葛涛
- 作品数：11 被引量：61H指数：5
- 供职机构：解放军军需大学军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- 新城疫病毒对肿瘤细胞生物学行为的影响被引量：6
- 2003年
- 目的:研究新城疫病毒(NDV)对肿瘤细胞的作用。方法:采用空斑试验观察NDV对鸡胚成纤维细胞(CEF)的作用,通过细胞抑制试验、琼脂糖凝胶电泳、TUNEL染色、细胞骨架染色及细胞唾液酸含量测定等,观察NDV对肿瘤细胞的影响。结果:NDV对CEF、HeLa及Hep-2等肿瘤细胞可产生明显的病变,而对人的羊膜细胞(Wish细胞)无明显影响;对Hela细 胞和Hep-2细胞能产生明显的生长抑制作用,但无量效依赖关系。NDV还可导致以凋亡为主的细胞死亡,引起Hela细胞和Hep-2细胞的细胞骨架发生改变,以及去除肿瘤细胞表面唾液酸的作用。结论:NDV能选择性地作用于人肿瘤细胞,抑制肿瘤细胞的生长,导致肿瘤细胞发生凋亡,有望成为一种有效的抗肿瘤生物制剂。
- 薛立娟金宁一龚伟王宏伟孙大辉罗琴芳葛涛李萍
- 关键词：新城疫病毒肿瘤细胞生物学行为
- 新城疫病毒长春株和四平株致细胞死亡方式的研究被引量：4
- 2001年
- 目的 :研究NDV长春株和四平株致细胞死亡的方式。方法 :采用空斑试验、细胞抑制试验、琼脂糖电泳及TUNEL染色等方法进行研究。结果 :NDV长春株和四平株对鸡胚成纤维细胞 (CEF)、BHK、HeLa、Hep 2、HCT和OS 73 2等肿瘤细胞产生明显的病变 ,而对人的羊膜细胞 (Wish细胞 )无明显影响。结论 :长春株对肿瘤细胞的抑制作用强于四平株 ,长春株对肿瘤细胞的抑制不存在量效关系 ,只有最适剂量才引起最强的抑制作用。长春株和四平株在体外引起细胞死亡的途径不完全一致 ,长春株导致细胞死亡以凋亡为主 ,而四平株导致细胞死亡以坏死为主。
- 龚伟金宁一薛立娟罗琴芳孙大辉葛涛李萍
- 关键词：NDV细胞凋亡细胞坏死肿瘤细胞新城疫病毒
- 新城疫病毒抗肿瘤作用及其机制研究进展被引量：1
- 2002年
- 薛立娟葛涛王维忠金宁一
- 关键词：新城疫病毒抗肿瘤作用
- 新城疫病毒HN和鸡贫血病毒VP3基因联合抗肿瘤生物制剂
- 本发明提供3种能表达新城疫病毒HN基因及鸡贫血病毒VP3基因的联合抗肿瘤作用的核酸疫苗,分别为pIRHNVP3、pVHN和pVVP3。其中,pIRHNVP3转染真核细胞后,能同时表达HN蛋白和VP3蛋白;pVHN和pVV...
- 金宁一龚伟薛立娟丁壮葛涛金扩世郭志儒王宏伟李萍
- 文献传递
- 新城疫病毒HN基因构建的核酸疫苗抗肿瘤作用研究被引量：13
- 2003年
- 目的 :探讨HN基因在NDV抗肿瘤上发挥的作用。方法 :以pVAX1为表达载体构建了含NDVHN基因的pVHN核酸疫苗 ,以脂质体介导方法在体外转染OS732细胞 72h后 ,用 3,5 二羟基甲苯法测定OS732细胞膜唾液酸含量的变化。 6周龄BALB/c鼠左后肢皮下接种 2× 10 6个S180肿瘤细胞 ,分别于肿瘤接种后的第 7天 (肿瘤直径为 2～ 3mm)和第 17天瘤内注射 10 0 μg核酸重组体 ,同时设pVAX1对照组和单纯荷瘤对照组。荷瘤鼠经治疗后框窦采血 ,分离血清 ,测定血清唾液酸含量。取脾 ,采用FACS方法测定淋巴细胞亚群数量的变化。结果 :pVHN体外转染OS732细胞后 ,能显著降低细胞表面唾液酸含量 (P <0 .0 5 )。pVHN应用于荷瘤鼠显著降低血清中唾液酸含量 (P <0 .0 5 ) ,引起CD8+ T淋巴细胞亚群数量的增加 (P <0 0 5 )。结论 :单独HN基因在体外转染能够降低肿瘤细胞表面唾液酸含量 ,体内表达后引起T淋巴细胞亚群数量改变。
- 米志强金宁一龚伟薛立娟孙大辉葛涛连海解丽华
- 关键词：新城疫病毒HN基因核酸疫苗抗肿瘤作用
- HIV-1中国流行株gag与hIL-2在重组痘苗病毒中的共表达及其与核酸疫苗的实验免疫研究被引量：3
- 2002年
- 目的：将HIV-1中国流行株B亚型gag基因、gag和hIL-2基因在天坛株痘苗病毒中进行共表达，以期获得重组痘苗病毒，观察细胞因子的佐剂作用，与核酸疫苗混合免疫，评价免疫效果，为新型艾滋病疫苗研制开发打下基础。方法：将HIV-1中国流行株 gag基因、gag和hIL-2基因片段插入到 pJ38载体启动子下游，经同源重组和血凝素阴性空斑筛选重组痘苗病毒，SDS-PAGE、Western blot检测目的蛋白。以重组病毒和核酸疫苗免疫Balb/c小鼠，进行淋巴细胞转化实验、CTL、CD4+、CD8+ T细胞数目以及血清抗体的细胞免疫和体液免疫指标检测。结果：获得了重组痘苗病毒 vJ38gag和 vJ38gag-IL-2。与 vJ38-gag相比，vJ38gag-IL-2，具有更好的免疫原性，重组痘苗病毒免疫3次的效果好于重组病毒免疫2次，以2rVV-DNA混合免疫效果最好。结论：重组痘苗病毒vJ38gag和vJ38gag-IL-2能够表达外源蛋白并诱导机体产生细胞免疫和体液免疫。细胞因子IL-2发挥了免疫佐剂的作用。
- 王莉馨金宁一王宏伟秦云龙罗坤葛涛江文正金洪涛
- 关键词：HIV-1HIL-2痘苗病毒
- 新城疫病毒HN和鸡贫血病毒VP3基因联合抗肿瘤生物制剂
- 本发明提供3种能表达新城疫病毒HN基因及鸡贫血病毒VP3基因的联合抗肿瘤作用的核酸疫苗，分别为pIRHNVP3、pVHN和pVVP3。其中，pIRHNVP3转染真核细胞后，能同时表达HN蛋白和VP3蛋白；pVHN和pVV...
- 金宁一龚伟薛立娟丁壮葛涛金扩世郭志儒王宏伟李萍
- 文献传递
- 新城疫病毒抗肿瘤机理的研究
- NDV长春株和四平株对鸡成纤维细胞(CEF)、BHK及Hela、Hep—2、HCT和OS一732等肿瘤细胞产生明显的病变,而对人的羊膜细胞(Wish细胞)无明显影响。长春株对肿瘤的抑制作用强于四平株,长春株对肿瘤细胞的抑...
- 龚伟金宁一薛立娟罗琴芳孙大辉葛涛李萍
- 关键词：NDVHN基因F基因坏死肿瘤细胞
- 新城疫病毒pIRHN核酸疫苗构建和表达及对肿瘤细胞的影响被引量：16
- 2002年
- 目的：研究NDV HN基因抗肿瘤作用及其可能机制。方法：以 pIRES1neo为表达载体构建了 NDV HN基因的pIRHN核酸疫苗，在体外转染HeLa细胞，用间接免疫荧光和Western blot检测pIRHN在真核细胞中表达状况，用荧光显微镜、DNA琼脂糖电泳及TUNEL染色等方法，检测HN基因导致细胞死亡的类型；用3，5-二羟基甲苯法测定HeLa细胞唾液酸含量的变化。结果：pIRHN 转染HeLa细胞后，能够在真核细胞中表达，能促进肿瘤细胞死亡，其死亡方式主要以诱导细胞凋亡为主，pIRHN使 HeLa细胞唾液酸含量减少。结论：用 NDV HN基因所构建的核酸疫苗能够在真核细胞中高效表达，表达的 HN蛋白主要位于胞膜，胞浆中亦有 HN蛋白表达；pIRHN具有抗肿瘤作用，可能通过其表达产物与肿瘤细胞唾液酸受体的相互作用，发挥其抗肿瘤作用。本实验为迸一步阐明NDV抗肿瘤作用机制提供了理论依据。
- 龚伟葛涛王宏伟罗琴芳孙大辉李萍金宁一薛立娟
- 关键词：唾液酸NDVHN基因基因疫苗肿瘤免疫学
- pIRVP3/pIRHNVP3核酸表达质粒的构建及对肿瘤细胞的影响被引量：10
- 2002年
- 目的 研究应用凋亡素基因 (VP3)和NDVHN基因联合抗肿瘤的可能性。方法 以pIRES1neo为表达载体构建了含鸡贫血病毒VP3基因和长春株HN基因的pIRVP3/pIRHNVP32个核酸重组质粒。将 2个重组质粒在体外转染HeLa和OS 732细胞 ,用荧光显微镜、DNA琼脂糖电泳及TUNEL染色等方法 ,检测凋亡素基因和HN基因导致细胞死亡的类型。结果pIRVP3和pIRHNVP3转染HeLa和OS 732细胞 4 8h后 ,pIRVP3和pIRHNVP3均具有很强的诱导肿瘤细胞凋亡的能力 ,且pIRVP3的抗肿瘤作用强于pIRHNVP3。结论 在体外 。
- 龚伟薛立娟孙大辉王宏伟葛涛罗琴芳李萍金宁一
- 关键词：凋亡素NDVHN核酸生物制剂
