申子刚
- 作品数：18 被引量：34H指数：3
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学环境科学与工程更多>>
- 细胞编码microRNA在轮状病毒复制中的作用及其表达谱分析被引量：2
- 2011年
- 目的研究细胞编码miRNA在轮状病毒复制中的作用,并分析轮状病毒感染对于细胞编码miRNA种类及表达的影响,结合预测初步寻找具有重要功能的单个miRNA。方法首先,利用RNAi技术成功干扰MA104细胞中miRNA生成必须的Dicer酶,利用FFA法比较Dicer干扰组与阴性对照组感染后子病毒的滴度。然后,利用miRNA微芯片技术分析MA104细胞在2株轮状病毒SA11与Wa株感染后miRNA表达变化,通过聚类分析研究变化规律。结果干扰组MA104细胞的子病毒滴度显著增高。MA104细胞编码miRNA在2株轮状病毒感染后,约有200个miRNA有不同程度的变化。结合计算机预测,初步锁定miR-512-5p,miR-490,let-7c等10个miRNA可能在轮状病毒复制中具有功能。结论轮状病毒调节其感染细胞编码的miRNA的表达谱,反过来,细胞的Dicer及细胞编码miRNA影响轮状病毒复制。
- 张记彭杨何海洋申子刚吴玉章李晋涛
- 关键词：轮状病毒微小RNADICER酶
- 肠上皮细胞miR-146a与miR-155交互介导肠道发育中不同阶段的固有免疫耐受
- <正>哺乳动物的肠道是一个免疫耐受占主导的器官。在肠道的发育过程中,有两个重要的过渡阶段,一个阶段是刚出生后,另一个阶段是断奶期。在第一个时期,肠道从一个无菌环境突变为定植共生菌的环境。在第二个阶段,食物类型由高脂肪到碳...
- 张记何海洋申子刚田志强彭杨李晋涛吴玉章
- 文献传递
- 促红细胞生成素及其衍生物在制备治疗疾病中促进凋亡细胞清除的药物中的应用
- 本发明属于生物医药领域，涉及一种促红细胞生成素及其衍生物在制备治疗疾病中促进凋亡细胞清除的药物中的应用。所述应用包括在制备治疗急慢性炎症所致的疾病、自身免疫性疾病、动脉粥样硬化疾病和创伤愈合中促进凋亡细胞清除的药物中的应...
- 张志仁罗邦伟申子刚朱雯
- 文献传递
- MiR-155在断奶期接力miR-146a介导肠上皮固有免疫耐受
- 2015年
- 目的哺乳动物新生期肠上皮高表达mi R-146a介导固有免疫耐受,本研究探讨mi R-146a下降后肠上皮继续保持耐受状态的分子机制。方法定量PCR分析肠上皮mi R-146a与mi R-155表达模式,体外实验比较二者激活的刺激强度差异;转染及免疫印迹实验分析mi R-155在肠上皮免疫耐受中的功能及其可能调控靶标;小鼠提前断奶实验分析影响mi R-155激活的关键因素。结果肠上皮mi R-146a在新生期高表达并在断奶期降至极低水平,mi R-155则在断奶期剧烈上调;肠上皮中mi R-155激活强度显著高于mi R-146a;肠上皮高表达的mi R-155通过靶向抑制TAB2、IKKε、NIK等抑制炎症应答而非促进炎症;肠上皮mi R-155激活表达与哺乳动物断奶时间相关。结论哺乳动物肠道发育中,mi R-146a与mi R-155在断奶期发生功能接力,依次在新生期和成年期介导肠上皮固有免疫耐受。
- 张记田志强申子刚何海洋吴玉章李晋涛
- 关键词：肠上皮细胞MIR-155免疫耐受
- 人白介素17A和白介素26联合用于制备治疗轮状病毒感染的药物中的应用及方法
- 本发明公开了人白介素17A和白介素26联合用于制备治疗轮状病毒感染的药物中的应用及方法，通过先加入重组人IL‑17A，抑制轮状病毒复制，而后加入IL‑26，进一步清除轮状病毒，从而达到抑制其增殖并保护肠上皮细胞免受更深侵...
- 申子刚田志强张记吴玉章倪兵刘耀
- 文献传递
- 人Izumo蛋白的二级结构及B细胞抗原表位预测被引量：5
- 2010年
- 目的:预测人Izumo蛋白的二级结构及B细胞抗原表位。方法:以人Izumo基因序列为基础,按Chou-Fasman和Gamier-Robson方法预测其编码蛋白的二级结构,采用Karplus-Schulz方法预测Izumo蛋白骨架区的柔韧性;按Kyte-Doolittle方法预测其亲水性、Emini方法预测蛋白质表面可能性及Jameson-Wolf方法预测抗原性指数。结果:Chou-Fasman及Gamier-Robson两种方法预测的结果均表明,Izumo蛋白含较多的α螺旋,蛋白第6～17、30～40、88～99、103～120、153～160、173～188、249～260、283～297、334～338和339～346区段可能是α螺旋中心,第21～25、198～200、245～248和320～323区段可能是β折叠中心。用Kyte-Doolittle、Emini和Jameson-Wolf方法分别对Izumo蛋白B细胞抗原表位进行预测结果表明,蛋白质第36～42、62～66、94～99、118～122、129～132、151～154、161～164、173～177、205～208、212～216、256～265、271～276、283～288、314～318和336～350区段附近很可能为B细胞表位优势区域。结论:该研究结果有助于确定Izumo蛋白的B细胞优势表位及发挥免疫避孕的活性部位。
- 杨霞刘凯军申子刚何海洋张记张巧玉吴玉章李晋涛
- 基于Eppin优势中和B细胞表位的新型DNA避孕疫苗的制备和鉴定
- 2011年
- 目的制备基于Eppin优势中和B细胞表位的新型DNA避孕疫苗。方法采用PCR技术扩增mIL-4和Eppin B细胞表位基因,将其克隆到真核表达载体pVITR02-mcs,构建双盒表达载体,并将双盒表达质粒转染CHO细胞,检测其体外表达;将双盒表达质粒DNA与具有穿膜活性的HIV-1 TAT49-57阳离子肽,通过正负电荷吸引原理,制备成模拟病毒颗粒样的疫苗,并以DNA阻滞试验、DNaseⅠ保护试验和扫描透射电镜对该疫苗进行鉴定。结果 RT-PCR和免疫印迹结果表明转染细胞中均有目的分子的存在,在电荷比为4的条件下,该疫苗能形成类似病毒样的颗粒。结论成功制备了基于Eppin优势中和B细胞表位的模拟病毒颗粒样疫苗,为进一步研究避孕效果奠定了基础。
- 陈正琼杨鹰李晋涛申子刚何畏梁志清
- 关键词：DNA疫苗
- 胸腺肽α1体外刺激胃癌患者外周血单个核细胞对淋巴细胞亚群影响被引量：1
- 2010年
- 目的观察胸腺肽α1(thymosin α1,Tα1)体外刺激培养胃癌患者外周血单个核细胞(peripheral blood mono-nuclear cells,PBMCs)对淋巴细胞亚群分化及分泌细胞因子谱的影响,分析Tα1对肿瘤患者免疫功能的影响。方法分离32例胃癌患者及18例健康自愿者PBMCs,50、10、1μg/mlTα1体外刺激培养2d;流式细胞仪检测CD4+、CD8+、CD4+CD25+Foxp3+T细胞百分比、CD4+/CD8+变化及分泌Th1/Th2细胞因子谱变化。结果 Tα1体外刺激PBMCs后,胃癌患者及健康自愿者的CD4+、CD8+T细胞水平及CD4+/CD8+比值均无明显变化;健康自愿者CD4+CD25+Foxp3+T细胞水平无明显变化,胃癌患者CD4+CD25+Foxp3+T细胞水平明显提高(P<0.05);1μg/mlTα1促进胃癌患者PBMCs分泌IL-1β、TNF-α,10μg/ml促进胃癌患者PBMCs分泌IL-6(P<0.05),健康自愿者PBMCs分泌细胞因子谱变化不明显(P>0.05)。结论 Tα1体外刺激胃癌患者PBMCs,提高CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞亚群水平,可能对肿瘤患者抗肿瘤免疫起抑制效应。
- 杨霞钱锋孙刘凯军何海洋兰远志田易傅晓岚李健张记申子刚李晋涛吴玉章
- 关键词：胸腺素TH1细胞TH2细胞
- FSHR胞外区基因片段的原核表达及多克隆抗体的制备被引量：2
- 2009年
- 目的构建人卵泡刺激素受体(follicle stimulating hormone receptor,FSHR)胞外区的原核表达载体,并用纯化的重组蛋白免疫小鼠,制备抗血清。方法采用RT-PCR克隆人FSHR胞外区,将其克隆到原核表达载体pET32a(+),并通过IPTG诱导目的基因在大肠杆菌中表达,所获得的包涵体蛋白通过Ni-NAT离子交换柱层析纯化重组蛋白,并用SDS-PAGE和蛋白印迹法鉴定。结果PCR扩增出1 047 bp目的基因片段,测序证实克隆的基因序列与GenBank中的FSHR序列相符。工程菌pET32 a(+)/FSHR胞外区经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE显示有新生的蛋白表达条带,Mr约为58 000,与预期的一致。其表达形式为不溶性包涵体,此包涵体蛋白通过Ni-NAT离子交换柱层析纯化,纯化的蛋白质经SDS-PAGE分析可见单一条带。该蛋白免疫小鼠制备抗血清,抗体效价为1∶12 800,Western blot检测证实该抗体能与目的蛋白发生特异性结合。结论获得了人FSHR胞外区融合蛋白及特异性多克隆抗体,为进一步研究FSHR蛋白的功能奠定了基础。
- 阎萍申子刚何畏陈正琼何海洋张记杨霞唐艳吴玉章梁志清李晋涛
- 关键词：RT-PCR原核表达包涵体蛋白
- Rotavirus infection alters the expression of cellular microRNA species that mediates antiviral defense
- Rotaviruses(RVs)are the leading cause of severe diarrhea among infants and young children worldwide.Preventive...
- 申子刚田志强何海洋张记吴玉章
- 关键词：ROTAVIRUSESDIARRHEAREPLICATION
- 文献传递
