门海龙
- 作品数：5 被引量：12H指数：3
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- 壳聚糖介导细胞因子反应调节因子A对软骨细胞白细胞介素-1β和肿瘤坏死因子α表达的抑制作用被引量：4
- 2013年
- 目的观察壳聚糖介导细胞因子反应调节因子A（CrmA）对软骨细胞白细胞介素（IL）-1β和肿瘤坏死因子（TNF）-α表达的作用。方法体外培养兔关节软骨细胞，分别加入磷酸盐缓冲液（PBS）、10mg／L壳聚糖和壳聚糖／pCDNA3．1^＋CnnA微粒处理6h后，加入10μg/L IL-1β共培养48h，采用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）方法检测软骨细胞中IL-1β和TNF-αmRNA的表达。结果IL-1βmRNA在壳聚糖／pCDNA3．1^＋CrmA处理组（0．55±0．08）软骨细胞中的表达明显低于壳聚糖组（0．69±0．06，P〈0．01）和PBS组（0．99±0．04，P〈0．01），壳聚糖组软骨细胞IL-1β的表达与PBS组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。TNF—αmRNA在壳聚糖／pCDNA3．1^＋CrmA处理组（0．57±0．07）软骨细胞中的表达与壳聚糖组（0．71±0．05）和PBS组（0．99±0．06）比较均显著下降（P〈0．01），壳聚糖处理组TNF-α的表达与PBS组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论壳聚糖介导CrmA能够明显抑制IL-1β诱导的软骨细胞IL-1β和TNF-α的表达。
- 邱波门海龙郑义宋其合陈庆汪喆
- 关键词：骨关节炎软骨细胞壳聚糖
- 曲古抑菌素A对小鼠胶原诱导性关节炎的影响及其机制被引量：1
- 2015年
- 目的:研究曲古抑菌素A(TSA)对胶原诱导性关节炎(CIA)小鼠病情的影响及其机制。方法:将DBA/1雄性小鼠随机分为模型组、TSA组、对照组。免疫34d后对小鼠进行关节炎病变评分、滑膜炎症评分、组织病理检查,通过实时荧光定量PCR及ELISA方法分别检测辅助性T细胞Th1、Th17、Th2细胞的代表性细胞因子干扰素(IFN-γ)、白细胞介素(IL)-17、-4mRNA及蛋白表达水平。结果:TSA组小鼠关节炎指数(2.81±0.10)显著低于模型组(3.63±0.23);TSA组IFN-γ、IL-17 mRNA表达水平(6.39±0.51,2.94±0.40)低于模型组(7.99±0.63,5.87±0.24),IL-4表达水平(2.11±0.15)ng/L高于模型组(1.12±0.07)ng/L。且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:TSA可能通过抑制Th1和Th17细胞分泌细胞因子IFN-γ及IL-17,增加表达Th2细胞IL-4因子来帮助缓解CIA病情。
- 陈亮门海龙朱世振
- 关键词：曲古抑菌素A类风湿性关节炎免疫应答
- 壳聚糖介导CrmA对软骨细胞凋亡的抑制作用研究被引量：3
- 2013年
- 目的探讨壳聚糖-pCrmA纳米粒对白细胞介素（IL）-1β诱导的软骨细胞凋亡的影响。方法制备壳聚糖-pDNA纳米粒并进行表征。荧光显微镜观察壳聚糖介导pIRES2-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）在原代软骨细胞中的转染，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）实验分析壳聚糖-plRES2-EGFP纳米粒的细胞毒性，蛋白印迹法分析壳聚糖介导的CrmA在软骨细胞中的表达，用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（TUNEL）法检测壳聚糖-pCrmA纳米粒对IL-1β诱导的软骨细胞凋亡的影响。采用单因素方差分析进行统计学分析。结果壳聚糖-pDNA纳米粒的粒径为50nm，壳聚糖-pDNA纳米粒中的pDNA在pH2．0和pH7．4缓冲液中呈双相释放。壳聚糖能够介导基因CrmA在软骨细胞中表达。壳聚糖-pDNA纳米粒无细胞毒性。壳聚糖-pCrmA纳米粒处理组软骨细胞凋亡率明显低于壳聚糖组（P〈0．05）与磷酸盐缓冲液组（P〈0．01）。结论壳聚糖是一种有效的非病毒基因载体，壳聚糖-pCrmA纳米粒能够显著抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡。
- 门海龙邱波郑义宋其合陈庆
- 关键词：骨关节炎壳聚糖纳米粒细胞凋亡
- 血管内皮生长因子对软骨细胞凋亡的作用被引量：4
- 2014年
- 目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)对软骨细胞凋亡的影响。方法乳鼠关节软骨细胞体外培养成功后,实验分为三组。每组加入不同处理因素进行干预,对照组:不加任何处理因素;VEGF组:VEGF 10 ng/m L;白介素(IL)-1β组:IL-1β10 ng/m L,连续培养48 h。采用流式细胞仪检测软骨细胞的凋亡率,采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白的表达,通过硝酸还原酶法检测上清液中一氧化氮(NO)的含量。结果软骨细胞的凋亡率VEGF组[(9.28±2.35)%]及IL-1β组[(17.14±5.07)%]明显高于对照组[(2.83±0.77)%];软骨细胞PCNA蛋白表达VEGF组(0.86±0.24)及C组(0.72±0.05)明显低于对照组(1.01±0.11);软骨细胞分泌的NO含量VEGF组[(112.31±12.73)μmol/L]及IL-1β组[(150.02±15.34)μmol/L]显著高于对照组[(49.35±6.68)μmol/L],差异均有高度统计学意义(P<0.01)。结论 VEGF能够介导软骨细胞凋亡,抑制软骨细胞的增殖活性。
- 朱世振邱波高明勇宋其合门海龙
- 关键词：血管内皮生长因子骨关节炎软骨细胞凋亡
- 壳聚糖/pCDNA3.1（＋）CrmA对软骨细胞基质金属蛋白酶1及其抑制因子表达的影响被引量：2
- 2014年
- 目的 探讨壳聚糖/pCDNA3.1（＋）CrmA对IL-1β诱导的软骨细胞MMP-1及其特异性组织抑制因子（TIMP）-1 mRNA和蛋白表达的影响.方法 体外培养兔关节软骨细胞,分别加入PBS、10μg/ml壳聚糖/pCDNA3.1（＋）和壳聚糖/pCDNA3.1 （＋）CrmA处理后,加入10 ng/ml IL-1β共培养,采用实时定量RT-PCR方法检测各组软骨细胞MMP-1和TIMP-1 mRNA的表达,蛋白印迹法分析各组软骨细胞MMP-1和TIMP-1蛋白的表达.采用单因素方差分析进行统计学分析.结果 壳聚糖/pCDNA3.1 （＋）CrmA处理组软骨细胞MMP-1 mRNA（0.44±0.04）的表达明显低于PBS组（1.00±0.05）和壳聚糖/pCDNA3.1（＋）组（0.76±0.07）,3组比较差异有统计学意义（F=106.93,P＜0.01）.与PBS组（0.73±0.06）和壳聚糖/pCDNA3.1（＋）组（0.46±0.05）比较,壳聚糖/pCDNA3.1 （＋）CrmA处理组（0.28±0.03） MMP-1蛋白的表达显著降低（F=59.66,P＜0.01）.各组间TIMP-1 mRNA和蛋白的表达差异无统计学意义.结论 壳聚糖/pCDNA3.1 （＋）CrmA能够明显抑制IL-1β诱导的软骨细胞MMP-1 mRNA和蛋白的表达,上调IL-1β诱导的软骨细胞TIMPs/MMPs的比值,这可能成为壳聚糖/pCDNA3.1 （＋）CrmA减轻OA软骨退变的原因之一.
- 朱世振邱波门海龙周庞虎
- 关键词：骨关节炎壳聚糖基质金属蛋白酶类
