展,方法学验证,客观、高效、检测信息量大的优势,尚存不足之处及改进,望为其在体外微核试验中的广泛应用提供参考依据。
- 欧红梅涂宏刚周长慧常艳
- 关键词：体外微核试验毒性评价流式细胞术
- 流式细胞术检测体外微核方法的建立被引量：13
- 2015年
- 目的:建立96孔板流式细胞术体外微核自动化检测的方法,并探讨其用于药物早期遗传毒性筛选和遗传毒性评价的可能性。方法:试验分为+S9短时处理组(4 h)和-S9持续处理组(24 h),分别选择3个不同浓度的环磷酰胺和丝裂霉素C处理CHO-K1细胞,24 h后收获细胞。采用EMA和SYTOX Green双色标记,流式细胞仪分析96孔板的微核率,并与常规标准平皿培养、细胞分裂阻滞法的双核微核结果进行比较。结果:在有或无S9处理条件下,不同浓度的环磷酰胺、丝裂霉素C诱导产生的微核率较溶剂对照组均显著增加(P均<0.05),剂量-效应关系明显。两种微核检测方法的Spearman相关系数(r s)为1.000。结论:流式细胞术检测环磷酰胺、丝裂霉素C作用于CHO-K1细胞的微核试验结果均为阳性,与文献报道一致,因而本试验初步建立了流式细胞术体外微核检测方法。流式细胞术检测微核的方法与人工阅片的方法相关性好,提示该方法用于化合物早期遗传毒性筛选和遗传毒性评价具有良好的前景。
- 欧红梅周长慧涂宏刚黄鹏程常艳
- 关键词：CHO-K1细胞体外微核试验流式细胞术
- 体内彗星试验方法学研究进展被引量：3
- 2014年
- 体内彗星试验是一种简单的DNA损伤检测方法,可检测单链断裂、双链断裂、碱不稳定位点、DNA-DNA和DNA-蛋白质交联等。2011年11月,修订完成的ICH S2(R1)指导原则将体内彗星试验列入遗传毒性标准组合体内首选的第2个检测终点,故规范试验操作方法具有重要意义。该文主要依据JaCVAM联合验证试验,从给药方案设计、取样、样品处理、电泳,DNA损伤检测指标及可接受标准6个方面阐述目前公认的体内彗星试验方法,为该试验用于药物新药安全性评价研究等领域提供方法学参考。此外,本文就体内彗星试验的主要影响因素进行了探讨,希望进一步提高该试验准确性和可重复性。
- 欧红梅周长慧涂宏刚常艳
- 关键词：DNA损伤影响因素
- p53基因状态对体外微核试验结果影响的研究进展被引量：3
- 2015年
- 近年来,体外哺乳动物细胞遗传毒性试验假阳性率高的不足引起了毒理学研究者的关注。体外微核试验常用的啮齿类动物细胞系如CHO,V79,CHL和L5178Y,易产生假阳性结果,可能原因之一是啮齿类动物细胞系的p53基因为突变型,即p53基因功能缺陷。但也有观点认为,p53基因功能不同的细胞系不影响体外微核试验结果的判定。本文主要比较了不同细胞系体外微核试验结果,包括常用的p53基因功能缺陷的啮齿类动物细胞系、p53基因功能完整的细胞系和p53基因功能缺失的NH32细胞。希望有助于阐明遗传毒性化合物引起p53功能不同的细胞系的DNA损伤的机制,合理选择体外微核试验系统,从而降低体外微核试验结果的假阳性率。
- 欧红梅周长慧涂宏刚常艳
- 关键词：P53基因体外微核试验假阳性反应
