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王双

作品数：1 被引量：1H指数：1
供职机构：包头医学院生物医学研究中心更多>>
发文基金：中国博士后科学基金内蒙古自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

合作作者

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇原核表达
  • 1篇原核表达载体

机构

  • 1篇包头医学院
  • 1篇汕头大学

作者

  • 1篇王双
  • 1篇刘友
  • 1篇周立社
  • 1篇姜树原
  • 1篇张胜
  • 1篇邵国
  • 1篇黄丽华

传媒

  • 1篇包头医学院学...

年份

  • 1篇2012
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
人DNMT3B7原核表达载体的构建和表达被引量：1
2012年
目的:构建人类DNA甲基转移酶(DNMT)3B7原核表达载体,并进行初步表达。方法:根据Genebank中人DNMT3B7 cDNA序列设计并合成特异性引物;提取HCT116细胞总RNA并进行反转录,利用PCR技术扩增出DNMT3B7;将扩增产物克隆到原核表达载体PGEX-4T.3中,并对重组质粒进行鉴定;然后将重组质粒转化E.coli BL21,IPTG诱导表达目的蛋白。结果:PCR扩增得到人DNMT3B7的cDNA片段大小为1.1 kb,重组子利用限制性内切酶进行酶切、PCR鉴定和DNA序列分析得到原核表达载体PGEX-4T.3-DNMT3B7;IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析显示目的蛋白在E.coli BL21中高效表达,分子量约为40 kD。结论:成功构建了人DNMT3B7原核表达载体,完成了其在E.coli BL21中的诱导表达,为进一步在体外研究DNMT3B异构体提供了条件。
刘友姜树原黄丽华王双张胜周立社邵国
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